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文档简介

实验室化验结果的判读

(血常规分析)目录1血液学(及全血细胞计数仪)相关基础知识2影响血常规结果的因素3各项指标解读4直方图解读5血常规结果出错解读6临床病例研究一、血液学(及血细胞计数仪)相关基础知识(1)血常规定义(2)血细胞(3)血细胞计数仪及三分类五分类(1)全血细胞计数(英文:completebloodcount,CBC):又称为血常规、血象、血细胞分析、血液细胞分析、血细胞计数或血液细胞计数。(2)血细胞:

血细胞分析仪测试原理的改进,主要体现在白细胞分类方面的改进.对WBC来说,从单分类到三分类,五分类甚至九分类(3)三分类:淋巴细胞(小细胞亚群),中性细胞(单核细胞亚群)和粒细胞群(大细胞亚群)(4)五分类:嗜中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞血液由血浆(plasma)和血细胞(bloodcell)组成。从血管取少量血液加入适量抗凝剂(如肝素或枸橼酸钠),有形成分经自然沉降或离心沉淀后,血液可分出三层:(1)上层为淡黄色的血浆;(2)下层为红细胞;(3)中间的薄层为白细胞和血小板。血浆相当于结缔组织的细胞间质,约占血液容积的55%,其中90%是水,其余为血浆蛋白(白蛋白、球蛋白、纤维蛋白原)、脂蛋白、脂滴、无机盐、酶、激素、维生素和各种代谢产物。血液流出血管后,溶解状态的纤维蛋白原转变为不溶解状态的纤维蛋白,于是凝固成血块。血块静置后即析出淡黄色清明的液体,称血清(serum)。血细胞红细胞5.5-8.5*1012/ul白细胞6-17*109/ul血小板200-500*109/ul血细胞体积:红细胞:呈双凹圆盘状,犬为6.0-7.0um,猫为5.5-6.0um,白细胞:也被称为白血球。血液中红细胞比白细胞多得多。血液样本中每有一个白细胞将有600~700个红细胞;中性粒细胞:直径10-12μm嗜酸性粒细胞:直径10~15μm嗜碱性粒细胞:直径10-12μm单核细胞:直径14~20μm淋巴细胞:圆形或椭圆形,大小不等。直径6~8μm的为小淋巴细胞,9~12μm的为中淋巴细胞,13~20μm的为大淋巴细胞血小板体积甚小,直径2~4μm,呈双凸扁盘状白细胞(WBC)红细胞(RBC)血红蛋白(HGB)红细胞压积(HCT)平均红细胞体积(MCV)平均红细胞血红蛋白含量(MCH)平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)血小板(PLT)中性粒细胞百分比(OTHR%)淋巴细胞百分比(Lym%)嗜酸性粒细胞百分比(Eo%)中性粒细胞绝对值(OTHR#)淋巴细胞绝对值(Lym#)嗜酸性粒细胞绝对值(Eo#)红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)血小板体积分布宽度(PDW)血小板平均体积(MPV)大血小板比率(P-LCR)

