刺五加中花青素提取工艺研究

{生产工艺技术}刺五加中花青素提取工艺研究摘要原花青素，增加刺五加的附加价值。为：溶剂乙醇浓度为55%，刺五加籽和乙醇的料液比为1:50，超声时间为25min480W0.792%6060℃时，其稳定性较差。所以原花青素应在低温避光的条件下储存、加工。对于常见金属离子，Cu2+对原K+Ca2+Mg2+在原花青素提取、精制和加工过程中应尽量避免Cu2+的使用。关键词：刺五加；原花青素；超声波；提取；稳定性AbstractAcanthopanaxisatypicalmedicinalplantinthenortheastofChina,withahighnutritionalexperimentextractedproanthocyanidinsfromAcanthopanaxseedstoimprovetheAcanthopanaxvalue.UltrasonicwaveassistedextractionfromAcanthopanaxseedsandtheinfluenceoflight,temperatureandmonmetallicionwerestudiedinthistheextractionratioasindex，theoptimalextractionconditionsweredeterminedbythesinglefactorandorthogonalexperiment.Intheultrasonicextractionexperiments,theresultsshowedthatthereactionconditionswereconcentrationofalcohol55%,solid-liquidratio1:35,ultrasonictime25min,ultrasonicpower480W,andextractionratioofproanthocyanidinswas0.792%.Proanthocyanidinsweresensitivetoitsstabilitywasbadwhenthetemperatureisover60℃.SoproanthocyanidinsshuoldbestoredundertheconditionoflowtemperatureandhadgoodstabilityforK+,Ca2+,Mg2+,andbadforCu2+.SoitshouldavoidusingCu2+intheprocessofextractingandrefiningproanthocyanidins.KeyWords:Acanthopanax;proanthocyanidins;ultrasonic;extraction;stability目录摘要IAbstractII第一章文献综述11.1刺五加研究进展11.1.1刺五加概述11.1.2刺五加的主要营养物质11.1.3刺五加药理作用21.2原花青素概述31.2.1原花青素的化学结构41.2.2原花青素的理化性质41.2.3原花青素的生理功能51.2.4原花青素的测定71.2.5原花青素的应用81.3提取原花青素的方法91.3.1水溶液浸提法91.3.2有机溶剂-水提取法91.3.3超声辅助提取法101.3.4微波提取法101.3.5超临界二氧化碳萃取法101.4本论文研究内容及目的11第二章材料与方法122.1实验材料122.1.1材料122.1.2试剂与药品122.1.2仪器与设备122.2实验方法132.2.1原料的预处理132.2.2原花青素的提取提取单因素实验提取正交实验152.2.3原花青素的测定标准曲线的绘制样品的测定152.2.4原花青素稳定性的研究光照对原花青素的影响温度对原花青素的影响金属离子对原花青素的影响16第三章实验结果与讨论173.1标准曲线的绘制173.2单因素实验173.2.1选择最佳溶剂浓度173.2.2选择最佳料液比183.2.3选择最佳超声时间193.2.4选择最佳超声功率203.3正交实验203.4原花青素稳定性研究223.4.1光照对原花青素的影响223.4.2温度对原花青素的影响223.4.3金属离子对原花青素的影响23第四章结论25第五章工厂设计265.1项目名称265.2厂址选择265.2.1厂址选择的原则265.2.2厂址选择265.3可行性论证265.4主要原料及辅料275.5工艺流程及操作要点275.5.1工艺流程275.5.2操作要点275.6物料衡算275.7设备选型295.8全厂平面图295.9车间平面图29参考文献33致谢33第一章文献综述1.1刺五加研究进展1.1.1刺五加概述刺五加Acanthopanaxsenticosous(Maxim.)Harms为五加科(Araliaceae)五加属(Acanthopanax)植物。