标准解读

GB/T 17999.2-1999是一项中国国家标准，全称为《SPF鸡血清中和试验》。该标准规定了使用SPF（无特定病原体）鸡进行血清中和试验的方法，旨在检测抗病毒抗体的存在及其滴度，评估疫苗效果或研究动物对特定病毒的免疫反应。以下是该标准的主要内容概览：

标准适用范围

本标准适用于评价禽类疫苗效力及监测动物群体中针对特定病毒的免疫状态，通过测定SPF鸡血清中和病毒的能力来实现。

术语定义

  • SPF鸡：指无特定病原体的鸡，用于确保实验结果的准确性和可重复性。
  • 血清中和试验：一种生物测定方法，通过测定病毒与特异性抗体在体外反应后失去感染力的能力，来评估血清中的中和抗体水平。

试验材料与试剂

  • 规定了所需SPF鸡的来源、饲养条件及血清采集要求。
  • 列出了用于试验的标准病毒株、细胞培养条件、维持液及稀释液的具体要求。

试验步骤

  1. 病毒准备：详细说明了病毒的增殖、收获、灭活及滴定过程。
  2. 血清准备：包括血清的收集、处理及稀释方法。
  3. 中和反应：描述了将病毒与不同稀释度的血清预混合，然后加入敏感细胞培养的具体操作步骤。
  4. 观察与判定：规定了观察细胞病变效应（CPE）的时间点及判定标准，以确定血清的中和效价。

结果判定与计算

  • 介绍了如何根据细胞培养的CPE情况，通过计算血清的中和指数或中和滴度（如50%中和滴度，NT50）来评价血清的中和能力。

精密度与准确度

  • 提供了重复性与再现性的要求及评估方法，确保不同实验室间结果的一致性。

试验报告

  • 要求记录详细的试验条件、所用材料、操作步骤、观察结果及最终结论，确保试验的可追溯性。

注意事项

  • 强调了生物安全操作的重要性，以及在整个试验过程中需遵循的无菌操作规范。

该标准为SPF鸡血清中和试验提供了一套标准化流程，确保了实验结果的可靠性和可比性，是兽医研究、疫苗开发及动物疾病防控领域的重要参考依据。


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  • 被代替
  • 已被新标准代替，建议下载现行标准GB/T 17999.3-2008
  • 1999-11-10 颁布
  • 2000-04-01 实施
©正版授权
GB/T 17999.2-1999SPF鸡血清中和试验_第1页
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GB/T 17999.2-1999SPF鸡血清中和试验-免费下载试读页

文档简介

TC5.65.020.30B41中华人民共和国国家标准GB/T17999.2-1999SPF鸡血清中和试验SPFchicken-Serumneutralizationtest1999-11-10发布2000-04-01实施国家质量技术监督局发布

GB/T17999.2-1999前本标准参照美国SPAFAS公司的血清中和试验（SN)操作规程编制而成。SPF鸡微生物学质量控制国家系列标准,包括SPF鸡微生物学监测总则和9种SPF鸡微生物学检测方法。本标准为《SPF鸡血清中和试验》。SPF鸡微生物学检测方法还包括以下部分：GB/T17999.1-1999SPF鸡红细胞凝集抑制试验;GB/T17999.3—1999SPF鸡血清平板凝集试验：GB/T17999.4-1999SPF鸡琼脂扩散试验：GB/T17999.5—1999SPF鸡酶联免疫吸附试验；GB/T17999.6—1999SPF鸡旺敏感试验；GB/T17999.7—1999SPF鸡鸡白喇沙门氏菌检验;GB/T17999.8—1999SPF鸡试管凝集试验；GB/T17999.9—1999SPF鸡间接免疫荧光试验本标准由中华人民共和国农业部、国家科学技术部提出。本标准由农业部畜牧兽医司归口本标准起草单位：农业部实验动物研究中心、山东省农科院家禽研究所本标准主要起草人：赵立红、陈德威、张秀美、秦卓明

中华人民共和国国家标准GB/T17999.2-1999SPF鸡血清中和试验SPFchicken--Serumneutralizationtest1范围本标准规定了血清中和试验所用试剂、材料.操作程序及结果判定等本标准适用于SPF鸡感染以下病毒后的中和抗体的监测：禽脑脊髓炎病毒（AvianEncephalomyelitisVirus）、传染性支气管炎病毒（InfectiousBronchitisVirus）、传染性喉气管炎病毒（In-fectiousLaryngotracheitisVirus）、传染性法氏襄病病毒（InfectiousBursalDiseaseVirus）。2原理中和试验系指有生物活性的病毒与相应的抗体结合后，可失去原有的生物活性的中和反应。中和反应不仅有高度特异性.且具有严格的量的关系。因此可用中和试验鉴定病毒.也可用于相应抗体的定量检测3试剂和器材3.1试剂3.1.1蛋白际磷酸肉汤、3.1.2青霉素/链霉素(双抗)液3.1.33%碘溶液。3.1.4SPF蛋。3.2器材3.2.1蛋钻(打孔器)3.2.26针头。3.2.37*针头。3.2.4混合器3.2.5照蛋器、3.2.6常规实验设备4操作程序4.1试验准备4.1.1血清样品处理被检血清和阳性对照血清经56C30min～45min灭活，保存于－20C条件下备用4.1.2SPF蛋准备4.1.2.1共需12枚蛋4.1.2.2照蛋检查胚体活力.试验只用健康胚4.1.2.3根据

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