血红蛋白(HGB)血红蛋白存在于红细胞内,通常红细胞总数、血细胞压积和血红蛋白浓度的变化一致。但是,当发生低色素性贫血时,可见红细胞总数无变化或偏低,血红蛋白含量较正常少,常见于缺铁性贫血的犬。红细胞压积(HCT)血液经抗凝处理后,通过离心可以把血液分为两大部分,血浆和血细胞。如果将血液放在一个特殊的试管中(温氏管)按规定的时间和速度进行离心,最终使得红细胞完全压实在试管的底端,红细胞之间互相接触密切,尽可能排除所有血浆,此时血浆会全部被挤出到血细胞的上面,这时红细胞所占全血的百分比就是我们所要得到的红细胞压积,即压实的红细胞所占的体积数(或百分比),也叫红细胞比积或红细胞比容。平均红细胞体积(MCV)平均红细胞体积(MCV)是指机体单个红细胞的平均体积,通常是间接计算得到。平均红细胞血红蛋白含量(MCH)指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量,以皮克(pg)为单位,MCH=Hb含量/红细胞百万数,临床上用于对贫血进行形态学分类指每升红细胞中平均所含血红蛋浓度,以g/L表示。平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)红细胞体积分布宽度(RedbloodCelldistributionwidth,RDW),是用红细胞直方图分布的宽度比上其高度来衡量红细胞体积离散程度的指标,血细胞分析中包括此项目。红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)血小板平均体积(MPV)代表的是外周血中单个血小板的平均体积,也就是血液中所有血小板的体积的平均数.红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)红细胞体积分布宽度(RedbloodCelldistributionwidth,RDW),是用红细胞直方图分布的宽度比上其高度来衡量红细胞体积离散程度的指标,血细胞分析中包括此项目。红细胞体积分布宽度变异系数(RDW-CV)红细胞体积分布宽度标准差(RDW-SD)血小板分布宽度(plateletdistributionwidth,PDW)是反映血液内血小板容积变异的参数,以测得的血小板体积大小的变异系数表示。PDW在正常范围内表明血小板体积均一性高。大血小板比率(P-LCR)血小板是由一种叫做“产血小板型巨核细胞”形成的。“产血小板型巨核细胞”很大,它是被“裁剪”为小小的血小板的。“大血小板”就是没有被裁剪的血小板。大血小板比值是大血小板占所有血小板的比例。大血小板的比值增高,说明血小板的成熟度降低犬不同年龄段血细胞参考值亦有不同

年龄(天)项目0-314-1728-3140-4556-59犬数量4646484442RBC(×106/μL)4.8±0.83.5±0.33.9±0.44.1±0.44.7±0.4Hgb(g/dL)15.8±2.99.9±1.19.6±0.99.2±0.710.3±0.9PCV(%)46.3±8.528.7±2.928.4±2.528.3±2.331.4±2.4MCV(fL)94.2±5.981.5±3.371.7±3.568.2±2.665.8±2.3MCH(pg)32.7±1.828.0±2.024.3±1.622.4±1.021.8±1.2MCHC(g/dL)34.6±1.434.3±1.633.5±1.432.4±1.732.6±1.8nRBC/100WBC7.2±6.72.4±3.81.1±1.50.6±0.90.1±0.4Reticulocytes(%)6.56.75.84.53.6WBCs/μL16,800±5,70013,600±4,40013,900±3,30015,300±3,70015,700±4,400AbsolutenumberofWBCs/μL

Bandneutrophils600±500200±200100±200200±200300±300Segmentedneutrophils9,200±6,6006,900±3,1006,800±2,0007,400±2,4008,500±2,900Lymphocytes3,700±2,3004,900±1,7005,400±1,6006,100±1,9005,000±1,500Monocytes1,400±1,3001,100±6001,100±6001,300±6001,400±700Eosinophils400±400500±500400±400300±300400±400Platelets/μL302,000290,000287,000321,000411,000Myeloid:erythroidratio1.6:11.7:11.7:11.8:11.4:1

0~2月龄正常比格犬血细胞参考值正常成年犬血细胞参考值项目单位参考值RBC×106/μL5.5-8.5Hgbg/dL12.0-18.0PCV%37-55MCVfL60-77MCHCg/dL32-36Reticulocytes%0.0-1.5Reticulocytes/μL<70,000Leukocytes(/μL)/μL6,000-17,000Bandneutrophils/μL3,000-11,500Segmentedneutrophils/μL0-300Lymphocytes/μL1,000-4,800Monocytes/μL150-1,350Eosinophils/μL100-1,250Basophils/μLRarePlateletcount/μL200,000-500,000MPVfL6.7-11.1红细胞评价红细胞比积(HCT)的临床意义※

红细胞数量和大小※

血浆容量※

贫血辅助诊断与贫血程度判断※

红细胞各项平均值计算,辅助贫血分类1.增高:各种原因所致血液浓缩,生理性2.降低:见于各种贫血贫血:指由多种原因引起外周血单位容积内血红蛋白(Hb)浓度、红细胞计数(RBC)及血细胞比容(Hct)低于正常值。贫血的形态学分类1贫血类型MCVMCHMCHC常见疾病正常细胞性NNN急性失血、溶血、再障大细胞性↑↑N叶酸、维B12缺乏小细胞低色素性↓↓N铁、维B2缺乏、珠蛋白肽链合成障碍单纯小细胞性↓↓↓慢性炎症、尿毒症红细胞几个平均值的临床意义贫血的形态学分类2RDW的临床意义类别MCVRDW正常动物NN