刺五加别名有：[1]生于低山，散生或丛生于丘陵阔叶或针阔叶混交林下及林缘，加为“本经上品，能“补中益气，坚筋骨，强意志，久服轻身耐老。民间有“宁得一把五加，不用金玉满车的说法[2]。止记忆衰退等活性，在医学上称之为“适应原样药物[3]。尤其是所含有的多种糖类和刺五加苷是理想的干扰素促诱生剂、可提高肌体内的干扰素水平，增强肌体的免疫能力。工制品，使其使用量日益增加，刺五加的应用也越来越广泛。每年刺五加的需求量为500成分及临床应用等各个方面进行有计划的研究工作[4]。1.1.2刺五加的主要营养物质茎、种子种。皂苷类化合物为刺五加主要活性成分之一，Shao等人在刺五加中共发现出13种刺五加皂苷分别为A1、A2、A3、A4、B、C1C2C3C4D1D2D3和E都是在齐墩果烷型的配基上连有双糖链或者单糖链,其中A1、A2、A3、A4和D3是他们从叶新分离的皂苷[5]。郭明全、宋凤法提取的刺五加中皂苷含量，结果表明，超声方法比较较好，提取的总皂苷含量达到18.59%术中受体心脏的作用[6]。[7]黄酮类化合物具有抗自由基抗氧化、抗癌、抗病毒、抗炎症、预防有重要意义[8]。用正交试验优化超声提取工艺参数，用苯酚-硫酸法测定刺五70℃的提取温度，90min的提取时间，500W具有一定的抗氧化活性，能清除有机自由基[9]。刺五加中还含有多种矿物质元素及氨基酸，其中包括K、Na、Mg、Ca、P、Al、Si等宏量元素，还有Fe、Cr、Mn、Cu、B、SrNiMoBiTi中含有16种氨基酸，其中7种为必需氨基酸，并且天门冬氨酸和谷氨酸的含量较高[10]。1.1.3刺五加药理作用（1）抗疲劳作用实验表明刺五加提取物具有明显的抗疲含量以及清除乳酸能力等抗疲劳作用指标是随着总苷量的增[11]。从刺五加中分得的糖苷给大鼠口服22d50mg/(kg.d)，服药第886次五加具有明显的抗疲劳作用[12]。（2）提高免疫力作用刺五加多糖和刺五加苷类均能明显提高E等都能有效的抵抗自由基，对重建B法是通过研究小鼠的胃缺血再灌注损伤的防护效果来研究其节作用[13]。（3）抗衰老：衰老是人体各器官功能开始逐步降低的一过氧化，延缓人体的衰老。（4）抗菌消炎的作用：刺五加对切除肾上腺的小鼠，在展[14]应用刺五规注射液治疗2613例作对照，其对病毒性肝炎也有一定的作用[15]。1.2原花青素概述原花青素（Proanthocyanidins或Procyanidins，简称PC等领域[16]1995WholeFoods杂志举行了由公众自89.9%的选票集中在10被认为是最受美国公众青睐并风靡美国草药市场的植物药。1.2.1原花青素的化学结构1961国Karl等从英国山楂新鲜果实的乙醇提取物中首次分离出2种多酚化合物；1967年，美国Joslyn等又从葡萄皮和籽提取物中分离4素[17]。缩合而成的多聚体，主要包括儿茶素的单体、二聚体、三聚为低聚原花青素，简称OPC。而将五聚体以上的称为高聚原花PPCOPC在体内其抗氧化、清除自由基的能力很强，并吸收迅速完全，口服20min7h的原花青素是儿茶素或表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体，在二聚体中由于两个单体的构象和键合位置的不同，8种结B1~B8B1~B4是由C4~C8键合，B5~B8是由C4~C6键合[18]。在各种原花青素种类中，二聚体分布最广，研究也是最多，二聚体是一类最重要的原花青素。1.2.2原花青素的理化性质羟基等的数量也有关。[19]。另外，原花青素结构中有较多的羟基，使其更易溶于水、在溶剂中的溶解度[20]。合度有关[21]的耐光、耐热性，而高聚原花青素却很容易凝聚沉淀。