夏建川生物治疗及在临床肿瘤治疗中的应用

夏建川生物治疗及在临床肿瘤治疗中的应用乳腺癌（病例一）

病人，女，69岁，左乳腺癌术后患者。患者因左乳腺肿物3年于2004-7-29行左乳癌改良根治术，用环磷酰胺+阿霉素+5-氟脲嘧啶方案化疗2程，2004-10-22至2004-12-17行NK细胞回输6次,2005年4-9月行CIK细胞回输6次．每年接受8次体细胞免疫治疗。2007-11-20PET-CT示未见复发。2011-10-18PET-CT检查未见复发。目前，患者每年接受6－8次细胞免疫治疗。2021/3/102病人女50岁2009.3.17PET-CT提示左乳肿物2009.3.20左乳区段切除+左腋窝淋巴结清扫术术后病理：大小为2x1.5x1.5cm，浸润性导管癌，Ⅲ级，ER(-)，PR(-)，Her-2(-)术后分期：T1N1M0，ⅡA期2009.4.10-09.8.7行剂量密集型“AC→T”化疗各4程2009.8.31-09.10.14左乳+左锁骨上放疗2009.6-10.8细胞免疫治疗共24次，其中NK8次，D-CIK12次，CIK4次，疗程间无长时间间隔。2011.8至今病情稳定，一般情况良好。乳腺癌（病例二）

2021/3/103病人男50岁盲肠癌（Duke’sD,肝转移）200.12CEA升高，肠镜病理：腺癌Ⅱ级，PET-CT：盲肠癌并肝转移瘤采用手术和化疗、生物治疗的综合治疗方案：术前新辅助化疗3次，术后辅助化疗9次，手术化疗期间均配合C225及细胞免疫治疗，之后进行以细胞免疫治疗为主的治疗。具体过程：08.1.7-08.2.4XELOX化疗3次2008.2.22右半肝切除术+肝内一个转移瘤切除术+区域淋巴结清扫术2008.3.11肝内另一个转移瘤射频消融治疗2008.3.18-08.7.8CR+5Fu化疗1次，FOLFIRI化疗8次2008.1-09.1细胞免疫治疗22次，其中NK6次，D-CIK5次，CIK10次，D-T1次2009.1-至今病情暂稳定2021/3/104肺癌（病例一）患者男70岁住院号：151182综合科入院诊断：左上肺腺癌第一次住院行诱导化疗，后先后行gamma刀治疗及射频消融治疗，并于2005.12.6-2007.6.21共行CIK治疗：26次；DC-CIK治疗：15次。出院时一般情况好，肿瘤标志物无升高，脑无占位，肺部病灶及纵隔淋巴结均无活性,到现在无瘤生存已36个月，这个病人是综合治疗的范例。2021/3/105男，76岁，非小细胞肺癌术后2009年7月右侧胸腔出现胸水2009年8月开始链式-CIK细胞免疫治疗8月3日第一次抽血（病人50-60ml）8月10日开始第一程链式-CIK回输到12月2日，共抽血培养9次，回输27次每次回输细胞数量8.23×107~4.8×1082009年10月16日CT证实胸水明显减少，病人一般情况良好，自觉较前改善。肺癌（病例二）2021/3/106女，65岁，非小细胞肺癌2009年8月开始链式-CIK细胞免疫治疗8月3日第一次抽血（病人50-60ml）8月10日开始第一程链式-CIK细胞免疫回输（静脉/皮下）到12月2日，共抽血培养8次，回输24次每次回输细胞数量5×107~2×108目前病灶稳定，似较前略有缩小，病人一般情况良好，自觉较前改善。肺癌（病例三）2021/3/107肿瘤细胞恶性增殖免疫逃逸三、肿瘤的免疫基因治疗Immuno-genetherapyofcancer从广义上讲，根据免疫学的理论技术而建立的基因治疗方案，均属免疫基因治疗（Immunegenetherapy或Immunogenetherapy）。2021/3/108I：493项I/II:160项II:118项II/III:7项III:19项肿瘤的免疫基因治疗抗原180项细胞因子247项>500项2021/3/109美国FDA批准Provenge(sipuleucel-T)，一种治疗晚期前列腺癌的患者免疫活性细胞，这标志进入新癌症治疗：自身免疫活性细胞治疗。（2010.4.29）

PROVENGE由自身外周血单核细胞组成，包括在确定的培养期间用一种重组人蛋白，PAP-GM-CSF已被活化的抗原提呈细胞(APCs)；前列腺酸性磷酸酶(PAP)，在前列腺癌组织中高表达的一种抗原，连接至免疫细胞激活剂粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF组成)。刺激自体的T淋巴细胞。将这些经体外刺激的细胞回输给前列腺癌患者，从而达到治疗前列腺癌患者的目的。Sipuleucel-T成为FDA历史上第一个批准上市的肿瘤疫苗。