缺铁性贫血↓↑巨幼红细胞贫血↑↑溶血性贫血↑↑铁粒幼细胞贫血N↑

再障NN贫血类型常见疾病大细胞均一性部分再障大细胞不均一性巨幼细胞性贫血正细胞均一性急性失血正细胞不均一性再障、部分溶贫小细胞均一性地中海贫血小细胞不均一性缺铁性贫血缺铁性贫血的诊断和鉴别诊断采用形态分类法,除计算红细胞指数外,尚应强调血片的观察,因为红细胞形态的改变在血片中最为分明,正细胞性贫血并不意味着所有红细胞都是正常大小,并且红细胞大小不匀可能很明显,但其平均体积在正常范围内。大细胞性贫血中也可有不少小细胞出现。此外,形态改变的异形细胞也只有在血片中能观察到。红细胞形态:

再生性非再生性铁缺乏MCVN/↑N↓MCHC↓N↓RPI>2<1<1注释:MCV=红细胞平均容积MCHC=红细胞平均血红蛋白量RPI=网织红细胞生成指数RPI根据以下公式计算:RPI=[网织红细胞%×(患病动物血细胞比容/品种血细胞比容)]/校正指数品种血细胞比容=45%(犬),35%(猫)校正指数:PCV>35%=1;PCV25~35%=1.5;PCV15~25%=2;PCV<15%=2.再生性和非再生性贫血的鉴别红细胞计数增多红细胞增多的表现:外周血液中RBC增多PCV升高HGB增加红细胞分类和影响因素相对增多脱水脾脏收缩绝对增多原发性增多继发性增多品种和地理位置的影响海拔品种红细胞增多脱水相对增多脾收缩红细胞增多原发性绝对增多继发性缺氧EPO分泌过多白细胞的评价白细胞5分类WBC/白细胞无粒白细胞粒性白细胞淋巴细胞单核细胞嗜中性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞白细胞计数及分类计数的临床意义:1.白细胞数量的变化:(1)生理变化:年龄、时间、环境、身体状况等(2)病理变化:主要受中性粒细胞等各类细胞数量的影响炎症性嗜中性粒细胞增多感染细菌真菌病毒组织坏死无菌性炎症典型类固醇血像 常见于犬成熟嗜中性粒细胞增多(2-4倍)淋巴细胞减少嗜酸性粒细胞减少单核细胞增多嗜中性粒细胞增多症其它 爱尔兰赛特犬白细胞粘附缺陷 雌激素:注射后2-3周嗜中性粒细胞增多症炎症粒细胞再生不良内毒素血症无效粒细胞生成外周破坏周期性生血嗜中性粒细胞减少症周期性造血灰柯利一种血液遗传病,影响干细胞11-14天一个周期,干细胞分别向嗜中、红细胞、血小板、单核细胞分化患犬6月龄出现反复感染嗜中性粒细胞减少症外周血常见的白细胞形态异常:核象变化:

核左移(hyposegmentation)核右移(hypersegmentation)左移分类按出现幼稚细胞种类分轻度(杆状)中度(杆状+晚幼)重度(杆状+晚幼+中幼)按未分叶嗜中性粒细胞数分轻度<1000/ul中度1000-10000/ul重度>10000/ul嗜酸性粒细胞功能过敏原与肥大细胞上IgE结合时,肥大细胞发生脱粒并释放能吸引嗜酸性粒细胞的组织胺具有一定的吞噬作用和杀菌活性嗜酸性粒细胞将IgG或者补体与虫体表面结合,从而杀死虫体★嗜酸性粒细胞

增多(eosinophilia):

过敏性疾病

寄生虫病

皮肤病

血液病及某些恶性肿瘤

★淋巴细胞1)增多(lymphocytosis):

