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文档简介

1、RNA与DNA的提取与制备2、核苷酸的制备3、核苷的制备二、核酸类物质的分离提取及其发酵生产1发酵法制备RNA2酶法制备脱氧核苷酸酶法制备5’单核苷酸双酶法生产肌苷酸和鸟苷酸产氨短杆菌嘌呤核苷酸生物合成调节机制5受GMPATP的反馈抑制1被G阻遏2受GMP反馈抑制3被A阻遏4受ATPADPAMPGMP反馈抑制6受GTP的反馈抑制注：PRPP——5－磷酸核糖焦磷酸产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株IMP发酵机制肌苷酸诱变图谱肌苷酸产生诱变过程的产量变化1、选用产氨短杆菌腺嘌呤缺陷型菌株以解除腺嘌呤衍生物对的反馈抑制；2、提供亚适量A培养基通过补救途径合成微生物生命活动所需要的DNA，不足以产生反馈抑制的腺嘌呤衍生物；3、培养基中加入特异抑制IMP脱氢酶的化学物质（如8－氮杂鸟嘌呤）则IMP被切断，GMP不能生成，解除GMP的反馈抑制，使IMP进一步被积累；提高IMP产量的因素4、Mn2+在限量的情况下培养后期产氨短杆菌细胞膜容易透过细胞膜，并且嘌呤核苷酸补救合成所需的酶和中间体核糖－5－磷酸很容易透过，在细胞外重新合成大量的肌苷酸；5、因工业原料和工业水都含较高的Mn2＋，通过诱变育种的方法选育了对Mn2+不敏感的变异株，使发酵液Mn2＋含量高达1000g/ml时，肌苷酸的生物合成仍不受影响。3、核苷生产工艺流程二、核酸类药物生产1、叠氮胸苷2、阿糖腺苷3、三氮核苷4、阿糖胞苷5、聚肌胞苷酸6、胞二磷胆碱是美国FAD批准的治疗艾滋病的新药；68％的病人临床表现为减轻症状、延长寿命的显著疗效；副作用为贫血、白细胞减少，但有32％的患者服用后引起股骨头坏死、破坏人的造血功能。系核苷酸的类似物，取代正常腺嘧啶核苷酸参与病毒的合成但不能继续复制，从而达到阻止病毒增值的目的。1、叠氮胸苷－（Azidothymidine,AZT）叠氮胸苷AZT合成工艺商品名称病毒唑，主要应用于小儿呼吸系统的疾病治疗。显著改善艾滋病患者的症状，毒副作用小，价格便宜，比AZT相差50倍。它对病毒的作用点多，不易使病毒产生抗药性。2、三氮唑核苷（Vira301,RibacirinRTC)2、氮唑核苷生产工艺抑制DNA聚合酶，干扰DNA

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