2021/3/1010前列腺癌是一个比较理想的生物治疗模型发病率高病情进展缓慢肿瘤相关抗原表达化疗疗效有限“非必需”组织前列腺癌细胞免疫治疗获得成功的原因PSA、PAP等内分泌治疗无效的患者，此时肿瘤负荷较小，机体具有一定的抗肿瘤能力NatRevImmunol.2010,10:580-593.2021/3/1011肿瘤侵润性T细胞受体免疫基因治疗免疫基因治疗在的肿瘤临床中的应用

2021/3/1012Science.2006Oct6;314(5796):126-9.Epub2006Aug312021/3/1013经基因修饰的自体DC细胞激活的T淋巴

细胞的制备T淋巴细胞成熟DC细胞DC细胞刺激的自体T淋巴细胞（DC-T）肿瘤抗原PBMNC（80-100ml）共培养TNFα,IL-4GM-CSFIL-2负载肿瘤抗原的AAV感染2021/3/1014负载CEA抗原的DC刺激的T淋巴细胞的表型2021/3/1015一些抗原与肿瘤的发生发展密切相关Viralantigens:Primaryhepaticcarcinoma:HepatitisBvirus,HepatitisCvirusCervicalcancer:Humanpapillomavirus:E6,E7.2.Self-antigens:Lungcancer:k19,Her-2/neu,etc.Primaryhepaticcarcinoma:α-FP.Breastcancer:Her-2/neu,BA46,etc.Prostatecancer:PSA,PSMA2021/3/1016自体DC-T淋巴细胞在恶性肿瘤

治疗中的策略肿瘤患者外周血（80-100ml）体外诱导DC-T淋巴细胞回输DC-T淋巴细胞给术后的患者（一个月2次）特异性杀伤肿瘤细胞抑制肿瘤的复发和转移2021/3/10172021/3/10182021/3/1019前列腺癌

患者，男，年龄：68岁2007年4月，常规体检时，发现PSA显著升高，100ng/L穿刺活检提示：前列腺癌，Gleason评分：10分。胸部CT:未见异常。行内分泌治疗：诺雷德Zoladex（goserelin）+康士得/Casodex（Bicalutamide）。PSA迅速下降，9个月后降至0.2以下，继续维持9个月后，选择了间断治疗（停用这两种药物），PSA迅速上升，6个月后升至16，继续内分泌治疗，PSA迅速降至0.16，以后就逐步上升，倍增时间14~16周。自2010年9月开始出现全身骨痛，以左髋部明显，胸腹部CT：椎体及髂骨广泛转移灶，全身骨扫描：中轴骨广泛转移。左髋臼及多处肋骨转移。2011.2-13:PSA:1376ng/ml，2011.3-28开始进行生物治疗，回输两次DC－T，2011.4.25PSA:737ng/ml，2011.5.25回输四次DC－T（负载PSA抗原的DC刺激的自体T淋巴细胞）,一星期后检测PSA561ng/ml。现在患者感觉精神改善，无明显副反应。生活能够完全自理，能够自由下床活动，左髋部不适改善，疼痛不明显，无需止痛药物。饮食可，精神可。2021/3/1020DC－T细胞免疫治疗用负载前列腺癌细胞高表达抗原PSA和PSMA负载自体DC刺激的自体T淋巴细胞对前列腺癌患者治疗后，外周血中PSA水平明显下降PSA:1376ng/mlPSA561ng/ml2021/3/1021根据不同肿瘤的生物学特性(肿瘤类型、分期和肿瘤的免疫源性)、患者的遗传背景（是否具有家族倾向？）、目前的病情状况(体质，免疫状况)、前期治疗方法、年龄等，在传统肿瘤治疗模式的基础上，制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案。