感染性疾病

淋巴细胞性恶性疾病

其他:免疫性疾病、急性传染病恢复期

相对增多2)减少(lymphocytopenia):

相对减少

绝对减少(接触放射线、应用肾上腺皮质激素、某些药物、免疫缺陷性疾病等)淋巴细胞外周血液淋巴细胞起源于骨髓或胸腺循环路线为从血液到淋巴结再到淋巴液,最后返回血液能重复循环的淋巴细胞寿命较长,一般能存活数月至数年功能免疫细胞 体液免疫(B) 细胞免疫(T)外周血液淋巴细胞是免疫系统的记忆细胞 重复循环时密切监测先前激活他们的抗原 当接触抗原后,选择性克隆扩增来激发机体的细胞免疫应答 和体液免疫应答血小板的评价生成血小板来源于骨髓内的巨核细胞促血小板生成素可促进血小板的生成促血小板生成素是由血小板和巨核细胞消除的。生理巨核细胞的成熟时间为2-10天。血小板量受血小板生成、消耗、破坏和转移的速度的影响。血小板的消耗是持续性的,如果其数量减少,平均寿命就会减少。猫的血小板容易结成团块。控制血小板寿命的因素不清,可能与脾有关犬三分之二到四分之三的血小板都存在于全身循环1000×视野(油镜)下观察到10-12个血小板属正常计数功能维持血管的完整性修复损伤的内皮内皮的损伤暴露时,血小板就会粘附在胶原纤维上血小板释放复合胺、组胺至血液中,促进血小板继续粘附形成血小板栓血栓收缩(粘性变形)破坏犬猫血小板在血管内的寿命一般在3-7天衰老的血小板被单核吞噬系统内的巨噬细胞吞噬MPV的临床意义:反映血小板的成熟度

与PLT结合分析鉴别血小板数量异常的原因:PLT↓MPV↑

表示血小板减少是周围血的原因PLT↓MPV↓

表示骨髓增生障碍PLT↓MPVN

表示血小板分布异常PLT↑MPV↑

表示反应性血小板增加PLT↑MPV↓

表示病变来至于骨髓病情判断:(1)动态观察:MPV增加,表示骨髓造血功能开始恢复;MPV持续下降,表示造血功能抑制更严重。(2)比较观察:MPV越低,越不易止血,越易出血。

(3)血栓前状态或血栓性疾病时MPV增加。影响血常规结果的因素(1)合适的采血方法(2)合适的抗凝剂(3)合适的方法储存血样(4)合适的时间开始检测(5)采血量是否充足合适的采血方法采血费时长,针头在皮下移动时刺入静脉或皮下组织,血细胞就容易聚集。一旦血小板团块形成,想要使之彻底离散是非常困难的。加入溶血素后,血小板团块的大小和小白细胞的体积一致。标本的抗凝

用于血常规检验的血样必须经抗凝剂抗凝处理,在目前的众多抗凝剂中,EDTA盐(EDTA-Na2,EDTA-K2,EDTA-K3)是对白细胞形态和血小板影响相对较小的抗凝剂,最适合用于血常规检验。除采血因素的影响(生理性因素、采血部位等)外,多数情况下,血样的质量取决于血液和抗凝剂的比例。血液比例过高时,由于抗凝剂相对不足,血浆中出现微凝血块的可能性增加,在用于血细胞分析仪时,微凝血块可能阻塞仪器,同时影响一些检验指标。血液比例过低,抗凝剂相对过剩,对检验指标会造成严重影响。血液经EDTA抗凝后,白细胞的形态会发生改变,这种改变和时间及EDTA浓度有关。EDTA的最佳浓度(与血液比)为1.5mg/ml,如果血样少,EDTA的浓度达到2.5mg/ml,中性粒细胞肿胀、分叶消失,血小板肿胀、崩解、产生正常血小板大小的碎片,这些改变都会使血常规检验和血细胞计数得出错误结果。这一点在用自动血细胞分析仪时尤为重要。