原花青素在280nm保健食品等的研发领域。1.2.3原花青素的生理功能原花青素是目前国际上公认的清除人体内自由基最有效的天然抗氧化剂之一，它的抗氧化能力是维生素E的50倍以上，是维生素C的20倍以上。原花青素有抗氧化、清除自由射、抗诱变，皮肤保健及美容，改善视力等作用[22]。（1）抗氧化、清除自由基、抗衰老作用：现代医学及营等系统的疾病都与自由基的作用密切相关。1956年Harmon自以延迟衰老并能延长寿命[23]保护VE的生理活性、延缓其氧化消耗。另外，原花青素低聚-C和E机体，使之免遭氧自由基的损害。（2）降低血压和保护心脑血管：随着人年龄的增长，血OPC致心血管疾病非常重要的原因，原花青素可以透过血脑屏障，护作用[25]。（3）抗癌、抗肿瘤作用：大量的流行病学研究与动物试化剂和抗诱变因素，原花青素能使致癌物质毒性降低或消失，3个阶24h48h72h的生产抑制率分别为7%、30%、43%亡等有关[26]。（4S180肉瘤小鼠分别用60Co瘤细胞12天后做指标检测。结果发现：照射加原花青素的肿抑制由辐射所引发的的脂质过氧化[27]。（5）皮肤保健及美容作用：原花青素能降低黑色素酰胺美国家原花青素有“皮肤维生素（675例因长期在显示屏前工作的眼疲劳者，每天给予300mg，2个月后，其相对敏200名进士视网膜非炎性150mg力有明显的改善。1.2.4原花青素的测定醛-强酸法、铁盐催化比色测定法、高效液相色谱测定法、紫外分光光度法等。（1-强酸法：本方法适用于各种植物组织、器官A环草醛发生缩合缩合，生成在500nm处有最大吸收的有色物质，好[28]。（2）铁盐催化比色测定法：原花青素素是植物王国中广泛存在的一类黄烷-3-醇衍生物的总称，因聚合度的不同以及用硫酸高铁的催化作用，以盐酸水解将之变为红色的花青素，花青素在550nm该方法的反应中易形成副产物，且受结构影响较大，聚合度、反应的条件要求较高，重复性较差[29]。（3）高效液相色谱测定法：该方法是以液体为流动相，不同异构体的原花青素[30]。（4）紫外分光光度法：原花青素是无色物质，在可见光长在280nm青素。1.2.5原花青素的应用药品、化妆品、食品等领域中有广泛的应用。（120世纪80年代初即已被人所承认。在法国，用葡萄籽原花青素制通透性疾病及静脉与淋巴功能不全；法国Sanofi公司用葡萄剂；德国的Berkhman等研制了用于治疗酒精中毒的原花青素制剂[31]。（21990年法国Masquelier对原花青素在抗氧化活性和清除自由基的能力是它在化妆品领域使用的基等。（3）食品领域。由于原花青素来源于食物性原料且生产表现在以下几个方面[32]。B1等的光氧化变质。在维生素B2溶液中添加0.002%的原花青素后，在紫外灯下照射，观察到原花青素的防止光氧化效果十分显著。用于色素类的防护：β-胡萝卜素在光照射下，容易氧化分解而致产品褪色，如果在该产品中添加一定浓度的OPC，可有效防止其褪色。用于鱼肉加工产品：可防止咸鲑鱼、红鱼的褪色和变味，咸鲑鱼，放置不同时间测定，发现鲑鱼的红色色度变化不大，这表明原花青素对防止鲑鱼褪色效果显著。味料亦可防止其氧化变味。1.3提取原花青素的方法机溶剂-水提取法、还有仪器辅助提取法，其中仪器辅助提取法[33]。1.3.1水溶液浸提法品在水溶液中加热浸泡，该方法的优点是成本低，操作简单；缺点是提取的产品纯度较低，提取时间较长，提取率也较低，所以水溶液提取法一般很少单独使用。1.3.2有机溶剂-水提取法素溶解度大而对无效成分不容或少溶的溶剂从而将原花青素碎的原料用溶剂润湿膨胀后，装入渗透筒中，不断添加溶剂，试剂有毒，还容易燃烧，不利于安全生产。1.3.3超声辅助提取法高，而且无污染，因此有很好的运用前景。佳工艺条件为：在40℃下，料液比为1:40，乙醇溶液为40%，超声功率120W，超声时间10min[34]。1.3.4微波提取法透到介质的内部，形成独特的加热方式。在固液浸提过程中，水提法，这表明该工艺具有快捷、高效的特点[35]。1.3.5超临界二氧化碳萃取法超临界二氧化碳萃取法是近20年来发展起来的提取技术，的物质很多，但最为常见的是二氧化碳。该方法萃取能力强，溶解力大，效率高，但是由于设备昂贵，推广使用比较困难[36]。