动物细胞融合和单克隆抗体的制备-副本

动物细胞融合与单克隆抗体学习目标：举例说出动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用学习重点和难点：单克隆抗体的制备和应用提问：哪种植物细胞工程技术可以突破不同生物之间的生殖隔离障碍，培育出新的作物类型？

植物体细胞杂交技术你能回忆出植物体细胞杂交的过程吗？植物体细胞杂交技术过程图动、植物细胞在结构上有何区别？无细胞壁全能性受限制，不能发育成杂种动物动物细胞杂交与植物细胞杂交的不同：不需去除细胞壁不能发育成新的动物个体思考动物细胞融合的概念

动物细胞融合也称细胞杂交，是指

或

动物细胞形成一个细胞的过程动物细胞融合融合后形成的单核细胞称为杂交细胞多个两个请同学们阅读课本P52动物细胞融合细胞A细胞B杂种细胞生物：灭活的病毒物理法化学法动物细胞体外融合诱导方式用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程细胞核病毒颗粒细胞核灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面先质融合，再核融合细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）问题讨论2、动物细胞融合有什么意义？1、不灭活的病毒能作为诱导剂吗？病毒一般对生物体是有伤害的。不灭活的病毒会感染细胞，而不能诱导细胞融合。灭活的病毒物理或化学方法丧失感染活性保留融合活性突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能。主要用于制备单克隆抗体有何同？不同？动物细胞融合植物体细胞杂交植物、动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理步骤诱导方法用途主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株物理、化学方法（同左）灭活的病毒

物理（离心、振荡、电激）化学（聚乙二醇）使细胞分散后诱导细胞融合去壁→诱导融合→组培细胞膜的流动性细胞膜的流动性细胞全能性由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。

单克隆抗体特点：

特异性强、灵敏度高抗体是由何种细胞产生的？2.抗体是如何产生的？主要分布于哪里？？单克隆抗体抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。浆细胞产生抗体。主要存在于血清中。B淋巴细胞与抗体的关系动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。每一个淋巴细胞只能产生一种抗体。..传统的抗体的生产方法及缺陷是什么？怎样解决这个问题？？单克隆抗体传统制备抗体的缺点：传统制备抗体的方法是：

产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何获得化学性质单一、特异性强的抗体？（怎样才能大量生产单克隆抗体？）单克隆抗体提示：1.什么样的细胞可以产生抗体？2.什么样的细胞可以无限增殖？？

设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞单克隆抗体B淋巴细胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤细胞培养骨髓瘤细胞融合（只考虑两两融合）培养液中融合细胞几种类型？骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞B淋巴细胞---B淋巴细胞B淋巴细胞---骨髓瘤细胞多种杂交细胞在具有筛选作用的培养基上培养专一抗体检验阳性克隆上述杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞单克隆抗体注射到小鼠体内体外培养2、单克隆抗体的制备过程第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能无限增殖又能产生专一的特异性抗体。杂交瘤细胞有何特点？特异性强，灵敏度高免疫小鼠培养骨髓瘤细胞融合骨髓瘤细胞B淋巴细胞注射特定抗原蛋白选择培养基上培养专一抗体检验阳性专一抗体检验阳性注射到小鼠体内体外培养单克隆抗体克隆杂交细胞分开不同杂交细胞，克隆专一抗体，检验阳性细胞多种杂交细胞杂交瘤细胞有何特点？本过程利用的那些技术？动物细胞融合技术动物细胞培养技术是否注射抗原（只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？几种融合细胞？两次筛选的目的分别是什么？2、单克隆抗体制备过程与传统制备的抗体相比具有什么特点？①诊断疾病单克隆抗体的应用②用于治疗疾病和运载药物

（导向作用，作为载体，生物导弹=单克隆抗体+药物，治疗肿瘤）（位置准确、疗效高、副作用小）两个过程动物细胞融合过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法一个新细胞一个优势课堂小结你记住了吗？－－灭活的病毒－－杂交瘤细胞－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（）A．结果是相同的 B．杂种细胞的形成过程基本相同C．操作过程中酶的作用相同D．诱导融合的手段相同Ｂ即时训练

单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞，在这种培养基上不能存活增殖的细胞是（）①淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A．②④B．①③C．①②③④D．②③C

下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案2、该方案能达到预期效果吗？为什么？1、该实验方案的目的是__________3、A是从小鼠的脾脏中取得_______,该细胞能够产生______制备单克隆抗体B细胞抗体B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案4、图中B为________过程，常用_________作为诱导剂，该细胞继承___________的遗传特性，既能__________,又能___________。细胞融合灭活病毒双亲细胞分泌特异性抗体无限增殖B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC

下图为某同学根据杂交瘤技术的方法，设计的生产破伤风杆菌的抗体实验方案5、C过程指细胞培养，该过程包括_____培养和_____培养两个阶段，其中_____代以内的的细胞属于细胞株。原代传代50B体外培养骨髓瘤细胞杂交瘤细胞足够数量的细胞群注射到小鼠腹腔AC1、阴性：测试区中出现一条紫红色线（对照线C线），表明未怀孕。2、阳性：测试区中出现两条紫红色线（对照线C线和检测线T线），表明怀孕。不同怀孕阶段的检测线显色强度随HCG浓度的改变而改变。3、无效：测试区无紫红色线出现或测试区仅出现