静脉血和末梢血均可经抗凝剂抗凝成全血标本(标本中不含稀释液,或对标本造成的稀释的影响极小),显而易见,末梢血抗凝标本要达到合适的血液和抗凝剂的比例是非常困难的。因此,多数专家建议,在制备全血比例是非常困难的。因此,多数专家建议血管采集静脉血。无论镜检或是使用血液细胞分析仪,由于绝大多数的对标本稀释的稀释液中含有抗凝剂,在一定量的稀释液中可直接加入微量静脉血或末梢血液(10-40μl)即可制备成通常所说的预稀释标本。多数情况下,预稀释标本的制备适用于末梢血的血样。

标本的储存

抗凝剂因时间和浓度的不同,会造成对血细胞形态的影响。有研究表明,用EDTA抗凝静脉血标本,在标本收集后的5分钟内或30分钟后,8小时内(室温)检测,可以得到最佳的检测结果。如果不需要血小板和白细胞分类的准确数据,则标本可以在2℃-8℃的条件下存入至24小时。预稀释标本一般需要在标本制备后10分钟内予以测量;如果稀释液中添加细胞稳定剂,预稀释标本的存放时间也不可超过4小时。总之,影响血常规检验结果的因素很多,要想取得准确的检验数据,就要在实验的每一个步骤中都严格按照操作规程进行。直方图解读血细胞直方图是一种细胞体积分布图。用DC(直流电阻抗)检测方法测量细胞体积。根据血液中细胞体积的分布,将它分为3个类型(白细胞、红细胞和血小板)异常直方图的解读

实例1:实例2:分析:实例3:分析:实例4:分析:

注意:由于形成的缗钱状红细胞(经常可在猫的血样中看见)在分析仪上稀释时可完全解离,将不会影响测量结果。实例5:

分析:此标本可看到散在的5-20个血小板团块。由于这些团块的存在,直方图上交叉点和PU升高。另外红细胞破裂产生的碎片、巨血小板症也可导致PU报警

实例6:白细胞直方图上阴影区显示有颗粒聚集。直方图上的分布曲线与阴影区和小白细胞区的分界线的交叉点抬高,提示血小板聚集。白细胞直方图的分布宽度不正常地宽提示白细胞聚集或未成熟的白细胞增多。

WL:可能的原因红细胞不完全溶血、出现有核红细胞、大血小板增加、血小板聚集、纤维蛋白沉淀和存在冷沉淀蛋白

WU:可能的原因红细胞不完全溶血、存在不成熟白细胞、白细胞聚集、血小板卫星现象实例7:红细胞直方图上的分布曲线与血小板和红细胞的分界线的交叉点抬高,提示红细胞碎片存在等。红细胞直方图的分布宽度不正常地宽。同时,红细胞直方图上出现多个峰,提示红细胞聚集等。RL:可能的原因存在红细胞碎片、大体积血小板增加、血小板聚集、存在小红细胞RU:可能的原因》

红细胞冷凝集作用、包含小-白细胞

实例8:在血小板直方图上,分布曲线和PL的交叉点位于不正常的高点。微血小板、存在冷沉淀蛋白等在血小板直方图上,分布曲线和PU的交叉点抬高。出现大血小板、RBC碎片、血小板团块等PL:可能的原因冷沉淀蛋白的作用、红细胞碎片、白细胞细胞片PU:可能的原因大血小板增加、包含红细胞碎片、冷沉淀蛋白、血小板团块、存在小红细胞CBC临床病例应用病例1:分析:通常,pocH-100iV的测量值在白细胞直方图上仅有一个峰,但由于淋巴细胞显著增加,该样本的直方图显示双峰。血涂片上小成熟淋巴细胞明显增加,如上边照片()所示,表示该系细胞增加。尽管此病例显示有中等度的贫血,但存在晚幼红和网织红(),证实这是增生性贫血。

淋巴细胞核小、胞浆无颗粒,定位在小细胞部分(左侧)。相应的,由CLL引起的淋巴细胞增加的标本,直方图上小白细胞部分显示双峰,其中之一就是淋巴细胞峰。另一方面,含有片段、颗粒和大核的细胞,定位于大细胞部分(右侧)。这样,颗粒细

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