三、如何制定出适合病人的个体化体细胞免疫治疗方案。

2021/3/1022肿瘤体细胞免疫治疗与常规治疗有机结合的治疗策略恶性肿瘤手术治疗放化疗敏感（常规放化疗）疾病稳定期专科治疗不能手术（Ⅲ期，Ⅳ期）复发者可手术放化疗不敏感细胞免疫治疗化疗敏感化疗后细胞免疫治疗联合专科治疗（靶向治疗）细胞免疫治疗联合内分泌或靶向治疗细胞免疫治疗（微创介入）（卵巢癌，乳腺癌，小细胞肺癌等）放化疗间隙联合细胞免疫治疗（肾癌，前列腺癌，黑色素瘤等）（乳腺癌，卵巢癌，神经母细胞瘤，小细胞肺癌等）化疗不敏感（原发性肝癌，肾癌，前列腺癌等）疾病稳定期2021/3/1023（一）针对老年肿瘤晚期患者，体质弱、免疫功能极度低下采取抽少量血多次回输的治疗方案抽血30ml第1天先抽血30ml进行下个疗程治疗；同时进行第3次CIK回输第1次CIK回输第2次CIK回输第4天第8天第12天第14天第16天开始下一个疗程的治疗2021/3/1024(二）细胞免疫治疗与化疗有机结合化疗前1天抽血，免疫细胞分离培养第一周第二周7天开始化疗第2次开始化疗回输CIK、NK、D-CIK等细胞化疗前1天抽血，免疫细胞分离培养2021/3/1025（三）体细胞免疫治疗联合放疗的增效方案放疗前抽静脉血50ml，上午放疗放疗放疗上午放疗后，下午回输免疫细胞第2天周二第3天周三第1天周一第4天周四第6天周六第7天周日第5天，周五下午回输培养的CIK、NK、D-CIK等细胞休息休息2021/3/1026（四）抗肿瘤效应细胞交替使用方案第一周NK第二周D-CIK第三周NK第四周D-CIK抽血30ml回输第三周NK抽血50ml抽血30ml，回输第一周NK抽血50ml，回书第二周D-CIK第五周第六周回输第四周D-CIK2021/3/1027（五）体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子，抗肿瘤抗体，生物分子靶向药物增强疗效的方案ThresholdfortumorregressionImmunestimulation/inflammationSpontaneousreleaseofimmunemodulatorsbytumorcellsSpontaneousregression/responsetotherapyTumorprogressionAntigen-specificImmunization，生物靶向药物（抗肿瘤抗体和小分子化合物）Non-specificimmunestimulationNKcells，CIKcells，D-CIK,IL-2.IFN-γα2021/3/1028采用的治疗方案ThresholdfortumorregressionImmunestimulation/inflammationSpontaneousreleaseofimmunemodulatorsbytumorcellsSpontaneousregression/responsetotherapyTumorprogressionAntigen-specificImmunization，生物靶向药物（C225,Iressa）Non-specificimmunestimulationNKcells，CIKcellsIL-2.IFN-γα2021/3/1029恶性肿瘤发生转移的示意图2021/3/1030Inductionofanti-tumorimmunizationinhumanwithDCVaccination2021/3/1031体细胞治疗在临床肿瘤治疗中的作用1、恶性肿瘤综合治疗的一部分,常规治疗后的巩固治疗；2、一些免疫原性较强的恶性肿瘤（如肾癌，恶性黑色素瘤，恶性神经胶质瘤）或对化疗和放疗不敏感肿瘤（原发性肝癌）在手术或介入微创治疗，使肿瘤负荷降低后可直接进行细胞免疫治疗。3、通常在进行体细胞免疫治疗前，要降低肿瘤负荷。4、体细胞免疫治疗联合抗肿瘤的细胞因子，抗肿瘤抗体，生物靶向药物能取得更好的疗效；因此，肿瘤患者在综合治疗原则下辅以个体化的细胞免疫治疗，能取得更好的预后。

2021/3/1032ChesterSoutham:在五十年代首次给志愿者注射活的癌细胞结果:注射的癌细胞在健康人体内不生长.注射的癌细胞在癌症病人体内可长成大肿瘤。结论：癌症病人体内失去健康人所具有广谱抗癌活性。研究项目受到伦理学及法律的极大挑战。研究结果为抗癌界带来极大提示，1968年被推选成全美抗癌学会主席。Science，1957年一月125:158-160首次证明人体内天然抗癌活性的存在五、人体免疫与肿瘤的发生

2021/3/1033非粒细胞单核细胞粒细胞血浆红细胞人体白细胞分离离心人体粒细胞抗肿瘤的研究2021/3/1034中性粒细胞嗜碱性粒细胞嗜酸性粒细胞淋巴细胞单核细胞/巨噬细胞人体内白细胞分类粒细胞非粒细胞2021/3/1035接触病原自然免疫:自然杀伤细胞巨噬细胞中性粒细胞补体(需要几小时或几天)获得免疫：B淋巴细胞(抗体)T淋巴细胞(需要几星期)免疫系统的两大分支2021/3/103612.525.037.550.075.062.587.5100.00正常小鼠五十岁以上的癌症病人抗癌小鼠五十岁以上的正常人年青人人体T淋巴细胞的体外杀癌活性(明标实验法）对人宫颈癌细胞(Hela)杀伤率（%）2021/3/1037020406080100天然抗癌活性在不同人群中不同分布（双盲试验法）癌细胞杀伤活性（%）健康人小于50岁健康人大于50岁癌症病人大于50岁健康狗2021/3/10382021/3/10392021/3/10402021/3/1041人体抗癌活性稳定性及相关因素的影响10080604