1.4本论文研究内容及目的光照、温度、金属离子对刺五加稳定性的影响。废渣再利用，变废为宝，实现资源的再利用，减少环境污染。而如果不好好处理将会有大量的微生物繁殖生长，使其腐烂，环保，具有重要的经济价值和广阔的市场前景。第二章材料与方法2.1实验材料2.1.1材料实验原料为实验室制刺五加酒所剩的残渣。2.1.2试剂与药品表2.1试剂与药品名称种类生产厂家香草醛分析纯天津市大茂化学试剂厂无水乙醇分析纯天津市恒兴化学试剂制造有限公司盐酸分析纯天津市科密欧化学试剂有限公司甲醇分析纯北京化工厂石油醚分析纯北京化工厂儿茶素分析纯成都曼斯特生物科技有限公司结晶硫酸镁分析纯天津市大茂化学试剂厂氯化钾分析纯北京化工厂无水氯化钙分析纯天津市科密欧化学试剂有限公司硫酸铜分析纯天津市大茂化学试剂厂2.1.3仪器与设备表2.2仪器与设备设备名称生产厂家DK-S26型电热恒温水浴锅上海精宏实验设备有限公司722S分光光度计上海精密科学仪器有限公司NJL07-5超声波细胞粉碎机南京杰全微波设备有限公司XT-350A型高速摇摆粉碎机浙江永康市红太阳机电有限公司电子天平上海友声衡器有限公司真空抽滤机科大创新股份有限公司2.2实验方法2.2.1原料的预处理脂后的刺五加籽粉保存备用。2.2.2原花青素的提取助浸提。浸提后，抽滤得到滤液。提取单因素实验用超声辅助提取原花青素主要考虑到乙醇浓度、料液比、优化原花青素的提取率。（1）乙醇浓度准确地称量2.0g刺五加籽粉置于100mL的小烧杯中，分别加入60mL浓度为30%40%50%60%70%200W的超声波作用20min。（2）料液比准确地称量4.0g刺五加籽粉于100mL的小烧杯中，加入40mL浓度为50%的乙醇溶液使得料液比为1:10；准确地称量3.0g刺五加籽粉于100mL60mL浓度为50%的乙醇溶液使得料液比为1:20；准确地称量2.0g刺五加籽粉于100mL60mL浓度为50%的乙醇溶液使得料液比为1:302.0g刺五加籽粉于100mL的小烧杯中，加入80mL浓度为50%的乙醇溶液使得料液比为1:40；准确地称量1.0g刺五加籽粉于100mL50mL浓度为50%的乙醇溶液使得料液比为1:50；准确地称量1.0g刺五加籽粉于100mL60mL浓度为50%的乙醇溶液使得料液比为1:60；在200W的超声波作用20min。（3）超声时间准确地称量1.0g刺五加籽粉于100mL的小烧杯中，加入50mL浓度为50%的乙醇溶液，在200W的超声波下分别作用10min、15min、20min、25min、30min。（4）超声功率准确地称量1.0g刺五加籽粉于100mL的小烧杯中，加入50mL浓度为50%的乙醇溶液，分别在100W、200W、300W、400W、500W的超声波作用20min。提取正交实验L9(34)正交表进行实验，以确定适宜的提取条件。2.2.3原花青素的测定采用浓盐酸-香草醛比色法测定原花青素的含量[37]。标准曲线的绘制10.0mg，用去离子水溶解并定容至25.0mL，再精密称量香草醛8.0g，用甲醇溶解并定容至200mL1.0mL，2.5mL，4.0mL，5.5mL7.0mL10mL的儿茶素标准溶液1.0mL，加入香草醛-甲醇溶液6mL，摇匀，再加入浓盐酸3mL，混合均匀，每组三个平行，避光反应4h。以1mL甲醇溶液，6mL香草醛-甲醇溶液和1mL浓盐酸混合溶液500nm横坐标，吸光度为纵坐标，得到标准曲线[38]。样品的测定吸取1.0mL6mL香草醛-甲醇溶液，3mL4h1mL甲醇溶液，6mL香草醛-甲醇溶液和1mL浓盐酸混合溶液作为空500nm标准曲线计算出原花青素的提取率。计算公式如下：提取率（%）=提取出的原花青素的质量/刺五加籽粉的质量*100%2.2.4原花青素稳定性的研究光照对原花青素的影响封并分别在经过0h、2h、4h、8h、1d、2d时，观察原花青素的变化情况，测定其含量每组做三个平行试验。温度对原花青素的影响取一定量的的刺五加籽原花青素提取液4放置在室温和406080℃的水浴锅中恒温2h每组做三个平行试验。金属离子对原花青素的影响选取四种常见的金属离子，分别是K+、Mg2+、Cu2+、Ca2+。在不超过各金属离子在一般食品中的最大安全使用量（0.01mol/L0.1mol/L中金属离子的浓度为0.01mol/L。