链霉素的分析

链霉素的分析第一节结构与性质第二节鉴别试验第三节特殊杂质检查第四节含量测定主要内容

碱性环己多元醇第一节结构与性质1.氨基糖苷类抗生素结构：链霉素（streptomycin）链霉胍链霉糖N-甲基葡萄糖胺（氨基糖）链霉双糖胺2.性质（1）溶解性与碱性溶解性

-OH水溶性碱性

-NH2可与酸成盐临床上多用硫酸盐（2）旋光性

各种链霉素盐的分子，均含有许多手性碳原子，故都具有旋光性。一定范围内链霉素的比旋度与链霉素浓度的关系可绘制曲线，利用这种关系就能直接迅速测得链霉素的浓度。（3）稳定性链霉素pH5~7.5稳定OH-N-甲基葡萄糖胺链霉糖OH-麦芽酚反应坂口反应反应（4）UV链霉素λmax=230nm第二节鉴别试验坂口反应麦芽酚反应N-甲基葡萄糖胺反应（一）N-甲基葡萄糖胺反应对二甲氨基苯甲醛H+樱桃红色（Elson-Morgan反应）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物水解水解产物N-甲基葡萄糖胺特有反应：对二甲氨基苯甲醛H+OH-(缩合)乙酰丙酮（二）麦芽酚反应链霉糖特征反应△H+紫红色（Maltol反应）麦芽酚反应H+

Fe3+分子重排麦芽酚例硫酸链霉素Ch.P（2010）【鉴别】（2）取本品约20mg，加水5ml溶解后，加氢氧化钠试液0.3ml，置水浴上加热5分钟,加硫酸铁铵溶液（取硫酸铁铵0.1g，加0.5mol/L硫酸溶液5ml使溶解）0.5ml，即显紫红色。（三）坂口反应链霉胍特征反应水解（Sakaguchi反应）橙红色次溴酸钠8-羟基喹啉（或α-萘酚）坂口反应+OH-例硫酸链霉素Ch.P（2010）【鉴别】（1）取本品约0.5mg，加水4ml溶解后，加氢氧化钠试液2.5ml与0.1%8-羟基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至约15℃，加次溴酸钠试液3滴,即显橙红色。（四）光谱法IR法例【鉴别】红外光吸收图谱Ch.P（2010）

硫酸链霉素（光谱集491图）

第三节特殊杂质检查有关物质（甘露糖链霉素等）的检查2.方法HPLC1.来源发酵时菌种产生例硫酸链霉素Ch.P（2010）【检查】有关物质

色谱条件与系统适用性试验：

用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.15mol/L的三氟醋酸溶液为流动相，流速为每分钟0.5ml，用蒸发光散射检测器检测（漂移管温度：110℃，载气流速：2.8L/min），取链霉素对照品适量，用水溶解并稀释制成每1ml中约含链霉素3.5mg的溶液，置日光灯（3000Lx）下照射24小时，作为分离度试验用溶液。取妥布霉素对照品适量，用分离度试验用溶液溶解并稀释制成每1ml中约含妥布霉素0.06mg的溶液，量取10µl注入液相色谱仪，记录色谱图。链霉素峰保留时间约为10～12分钟，链霉素峰（相对保留时间为1.0）与相对保留时间为0.9处的杂质峰的分离度和链霉素峰与妥布霉素峰的分离度分别应不小于1.2和1.5。连续进样5次，链霉素峰面积的相对标准偏差应不大于2.0%。

取本品适量，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含链霉素3.5mg的溶液，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液适量，加水稀释制成每1ml中约含链霉素35µg、70μg和140μg的溶液，作为对照溶液（1）、（2）、（3）。照含量测定项下的色谱条件，量取对照溶液（2）10µl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的10%～20%，精密量取对照溶液（1）、（2）、（3）各10µl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。以对照溶液浓度的对数值与相应峰面积的对数值计算回归方程，相关系数（r）应不小于0.99。另取供试品溶液，同法测定，记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍，用回归方程计算，最大单一杂质不得过2.0%，杂质总量不得过5.0%。单一杂质限量=C单一杂质浓度/C主成分浓度×100%≦2.0%杂质总量=C杂质总浓度/C主成分浓度×100%≦5.0%微生物检定法第四节含量测定微生物检定法例硫酸链霉素Ch.P（2010）

【含量测定】精密称