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动物细胞培养上课课件生活联系:
烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植,但对于大面积烧伤病人来讲,健康皮肤很有限,请同学们想一想如何来治疗该病人?自主阅读P44第5段,思考下列问题:1、什么叫动物细胞培养(animalcellculture)?2、动物细胞培养的原理是什么?一、动物细胞培养1、概念:从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。原理:细胞增殖如何进行动物细胞培养?
结合问题,阅读书本,三人一组,讨论写出动物细胞培养的流程图。每组推选一位“小老师”,准备上台讲解(5min)学习活动一:注意关键词:
细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养合作学习(结合问题思考流程)1、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞呢?
2、如何将动物组织分散成单个的细胞?3、胰蛋白酶的作用是什么?由此可说明细胞间的物质主要是什么成分?4、培养瓶或培养皿的内表面为何要光滑、无毒?5、培养瓶中的细胞培养到什么时候就不再分裂、增殖?细胞贴壁接触抑制
(contactinhibition)原代培养:通常将直接从动物体内取出的动物组织消化后的初次培养称为原代培养。传代培养:原代培养的细胞出现接触抑制后,贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理,然后分瓶继续培养,让细胞增殖。这样即为传代培养。有关概念:
细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。
细胞系:细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的改变,使其在培养条件下可以无限制传代,这种传代细胞为细胞系。
细胞株和细胞系的区别:细胞系的遗传物质改变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,容易传代培养。有关概念:动物胚胎或幼龄动物的组织、器官细胞悬浮液10代细胞50代细胞传代培养无限传代单个细胞加培养液原代培养胰蛋白酶剪碎过程:细胞株细胞系动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤维等蛋白质,将细胞网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织和器官。遗传物质未改变遗传物质已改变去掉组织间蛋白细胞增殖1、选用组织时,一般用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做培养材料,而不用老龄动物的,这是为什么?因为幼龄组织或器官上的细胞增殖能力强,有丝分裂旺盛,容易培养。老龄动物的细胞则相反。学习活动二:寻根问底,加深巩固2、胰蛋白酶处理组织时要注意什么问题?能够用胃蛋白酶代替吗?
控制好消化时间,太长会消化细胞膜上的蛋白质不能,因为两者的最适PH不同,而正常组织细胞的生存环境与胰蛋白酶的最适PH较接近.学习活动二:寻根问底,加深巩固3、动物细胞培养能否最终培养成新个体?不能,动物细胞培养只能使细胞数目增多,不能发育成新的动物个体学习活动二:寻根问底,加深巩固多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中,根据你所学的知识,认为体外培养动物细胞应该模拟内环境的哪些条件呢?学习活动三:无菌、无毒全部的营养物质适宜的温度和PH值必要的气体条件3、动物细胞培养的条件动物细胞培养条件:1、无菌、无毒的环境(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)2、营养(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)3、温度和PH36.5+(-)0.5度,7.2-7.44、气体环境:
O2和CO2(95%空气和5%CO2
)补充合成培养基中缺乏的物质,保证细胞顺利的生长增殖①生物制品的生产②用于基因工程③用于检测有毒物质④细胞的生理、病理、药理研究4、动物细胞培养技术的应用获得细胞细胞的全能性植物体培养结果或细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的葡萄糖、动物血清蔗糖、植物激素培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细胞培养的比较细胞群体1.动物细胞工程常用的技术手段中,最基础的是
A.动物细胞培养B.动物细胞融合
C.单克隆抗体D.胚胎核移植
练一练~~~2.贴壁细胞的分裂方式具体是
A.无丝分裂B.有丝分裂
C.减数分裂D.增殖3.关于动物细胞培养的叙述,不正确的是
A.动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来
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