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文档简介

中国科学院研究生院2007年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题科目名称:生物化学与分子生物学考生须知:1.本试卷满分为150分,全部考试时间总计180分钟。2.所有答案必须写在答题纸上,写在试题纸上或草稿纸上一律无效。一、名词解释(每题4分,共20分)重组修复转座子C4途径正前馈作用和正反馈作用RNA剪接和可变剪接二、单项选择题(每题1分,共20分,请在答题纸上标清题号,并将答案写在题号后)下列各项中,不属于细胞代谢的中间产物的是:A.葡萄糖-6-磷酸B.丙酮酸C.胆固醇D.乙酰辅酶A在真核生物细胞周期的四个时相中,用于准备DNA合成的是:A.M期B.G1期C.S期D.G2期下列各项中,不属于真核生物基因表达转录前水平调节的过程是:A.RNA编辑B.染色质丢失C.染色体DNA的修饰和异染色质化D.基因重排下列各项中,尚未获得诺贝尔奖的是:A.DNA双螺旋模型B.PCR仪的发明C.RNA干扰技术D.抑癌基因的发现下列事件中,不属于表观遗传调控的是:A.DNA甲基化B.组蛋白乙酰化C.mRNA加尾D.RNA干扰大肠杆菌中,参与转录终止调控的是:A.TATAboxB.p因子C.snoRNAD.RNaseP正转录调控系统中,调节基因的产物被称为:A.阻遏蛋白B.诱导因子C.激活蛋白D.增强子既可利用上游启动子,又可利用下游启动子的RNA聚合酶是:A.RNA聚合酶IB.RNA聚合酶IIC.RNA聚合酶IIID.RNA聚合酶IV用来研究蛋白质-蛋白质间相互作用的实验技术是:A.酵母双杂交技术B.原位杂交技术C.RACE技术D.SAGE技术能够引起细胞内蛋白降解的反应是:A.泛素化B.去泛素化C.磷酸化D.去磷酸化11.双缩脲发应用来测定:A.肽B.糖C.RNAD.DNA抗霉素A对呼吸链(电子传递链)抑制的作用点在:A.NADH脱氢酶附近B.琥珀酸脱氢酶C.细胞色素氧化酶D.细胞色素b附近氨基酸在掺入肽链前必须活化,氨基酸的活化部位是:A.内质网的核糖体B.可溶的细胞质C.高尔基体D.线粒体T4DNA连接酶催化的连接反应需要能量,其能量来源是:A.ATPB.NADC.GTPD.乙酰CoA组蛋白的修饰可引起核小体的解离,这种修饰是:A.糖基化B.腺苷化C.磷酸化D.乙酰化磷酸化酶激酶活性的发挥依赖于:A.镁离子B.钙离子C.氯离子D.锌离子17.胰岛素的功能单位是:A.单体8.二体C.四体D.六体.DNA合成仪合成DNA片段时用的原料是:A.4种dNTPB.4种NTPC.4种dNDPD.4种脱氧核苷的衍生物.蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化,它是:A.丝氨酸残基B.组氨酸残基C.酪氨酸残基D.门冬氨酸残基.端粒酶是一种蛋白质一RNA复合物,其中RNA起:A.催化作用B.延伸作用C.模板作用D.引物作用三、判断题(每题1分,共30分,请在答题纸上标清题号,并将答案写在题号后,其中表述正确的写“对”,表述错误的写“错”)糖酵解作用是葡萄糖在无氧条件下转变为丙酮酸所经历的一系列反应,在此过程中净生成两个ATP分子。在C3植物中CO固定是由核酮糖一1,5—二磷酸羧化酶催化的,反应在叶绿体的基质中进行。2乙酰辅酶A是脂肪酸分子所有碳原子的唯一来源。它来自于糖的氧化分解或氨基酸的分解。这些过程是在线粒体内进行的,脂肪酸合成的酶也存在于线粒体内。从胆固醇向胆酸的转化是胆固醇降解最重要的机制,对这个过程的调控是由线粒体的7a—羟化酶来执行的。大肠杆菌RNA聚合酶全酶由4个亚基(a2郎’)组成。在原核细胞中,起始密码子AUG可以在mRNA上的任何位置,但一个mRNA上只有一个起始位点。蛋白质生物合成过程中,tRNA在阅读密码时起重要作用,他们的反密码子用来识别mRNA上的密码子。单糖都含有手性碳原子,因而都具有旋光性。