标准解读
《GB/T 27537-2011 动物流感检测 A型流感病毒分型基因芯片检测操作规程》是中国国家标准化管理委员会发布的一项国家标准,主要针对A型流感病毒的检测方法进行了规范。该标准详细描述了使用基因芯片技术对A型流感病毒进行快速准确鉴定的操作流程。
根据标准内容,整个检测过程包括样品采集、核酸提取、反转录、PCR扩增以及最终的基因芯片杂交分析等多个步骤。首先,在样品处理阶段,需要从疑似感染动物体内获取样本,并通过适当的方法纯化得到高质量的病毒RNA。接下来是将提取到的RNA逆转录成cDNA,并利用特异性引物对其进行PCR扩增以富集目标序列。随后,将扩增产物与预设好的基因芯片进行杂交反应,通过荧光扫描等手段读取信号强度来判断是否存在特定类型的A型流感病毒及其亚型信息。
此外,《GB/T 27537-2011》还规定了一系列质量控制措施和技术参数要求,确保实验结果的可靠性和重复性。比如对于所使用的试剂盒、仪器设备以及实验室环境都有明确的规定;同时强调了在实际操作过程中需要注意的安全防护事项,防止生物污染和交叉感染等问题的发生。
该标准适用于各类从事动物流感监测工作的机构和个人参考执行,旨在提高我国对A型流感病毒感染状况的监控能力,为及时采取防控措施提供科学依据。
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- 现行
- 正在执行有效
- 2011-11-21 颁布
- 2012-03-01 实施
文档简介
ICS11220
B41.
中华人民共和国国家标准
GB/T27537—2011
动物流感检测A型流感病毒分型基因
芯片检测操作规程
Animalinfluenzadetection—ProtocolofDNAmicroarrayexamination
forinfluenzaAvirussubtypes
2011-11-21发布2012-03-01实施
中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布
中国国家标准化管理委员会
GB/T27537—2011
前言
本标准按照给出的规则起草
GB/T1.1—2009。
本标准由中华人民共和国农业部提出
。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口
(SAC/TC181)。
本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中国人民解放军军事医学科学院中国兽医药品监
:、、
察所
。
本标准主要起草人韩雪清刘伯华李建林祥梅王慧煜刘建陈茹侯义宏刘业兵贾广乐
:、、、、、、、、、、
吴绍强梁成珠秦智锋宁宜宝薄清如王伊琴
、、、、、。
Ⅰ
GB/T27537—2011
动物流感检测A型流感病毒分型基因
芯片检测操作规程
1范围
本标准规定了型流感病毒分型基因芯片检测的操作规程
A。
本标准适用于口岸样品中型流感病毒全部亚型的筛查
A(H1~H16,N1~N9)。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文
。,
件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件
。,()。
分析实验室用水规格和试验方法
GB/T6682
3缩略语
下列缩略语适用于本文件
。
和质控探针和
ctr1、ctr2ctr3:1、23(control1、control2andcontrol3)
焦碳酸二乙酯
DEPC:(diethylpyrocarbonate)
脱氧核苷酸三磷酸
dNTP:(deoxy-ribonucleosidetriphosphate)
磷酸盐缓冲盐水
PBS:(phosphatebuffersolution)
核糖核酸
RNA:(ribonucleicacid)
反转录聚合酶链反应
RT-PCR:(reversetranscriptionpolymerasechainreaction)
十二烷基磺酸钠
SDS:(sodiumdodecylsulfate)
氯化钠柠檬酸钠缓冲液
SSC:/(sodiumchloride-sodiumcitratebuffer)
羧基四甲基若丹明
TAMRA:(carboxytetramethylrhodamine)
4主要试剂和仪器
41主要试剂
.
411试验用水
..
蒸馏水按照三级用水除另有规定外所用生化试剂均为分析纯
,GB/T6682,,,。
412提取试剂
..
试剂等或商品化的病毒提取试剂
TrizolRNA。
413A型流感病毒多重不对称RT-PCR扩增引物和探针的合成
..
特异性引物和探针参见附录探针和引物合成后采用无酶的水参见附录分别溶解
(A)。
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