直接作用机制-6.分子修饰dna甲基化检测_第1页
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文档简介

DNA甲基化检测(重亚硫酸盐法DNA(DNMTs)CpG55’-甲基态,但需要大量的克隆,过程较为繁琐,适用于少量的检测,不建议大规模分析。判断有重要意义。解螺旋http:/ 实验材主要试(pH>7.5主要仪(1)组DNA抽重亚硫酸盐转提前准备 soltion:900μL100220μL。2(bisulfiteconversionreagentdiluent加入120μLDNA转化试剂,涡旋混匀;脱盐/去磷酸化将DNA纯化柱放入2mL收集管中,并加入样品;向膜加入200μL新鲜配制的脱盐溶液;重复步骤7;1min,再次加入25μLelutionbuffer,12000rpm1min;PCR灰度扫描法与灰度扫描法相似,法通对第二轮巢式PCR产物,分析CpG岛内部CG甲基化程度。其引物位置位于CpG岛边缘,产物包含尽可能多的CpG。凝胶电泳分离回收PCR产物后,上。根据结果,分析统计甲基化位点比例。解螺旋http:/ PCRHSEX-Taq 10x Primer Primer Upto 30 MengJ,WangL,WangJ,etal.METHIONINEADENOSYLTRANSFERASE4MediatesDNAandHistoneMethylation.PlantPhysiol2018;177(2):652-70.LiuS,LiuF,HuangW,etal.MAGE-A11isactivatedthroughTFCP2/ZEB1bindingsitesde-methylationaswellashistonemodificationandfacilitatesESCCtumor

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