青霉素通过抑制转肽干扰新的细胞壁形成而起抑菌作用。脂蛋白是由脂质和蛋白质以共价键结合而成的复合体。所有信号肽的位置都在新生肽的N端。蛋白质主链的折叠形成由疏水作用维系的重复性结构称为二级结构。错配修复和重组修复因为发生在DNA复制之后,因此称为复制后修复。免疫球蛋白基因在淋巴细胞发育过程发生两次特异位点重排,首先是轻链基因发生V-J重排,然后是重链基因发生V-D-J重排。RNA聚合酶催化的反应无需引物,也无校对功能。细胞周期的时间控制是由蛋白激酶系统对细胞外信号做出反应,改变其活性而实现的外显子的序列多保守,而内含子的序列变化较大。核糖体的主要作用是参与蛋白质的修饰。表观遗传效应是不可遗传的。选择性剪切是真核生物特有的现象。当多个密码子编码同一个氨基酸时,这些密码子可以在第二位或第三位碱基上不同。一般认为,RNA聚合酶并不直接识别启动子区的碱基对本身,而是通过氢键互补的方式加以识别。大肠杆菌在多种碳源同时存在的条件下,优先利用乳糖。微小RNA(microRNA)是通过引起DNA甲基化来调节基因表达的。癌基因可分为病毒癌基因和细胞转化癌基因两大类。鸟枪法是一种检测单核苷酸多态性(SNP)的常用方法。乙肝病毒的基因组是一个有部分单链区的环状双链DNA分子,两条单链长度不一样泛素不属于热休克蛋白。DNA甲基化永久关闭了某些基因的活性,这些基因在去甲基化后,仍不能表达。对靶蛋白的磷酸化是细胞内最重要、最普遍的酶活性调节方式。四、简答题(每题5分,共30分)什么是反义RNA?真核生物中反义RNA调节基因表达的机理是什么?简述原核生物与真核生物mRNA的主要差别。设计PCR引物的主要原则是什么?以雌二醇为例,简述类固醇激素发挥作用的主要机制。核酸的紫外吸收有何特点?实验中如何利用这一特点研究核酸?线粒体在真核生物的电子传递和氧化磷酸化中的作用是什么?五、问答题(每题10分,共50分)真核生物蛋白质的翻译后加工有哪些?酶的分离纯化主要过程及注意事项是什么?大肠杆菌乳糖操纵子的主要结构和阻遏蛋白的作用机制是什么?请列举出5种真核生物中存在的RNA并概括它们的功能。假设你需要将一段cDNA克隆到表达载体中并转化到大肠杆菌中。cDNA的两端和载体上均有BamHI的酶切位点,你需要用BamHI切割cDNA和载体然后将它们连接在一起。下面是实验方法要求的具体步骤:a.用BamHI处理载体DNA,然后用碱性磷酸酶去除5′端的磷酸基;b.b.用BamHI处理cDNA,然后与步骤a中得到的载体DNA混合,加入DNA聚合酶,在适当的条件下使cDNA与载体连接;c.将步骤b的产物转入大肠杆菌感受态细胞中,培养后均匀涂在含有抗生素的琼脂培养皿上。因为表达载体中含有抗性基因,能表达抵制抗生素的酶,所以只有含有载体的大肠杆菌才可以在含有抗生素的培养皿上生长,而未被转化的细菌则因受到抗生素的抑制而死掉。你还参照实验手册做了下面四组对照:对照一、在含有抗生素的培养皿上面涂布未被转化的(即不含有载体的)大肠杆菌感受态细胞(cellsalone)。对照二、用未被酶切的载体直接转化大肠杆菌感受态细胞,将产物涂布在含有抗生素的培养皿上面(vectoralone)。对照三、用BamHI酶切载体DNA后,不用碱性磷酸酶处理,不需要cDNA,直接加入DNA聚合酶,然后转化、涂板(Omitphosphatase,omitcDNA)。对照四、除使用碱性磷酸酶外,其它与对照三相同(OmitcDNA)。你一共做了三次实验,在第一次中所有的平板中都长出很多细菌。在第二次实验中所有的平板中都没有长细菌。在第三次实验中你得到了较好的结果,转化成功,具体克隆数见下表:请回答下列问题:

A.B.A.B.C.解释第二次实验失败的原因,并说明对照二的目的是什么;对照三和对照四的目的是什么?为什么实验手册上建议用碱性磷酸酶处理载体?中国科学院研究生院2007年招收攻读硕士学拉研究生入学捶一考试试电参考答案和评分标推科目名称:生物化学与分子生物学说明‘名词斛弹、愉答网和何富明部分的评分标准见各建管霆中括号中的分值.一.名词解释I年也dih共"处ii.童蛆梭设।遗然幅1att能报的子代。曲升孑可遇过遗杪.组而加以弗外卜即认同樨加*的母陵上希相应棒音椎序列在至干堤长口处.版后用用含成的序列科卜上魄的空机此过程称为蒯赳E3也因加雌在苴制之后又前:小豆桐后修复n分j,*算座再转座子无一种可以由柒色体的一牛ti贵转林到另外位置的遗愧因子.也就是一期m发生转座的洲n扪,1C4选触I£4地性电作为CK曲收集,曲抻和抻运的兼斑,期期以*合■岐丰宫的叶片表面转运郢内那的现崎这见匿潮!较面与皿意争因此C4蜃柱是优任EM如战威寓开的用周团6以逆知懈小邢阳世生的一片方式“分:心后儿M则和正曲作的做黜钟附H器黑………皿加落丁.抵中产生眦*坤的眄的跟^肌雌硕好用”如瓦ftNA0接和用空剪接剪接是指从面州海体中生除内含于的过程口分】.可变蓟技是指使用不同的剪捱便点,从同一面R附前体中指到不同妁楮本的过程【2分】,加M选择倒(耳鹿1分,共M分)■号答案1拊2对3tt4恬5的«错7对S替9对10911情以情113错14«15三・贡斯・・・1分,共30初B#««K对17对1»19it£■对21恰“对13e14情15时26特17对Uto19的3D对四、面答题(ft/百分,其"分)),什也是反义RNA?戈楂生物中反文RNAQ节茶因赛达的机电是什包'脩阮女SNA是指与目标MM具前互扑蟀列的限A分子12舟工3Mtt■11序列互补身临定的同A蚌合,从而抻制丽的两璋口分*2+府处廉搪生物与总植生物的A的生暮差别.料既植生谢谢A的特SEr【25分?P-国人的半衰潮烟,明译在持京未克生培来时即开始进行.没有内含b,忤多衡值生物毗监以分嗣友子的稔式存在.一个向工由可馆科事十册白质*l陈模生物15KM的T熠无枸子结构,3,均没杳或R有驰舸的po”(J9罐也式植生物画A的特衽1【工m分】B,至含有内含子,转电后的或防前体防加工制成热的邮人后才性械翻译*h有些曲体mRHAJVtr选择性剪忸现颦,起遇常不存在多暇度于*c.5,搀存在用子转构r维大学4tli有giya>隹巴”瓦祖计PC决引物的主K原则比什也?答:(1)曳物也度庾大于18个根甘酸,一胜为30—24中核音嚷131(2)引物与器序列同地加但不座过低(一段不低于砧*◎:1LitL(3)弓I%不施有姓央站将1即电能书册p以上的回文即到⑷南引物何不的大于面以上的互补刖成同班到*左置所财任何互业的餐基工JLitL(5)引物中W的分布尽可能均匀,GF含■物&丽•臭肛<:叫印二胃为。!■怖。理raut挥柞用的主案机蔺.**与星盾中的年般第史体培合,盘M-受体艮合物由胡胞质转移则却附檀内卫史,地种直合物本身是一种作录的博普勒,当他们站备到DNA特定部位后,引起大黄地生成专一性的mHNA,导显合成出火.的特异蛋白质,从而调节代诩或生理功叔皿J・5.檀|»的装外胜也有何特点?实物中加何利用这・特点砒我抹成7等士林眼的碳塞具有共锄II健,囱而有架外嗫收的性质.各肿HE基.演昔和植膏酸的吸收北调幅有区剧_LULT&ift的紫外吸收峰在2帅画1附近工田.可用于泅定找BfiJJJtL根据260nm与需Onm的瞋光度(A)可判断枚般拥度[[分1天精的DNA的工CP)6600.RNAA7700-7800.我生受性降解时F(P)0处升高.以此可以瞿别核酸删剂的质■■且虹立然粒体在其原生物的电子传递和纨化砌庖化中的推用是什必?答,其核生物的电子梅遨和就他用硬犯都是在他肥的蛾粒体内81我生的传ffi.现cue鼓触体内展的动能概括热3个方面,0)西明通以及阳防鹿氧化为COj.同时使NAD*和FAD逐版为NADH和FAD,这是发生在拔粒体基质盥面向基痍的内时曲白上门P)由于乱KADH和F*阳竹至觇粒体内廉上,同时摩.原用于泵口15升】.⑶将贮存于电化学质子撵立的推■由内界上的F用机.便合体合思皿13先】•五、忖挣HWMio其树分)1*真植生物酱白JW的加祥后加工有.爬了韵⑴值号肚的例热无趣康核生物迅显并雌物.啦白质除谢离于典蒙膘挥怪用外,还有_丽分娶分泌到期胞外利定位于用都蜕中国懵用.