避光密封置于室温下，分别在经过0h3h1d3d时取样测定其中原花青素含量的变化，先观察颜色变化，再测含量，每组做三个平行试验。第三章实验结果与讨论3.1标准曲线的绘制标准曲线如图3.1所示，回归方程为：A=0.002C—0.0119，R2=0.9981A:C:原花青素质量浓度ug/mLR2:相关性因数图3.1原花青素的标准曲线3.2单因素实验3.2.1选择最佳溶剂浓度3.2的提取率先上升后下降，在乙醇浓度为50%时提取率达到了最有较大影响。因此乙醇浓度为50%为最佳提取浓度。图3.2乙醇浓度对原花青素提取的影响3.2.2选择最佳料液比图3.3料液比对原花青素提取的影响3.3可以看出在料液比为1:50之前，原花青素的提取率明显呈线性增加，当料液比为1:50时，刺五加籽中的原花青素已经基本溶出，再据实验结果考虑到原料和乙醇的利用率，选择1:50的料液比较为合适。3.2.3选择最佳超声时间图3.4超声时间对原花青素提取的影响以乙醇为溶剂用超声波辅助的方法提取刺五加籽中的原3.4可见，超声时间为20min取。因此，最佳超声时间应选为20min。3.2.4选择最佳超声功率图3.5超声功率对原花青素提取的影响3.5400W400W，而降低了提取效果。因此，最佳提取功率为400W。3.3正交实验率进行四因素三水平的正交实验，正交实验因素见表3.1，正交实验结果见表3.2。表3.1：正交实验因素水平表水平乙醇浓度%（A）料液比（B）超声时间min（C）超声功率W（D）145451532025050204003555525480表3.2：正交试验结果表试验号A乙醇浓度B料液比C超声时间D超声功率提取率（%）111110.611212220.722313330.728421230.735522310.721623120.688731320.784832130.732933210.688k10.6850.7100.6770.673—k20.7150.7250.7150.731—k30.7350.7010.7440.732—R0.0480.0240.0670.059—影响大小顺序C>D>A>B最优工艺A3B2C3D3响大小顺序为：超声时间>超声功率>溶剂浓度>料液比。最优提取工艺条件为：A3B2C3D3，即乙醇浓度为55%，料液比为1:50，超声时间为25min480W提取率为0.792%。3.4原花青素稳定性研究3.4.1光照对原花青素的影响由图3.6时，稳定性较好，吸光度值下降不明显。以上实验结果表明，在阴暗无光处。图3.6光照对原花青素的影响3.4.2温度对原花青素的影响由图3.760于60℃。图3.7温度对原花青素的影响3.4.3金属离子对原花青素的影响由图3.8Cu2+对原花青素的影响最大，而其他离子K+、Ca2+、Mg2+对原花青素影响较小。并且在原花应尽量避免Cu2+。图3.8金属离子对原花青素的影响第四章结论1从经发酵的刺五加籽中提取原花青素，提高了刺五加的的最佳工艺条件为：乙醇浓度为55%，料液比为1:50，超声时间为25min480W为0.792%。2、原花青素对光很敏感，不宜将其暴露在阳光之下，原花青素适宜储存在阴暗无光的环境中。360低于60应低于60℃，避免高温贮藏和加工。4Cu2+K+Ca2+Mg2+对原花青素免Cu2+的使用。第五章工厂设计5.1项目名称年处理量10000吨的原花青素提取厂5.2厂址选择5.2.1厂址选择的原则（1）厂址选择首先应符合国家的方针政策。食品厂的厂基建要求分期分批征用。（2）厂址选择应从生产条件方面考虑。根据我国具体情况，食品厂一般倾向于设在原料产地附近的大中城市的郊区，质条件。所选厂址附近应有良好的卫生环境，没有有害气体、放射性源，更要注意他们对食品工厂生产有无污染。（3）厂址选择应从投资和经济效果考虑。所选厂址应有附近不仅要有充足的水源，而且水质也应较好。5.2.2厂址选择区，这里交通便利，环境较好，周围有较多的食品厂。5.3可行性论证原花青素是植物中广泛存在的一大类多酚化合物的总称，公认的强抗氧化剂，因此开发原花青素有很大的市场前景。又有着良好的经济价值，具有可行性。5.4主要原料及辅料以酿酒剩余的刺五加籽为原料，以乙醇、石油醚为辅料。