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检验科分子生物室出科小结岁月如梭,光阴似箭,不知不觉在检验科分子生物室的时间已接近尾声了。回想在检验科实习的这三个月时间里,在指导老师的带领下自己真的学会了不少。通过自己的勤奋在积极协助老师完成分子生物检验项目的同时,我发现自己的操作能力不说有了很大程度的提高但也有了更大的进步了,相比在学校的时候操作起来更熟练了。分子诊断学作为一门新兴的学科,在疾病的诊断、疗效监测等多方面都逐渐扮演起了重要的角色,但真正能很好的将分子生物学诊断信息运用好的医务工作者还只是少数,不少医生目前仍对传统的检验项目的临床意义和可信度仍然怀有质疑的态度,更不用说一些刚发展起来的检验项目。因此作为检验专业的实习生不仅要掌握分子诊断学常用检验项目的原理、方法,更应该孰知其临床意义,更好的与临床进行沟通,才能更好的运用先进的检验诊断技术为患者服务。我的实习内容主要有:HBVDNA检测(定性和定量)、HCVRNA检测(定量):核酸提取是扩增前最主要的步骤,每个环节都要注意防止交义污染。主要步骤:每个EP管加100微升DNA浓缩液,再加100微升待测血清,震荡混匀,离心12000rpmx10min用加样枪弃上清,加30微升DNA提取液,震荡,金属浴(100〃C)10min,离心12000rpmx5min。提取后,配试剂,加样,扩增1h45min,扩增仪型号为7300。分析结果。注意,金属浴过程中,金属浴箱要盖上,每个EP管要盖严,防止加热过程中发生爆管,造成实验室的污染。若发生爆管,详细记录好发生爆管的标本编号,爆管发生的原因,时间等情况。HSV-II型病毒DNA检测(定量)、HPV病毒(6、11型和16、18型)DNA检测(定量)的标本均为分泌物,标本加生理盐水,震荡,取1ml至EP管,离心12000rpmx5min,弃上清,注意沉淀易漂起,不要讲沉淀弃掉,加50微升DNA提取液,農荡,金属浴(100C)10min。然后配试剂,加样,扩增1h20min,PCR仪为7600。检验结果需要与患者的病史、临床信息综合分析,绝对不可仅仅只凭PCR结果进行疾病的诊断。核酸杂交主要是指HPV21型检测,标本多为女性的阴道分泌物,首先提取DNA,进行核酸体外扩增,得到扩增产物,然后金属浴煮沸,淬火,得到大量单链的DNA片段,将单链DNA片段加入到500微升杂交液中(之前的DNA提取及淬火等操作在标本处理间进行,扩增在核酸扩增间进行),并到产物分析间进行核酸的杂交,每台杂交仪可一次做15个标本,应注意防止漏液和交叉污染。其他流式细胞术等,但由于标本量较少,平时多的不多。通过在三个月的实习,我熟悉分子室常规的检查项目,掌握标本的签收和处理,掌握PCR的原理,核酸(DNA和RNA)的提取,PCR仪的使用,熟悉核酸杂交的原理和操作方法及杂交仪的使用。了解各检测项目的临床意义。分子诊断学是一门有力的科研武器不仅可以运用于临床诊断,在今后的工作中我们也可以运用这一门学科,在学术上进行更深入的探索在实习结束之际,我要感谢分子生物学室每一位老师,感谢他们耐心、亲切的教导,是他们严谨、一丝不苟的工作态度教育了我,是他们团结协作、融洽的工作气氛感染了我。他们循循善诱给我讲解,他们耐心规范了我的操作,他们给予我很大的信任与鼓励,。而我能做的是在今后的
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