标准解读

GB/T 18654.13-2008 是一项中国国家标准，全称为《养殖鱼类种质检验 第13部分：同工酶电泳分析》。该标准主要规定了利用同工酶电泳技术对养殖鱼类种质进行质量检测的方法、步骤和要求，以确保鱼类种质资源的优良性状得以保持和改善，促进水产养殖业的健康发展。下面是对该标准内容的具体说明：

标准适用范围

本标准适用于养殖鱼类种质的同工酶电泳分析，通过这种方法可以鉴定鱼类品种的纯度、遗传多样性及种群间的遗传关系，为鱼类种质资源的评估、选育及保护提供科学依据。

同工酶电泳基本原理

同工酶是指催化相同化学反应但分子结构有所差异的一组酶。同工酶电泳是一种生物化学技术，通过电场作用下蛋白质（此处指同工酶）在凝胶介质中的分离，来分析其多态性。不同基因型的个体，其同工酶谱带表现会有所差异，据此可进行遗传差异分析。

检验材料与样品制备

  • 样品选择：应从目标鱼类的不同群体中随机选取健康、无疾病的个体作为检测对象。
  • 组织采集：通常采集肌肉、肝脏、鳃等组织，具体依鱼种及实验需求而定。
  • 样品保存与处理：采样后需迅速冷冻或冷藏，以防止酶活性变化，随后根据实验要求进行提取和制备。

电泳条件与操作步骤

标准详细规定了电泳缓冲液的配制、凝胶的制备、样品加载、电泳条件（如电压、电流、时间）以及染色与脱色等具体操作步骤，确保实验结果的重复性和准确性。

结果分析与判定

  • 谱带观察：电泳结束后，通过特定染色方法使同工酶条带显色，然后对比分析各条带的位置、数量和强度。
  • 数据记录与比较：记录各样品的同工酶图谱，通过比对不同样品间谱带的异同，评估遗传相似性或差异。
  • 判定标准：根据谱带特征，可判定鱼类的遗传纯度、杂交程度或种群间的亲缘关系。

质量控制与注意事项

标准强调了实验过程中的质量控制措施，包括实验室环境控制、试剂与仪器校准、操作规范性等，确保检验结果的可靠性。同时提醒操作人员注意个人防护，遵守生物安全原则。

文档与报告

要求详细记录实验过程、所用材料、操作步骤及观察结果，并按照标准格式编制检验报告，以便于信息交流和后续研究。

该标准通过规范同工酶电泳分析方法，为养殖鱼类种质的科学管理和遗传改良提供了重要的技术支持和质量保障。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2008-06-27 颁布
  • 2008-10-01 实施
©正版授权
GB/T 18654.13-2008养殖鱼类种质检验第13部分：同工酶电泳分析_第1页
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文档简介

犐犆犛６５．１５０

犅５０

中华人民共和国国家标准

犌犅／犜１８６５４．１３—２００８

养殖鱼类种质检验

第１３部分：同工酶电泳分析

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２００８０６２７发布２００８１００１实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局

发布

中国国家标准化管理委员会

书

犌犅／犜１８６５４．１３—２００８

前言

ＧＢ／Ｔ１８６５４《养殖鱼类种质检验》分为下列部分：

———第１部分：检验规则；

———第２部分：抽样方法；

———第３部分：性状测定；

———第４部分：年龄与生长的测定；

———第５部分：食性分析；

———第６部分：繁殖性能的测定；

———第７部分：生态特性分析；

———第８部分：耗氧率与临界窒息点的测定；

———第９部分：含肉率测定；

———第１０部分：肌肉营养成分的测定；

———第１１部分：肌肉中主要氨基酸含量的测定；

———第１２部分：染色体组型分析；

———第１３部分：同工酶电泳分析；

———第１４部分：ＤＮＡ含量的测定；

———第１５部分：ＲＡＰＤ分析；

……

本部分为ＧＢ／Ｔ１８６５４的第１３部分。

本部分的附录Ａ为规范性附录。

本部分由中华人民共和国农业部提出。

本部分由全国水产标准化技术委员会淡水养殖分技术委员会归口。

本部分起草单位：上海水产大学、中国水产科学研究院长江水产研究所。

本部分主要起草人：李思发、赵金良、徐忠法、蔡完其、邹曙明。

Ⅰ

书

犌犅／犜１８６５４．１３—２００８

养殖鱼类种质检验

第１３部分：同工酶电泳分析

１范围

ＧＢ／Ｔ１８６５４的本部分规定了鱼类同工酶聚丙烯酰胺凝胶水平电泳分析的试剂与材料、仪器和设

备、抽样、分析步骤和结果判定。

本部分适用于鱼类同工酶电泳分析。

２规范性引用文件

下列文件中的条款通过ＧＢ／Ｔ１８６５４的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文

件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成

协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本

部分。

ＧＢ／Ｔ１８６５４．１—２００２养殖鱼类种质检验第１部分：检验规则

ＧＢ／Ｔ１８６５４．２养殖鱼类种质检验第２部分：抽样方法

３原理

同工酶为该酶基因产物的表现型，根据其所带电荷的不同和分子大小、形状的不同，在电场和凝胶

中出现各同工酶组分不同的迁移率，经催化、染色、扫描，根据酶带迁移距离、数目及吸收强度进行分析

比较，判定鱼类物种、种群的遗传特性。

４试剂和材料

除非另有说明，在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和蒸馏水或去离子水或相当纯度的水。

４．１丙烯酰胺（Ａｒｃ）。

４．２犖′，犖′亚甲基双丙烯酰胺或甲叉双丙烯酰胺（Ｂｉｓ）。

４．３四甲基乙二胺（ＴＥＭＥＤ）。

４．４过硫酸胺。

４．５三羟甲基氨基甲烷（Ｔｒｉｓ）。

４．６柠檬酸。

４．７乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ）。

４．８硼酸。

４．９Ｌ组氨酸。

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