检测生物组织中的糖类脂肪蛋白质

一、实验原理：斐林试剂

水浴加热（50—65℃）还原糖砖红色沉淀脂肪苏丹Ⅳ染液橘黄色脂肪苏丹Ⅲ染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色反应碘液淀粉蓝色糖类选材——选无色、白色或浅色，避免材料自身的颜色对实验变化颜色的掩盖1、还原糖的检测选材制备组织样液（制浆、一层纱布过滤）取2ml待测组织样液加入1ml斐林试剂砖红色沉淀50—65℃水浴颜色变化：棕色砖红色沉淀(Cu2O)蓝色(Cu(OH)2)2、脂肪的检测和观察：圆形小颗粒呈橘黄色，说明有脂肪存在。方法一：组织样液+苏丹Ⅲ染液→橘黄色取材：方法二：制作临时装片，染色，显微镜观察制片①取最薄②染色③去浮色（50﹪酒精）观察显微镜镜结论：颜色浅或无，脂肪含量丰富注意事项：①切片要薄，如厚薄不均就会导致观察时

。②酒精的作用是：

。③用第二种方法需使用

观察

洗去浮色有的地方清晰有的地方模糊显微镜3、蛋白质的检测和观察：

选材

选含

丰富的豆浆或鸡蛋清溶液蛋白质制备组织样液呈色反应组织样液2mL双缩脲试剂A液1mL双缩脲试剂B液4滴摇匀后变成紫色结论：说明组织样液中存在蛋白质。1.某些植物，如菠菜，其叶片中含有大量的可溶性还原糖，但不宜做鉴定还原糖的实验材料，原因是（）A.叶片不宜磨碎B.研磨时糖类易被破坏C.叶片中叶绿素颜色较深，掩盖了实验结果观察D.叶片中光合作用的产物以淀粉的形式存在C对应训练2.在下列三支试管中分别加入一些物质，甲试管:豆浆;乙试管:氨基酸溶液;丙试管:牛奶和蛋白酶;上述三支试管中加入双缩脲试剂振荡后,有紫色反应的是()A.甲B.甲、乙C.甲、乙、丙D.甲、丙

D3.生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质三种有机物的鉴定实验中，以下操作错误的是（）A．可溶性还原糖的鉴定，可用酒精灯直接加热产生砖红色沉淀B．只有脂肪的鉴定需要使用显微镜C．用双缩脲试剂检测蛋白质不需要加热D．使用斐林试剂和双缩脲试剂最好是现配现用A4.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是

Ａ．用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定

Ｂ.脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴

C.鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液

Ｄ．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用（）Ｂ斐林试剂与双缩脲试剂的比较A液:0.1g/mLNaOHB液:0.01g/mLCuSO4甲液:0.1g/mLNaOH乙液:0.05g/mLCuSO4生成紫色络合物砖红色沉淀先加A液，再加B液，不需加热甲乙液等量混合，现配现用，需加热蛋白质还原糖试剂组成结果试剂用法检测对象双缩脲试剂斐林试剂六、应用1.检测尿糖——2.真假奶粉检测——3.真假脱脂奶粉检测——4.诊断是否患肾炎——5.检测唾液中是否含酶——斐林试剂双缩脲试剂苏丹Ⅲ/Ⅳ染液双缩脲试剂双缩脲试剂试卷《第一节细胞中的元素和化合物》P例2、7、8、10、15⑴斐林试剂砖红色葡萄糖⑵苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅲ能溶解在酒精中⑶过量的双缩脲试剂B会与试剂A发应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色⑷①分别配制、储存②0.1g/mlNaOH0.01g/mlCuSO4

③烧杯底部实验者④太大15．根据“检测生物组织中糖类、脂肪、蛋白质的鉴定”实验，回答下列问题：

（1）鉴定成熟苹果肉中存在还原性糖所用的试剂是__________________，该试剂与细胞内还原性糖发生作用，形成_______________沉淀，因此，可用该试剂检验糖尿病病人尿液中是否存在____________。

（2）鉴定花生子叶细胞中脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染液是____________，用其染色时，要用酒精来冲洗浮色，这是因为________________________________。

（3）鉴定黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B的量只有4滴，而不能过量，为什么？

__________________________________________________________________。（4）本实验注意事项：

①斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需_______________，使用时再临时混合均匀用于实验。②双缩脲试剂的使用，应先加试剂______________，造成碱性环境，再加试剂______。③在还原糖的鉴定中，对试管中溶液加热时，试管底部不要触及_____________，试管口不要朝向_____________________，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。④蛋白质的鉴定样品液浓度不能___________________，以免实验后粘住试管壁，洗不净。⑴斐林试剂砖红色葡萄糖⑵苏丹Ⅲ染液苏丹