检测生物组织中糖类脂肪和蛋白质

一.实验原理：某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。如：①.还原性糖的鉴定：还原性糖+②.脂肪的鉴定：

脂肪+脂肪+

③.蛋白质的鉴定：蛋白质+④淀粉+斐林试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ橘黄色苏丹Ⅳ红色双缩脲试剂紫色碘蓝色二.目的要求：

尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质1、还原糖的检测和观察：选材应该选择含

量高.颜色为植物组织以苹果.梨为最好。糖白色或近于白色制备组织样液：三.实验过程:制浆：去皮、切块、研磨过滤：（用单层纱布）取液：（２mL）可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀，说明植物组织样液中含有还原糖。注入2mL苹果组织样液注入1mL刚配制好的斐林试剂水浴加热约2min检测步骤变成砖红色50----650C的温水结论：甲乙液等量混匀振荡、混合摇匀呈现蓝色①还原糖有

。②试剂：

.（甲液：0.1g/ml

的

,乙液：0.05g/ml的

.）甲乙液必须

后再加入样液中，

。③必须

。葡萄糖，果糖，麦芽糖用水浴加热斐林试剂NaOHCuSO4等量混合均匀现配现用注意事项：④颜色变化：浅蓝色棕色砖红色2、脂肪的检测和观察：圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。方法一：待测组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色取材：花生种子(浸泡3～4h），将子叶削成薄片方法二：制作子叶临时切片，用显微镜观察子叶细胞的着色情况。制片①取最理想的薄片②在薄片上滴苏丹Ⅲ染液（2～3min）③去浮色（用50﹪酒精）④制成临时装片观察低倍镜下寻找到已着色的圆形小颗粒，然后用高倍镜观察结论：

注意事项：①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时有的地方清晰有的地方模糊。②酒精的作用是：

。③需使用显微镜观察④使用不同的染色剂染色时间不同，颜色变化：

。洗去浮色橘黄色或红色3、蛋白质的检测和观察：选材应该选择含

丰富的豆浆或鸡蛋清溶液。（避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖）蛋白质黄豆浆滤液或蛋清稀释液制备组织样液呈色反应组织样液2mL双缩脲试剂A液1mL双缩脲试剂B液4滴摇匀后变成紫色结论：说明组织样液中存在蛋白质。（3）注意事项：①试剂：

（A液：0.1g/ml的

；B液：0.01g/ml的

）先加

，再加

。

B液要求量适中，否则多余的B液将会与A液发生反应生成Cu（OH）2显色而遮盖原有的颜色。②鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比双缩脲试剂A液1mlB液4滴NaOH③用于蛋白质鉴定的蛋清必须稀释，以免实验后粘住试管壁，不易洗刷CuSO4蛋白质的检测结果斐林试剂与双缩脲试剂的比较：A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4紫色物质生成砖红色沉淀先加A液，再加B液，不需加热甲液与乙液先混再用，且现配现用，需加热蛋白质还原性糖试剂组成检验结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂问题探讨:1、在做还原糖、蛋白质鉴定的实验时，为什么要留出一部分样液？作对照2、使用双缩脲试剂时为什么B液只能加3～4滴而不能过量？

过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色。3、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？

时间太长，Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。深化4、淀粉的检测和观察：取材：马铃薯匀浆检测组织样液2mL碘液2滴结论：说明组织样液中存在淀粉。注意：常用材料：马铃薯试剂：

。颜色变化：

。碘液变蓝摇匀后变成蓝色试验常见错误总结1、药剂过量①淀粉中加碘液过多；②牛奶中过多CuSO4过多；③还原糖（果汁）中斐林试剂过多2、用品认错，试剂加错或者没加3、不是所有的牛奶都叫特仑苏，也不是所有的试验都需要加热4、对光不对，切片太厚等1.在下列四支试管中分别加入一些物质，甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;丁试管:人血液中的红细胞和蒸馏水.上述四支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是()A.甲、丁B.甲、乙、丁C.甲、乙、丙D.甲、丙

对应训练D2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是

Ａ．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定

Ｂ.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴

C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液

Ｄ．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用Ｂ3、青苹果汁遇碘液显蓝色，熟苹果汁能与斐林试剂作用产生砖红色沉淀，下列结论中最合理的是()A．青苹果汁中有淀粉，不含还原糖

B．熟苹果汁中含还原糖，没有淀粉

C．苹果转熟时，大量淀粉水解成还原糖

D．苹果转熟时单糖聚合成淀粉

C4、安徽阜阳劣