邙一需更近希的冬肽而荆i一段飙些帷中列利为值号战序如弓再砒至林1的转建聚虬到达目的地后,疳号世存被切除.12地L⑵二桶城利用成I在niRMl先于中,出膏断辄酸的密碣子,而不少直白用分子中含有胱蛆酹二雁键,有的龙可彦个,U二破做愚孤白围的功能基困.-84(1龙通过两小半就乱横的强基制化野威的.有的在切除立四前脾已经形觇.正打臼j使线感步胜至现一定的空间站拘二肽他的排费在肚理合成没疔结来时磔已经开始*核浦带可保m加至皿牛蛆紧1«班基住的肚能,固段迷从横睛悻中鼻排后「便开蛤折叠・三期结构的形成几乎加曲硅合成的生止何时完成.俄白局的折费是从a的开始的.12分】《打唠基化作用使多at变成脑击臼.将强白中的糖普建有两类;一类是心傅上卡冬彼植侧跳上的n原子与寡聚糖辕之间构成的K-糖昔博.另一类是驻雄上民氨酸,苏盖醒例族上的氧原子与嘉索培植之间构也的口一0昔健.通常在中策白上发现的嘉索糖根是五黑糖*惠聚助根胞通进捏能懵的单成醉被带到强白质上的.高尔基体能对糖蛋白选行进一曲的把怖和调整・31£5)非乐就I男基B!界帮的小怖I丝低醒、苏瓶睡屋基的碑踪化】»»■'咎乩酸尊的邛基化:谷氯届和天冬斌睢的教基化•工1±J-末场西后耳核生物多及的^^修郡JftfPflSlMt遢常N末幡的需T甲Bt甲确氮或或甲限依黑以及更多的N米喇飙费般蓄艮拔除去.我栈生物学就的N末用她蓊还要提一小打WHt-独蕃港的再修饰也时有食生.上!肛(7)H伸gtth有当省白质生物含成忖是取前体蛋白或多能白用式出需的.豌越馁白BWfi切It环为我力的话性分子*_LL殳L驾■的分喜嶂化主襄过密或注意*般触ffaT爸集是■书"僮化功他的杳自修鼠卷骗悚・.首先金期丁*11井却是叠自履类坯是喇类餐・芬处提地过程打下,U)酝白加类施的好H纯佗L7分金浦的樨纯需ti精商方面的工推I一是把修制剂从根火体枳试箍到作较小的体例,二是把睥制剂中大见的杂施潴白和其它大分子物质分离巾去.为了判斯分寓提把方注的优劣,一舰用国小押标索荷・,一是总通力的回收;二扭比活力提高的得救.分高峙化过程如下]必选择荫备■率富的新M生我料料・h.咬好.c.抽槌r在此滥下.跟水或低盘迎冲派,从班次为桨甲轴摄BL刑到阻摄现,d,外惠及地化.酶是生物活tt物质,在分离境化时劭须注意屎就就少11语性也莪,检作条栉要泡和,乐加像作一般在山51c间设行•用一系列分离蛋白质的方法,如tk析.葬电点玩淀•有机用剂分生・法扑性曲变性蟀方法从*相H裱中初步分离脚.怫后再果用喂酊足折、曷子交挽庭折.觥服过渡、亲和的折、琉水星析”高效液机但造坪层析技常政普情制却电冰技术逋一步翎化**以得到鲤的修朋品*e-结(即极晦的分寓和纯化1门分】梗施是取HIHM能帕丽因此如出顺过用翦的两力福⑴我造保册界不帔降解,攫柞葡在无曲&唧附系陵中进行,tn为海证集括力::在,掾作善仲JMfi和r全都榻作一舰在第5c间进行,基*步。包搭上施狎■串■的新群生物材料.#«'抽提及分离和饨化等.士大导杆曲儿糖操姒子的主要姑梅和阻遇近白的作用机制是什么?答.大H轩菌JLH操纵子上依次排列着启动子.攥纵基因加三个结构基因.结构基因1H也设码分解孔倦的B一半几精昔IB.HlcY编码吸收显朝的|!-半见韬甘透性荫.kcA编码。一半乳褊七乙酸转移酹.乳储除纵子的探圾线闪lacO不偏码任何蛋白质,它是另一位点上调节基因Inci所编码的阻遏督白的诘合阅曲・15分】眼、墨白是一种变构强白,当细胞中有歌糖成其他诱导物的情况下,阻遏蛋直便与它们相结合,使阳遏蛋白的构部发生改变而不能结合到1"。上,于是拈录便得以进行,从而他及收和分解?Ufi的唧披诱导产生,如果细胞中没有免糖或其他诱导物,眼遇皈白就结合到1皿。上,从而阻止结合在启动子上的RNA聚合睥向赭移动.使转最不能进行.gjn乩普工A.对照一中肥耒丝转化的大曲杆场感受态知世,应该不含有抗性.不能在含有抗生素的培养皿上生长,但现在时照一在含TT抗生雄的咯莽皿氏出苗

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