5.5工艺流程及操作要点5.5.1工艺流程刺五加籽烘干→分离→打粉→脱脂处理→超声提取→抽滤→蒸馏→原花青素。5.5.2操作要点（1）烘干：将酿酒剩余的刺五加残渣放在烘箱中烘干，烘干至恒重，表面呈坚硬干状即可。（2）分离：用去皮机将刺五加籽和残渣分离，去除刺五加皮，得到刺五加籽。（3保存干燥状态，防止其受潮。（4）脱脂处理：将粉状刺五加籽进行脱脂处理，用石油醚浸泡样品，浸泡至石油醚颜色变化较小。（5）超声提取：以乙醇为提取剂，辅助超声提取技术提取原花青素，设定好超声时间和功率。（6）蒸馏：在蒸馏塔中蒸馏提取液，使乙醇蒸馏出来得到原花青素。5.6物料衡算年处理量Q=10000t全年生产天数：T==t(旺)+t(淡)=90+195=285d班产量:q(班)=Q/k(3t(旺)+2t(淡))=100000/0.75(3×90+2×195)=20t/班表5.6生产损耗一览表项目损失量%烘干分离-5.2%打粉-6%脱脂处理-8%超声提取-56%抽滤-10%蒸馏-14%由年处理量得刺五加籽的班处理量为20t/8小时生产，计算得每小时处原料为2500kg/h，物料衡算如下：（1）原料处理量为：20000kg/班。（2-5.2%，则烘干后产量为20000×（1-5.2%）=18960kg/班。（3）原料打粉：取打粉损耗为-6%，则打粉后产量为18960×（1-6%）=17822.4kg/班。（4-8%。则脱脂处理后产量为17822.4×（1-8%）=16396.6kg/班。（5150，则乙醇的需要量为16396.6×50=819830ml/-56%，提取后原花青素产量为16396.6×（1-56%）=7214.5kg/班。（6）抽滤：取抽滤损耗为-10%，抽滤后原花青素产量为7214.5×（1-10%）=6493.1kg/班。（7）蒸馏：取蒸馏损耗为-14%，则蒸馏后原花青素产量为6493.1×（1-14%）=5537.6kg/班。因此，该厂每小时原花青素的产量为：692.2kg/h。5.7设备选型表5.7车间仪器设备编号名称型号尺寸数量1鼓风干燥机BRW-90400×500×38082去皮机DHL-L50003000×2800×300053粉碎机BRI-J-2B2300×2100×300054贮料罐GB-L10001800×1800×100045配料罐DHL-L30002600×1500×200046超声反应器BHL-L10001800×1800×100057板框式过滤机GLM-21800×600×50038蒸馏器FZQ-51350×1940×100025.8全厂平面图见附图1。5.9车间平面图见附图2。参考文献[1]赵敏,王炎,康莉.刺五加果实及种子内源萌发物质活性的研究们[J].中国中药杂志,2001,26(8):534.[2]药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M]．广州广东科技出版社,2005年.[3]王志睿,林敬明,张忠义.刺五加化学成分与药理研究进展[J].中药材,2003,26(8):603.[4]贾继明,王宏涛，王宗权，等．刺五加药理活性研究进展[J]．中国现代中药，2010，12（2）：7-10．[5]ShaoC.J,KasaiR,XuJDandTanakaO.SaponionsfromLeavesofAcanthopanaxSenticosusHarms,Ciwujia:StructuresofCiwujianosidesB,C1,C2,C3,C4,D1,D2andE..Bull.1988,36:601-608.[6]-分光光度法测定刺五加叶中总皂苷含量[J]．分析化学来搞摘登，2002，30（2）：250．[7][J]究，2006（2）：7-19．[8]DaliaYoussef,HalaEl-onGrapeSeedsExtractionandOpitimization:Approach[J].JoumalofAppliedSciences,2006,6(14):2944-2947.[9]CookN.CSammanSFlavonoids-Chemistry,metabolism,cardioprotectiveeffects,anddietarysources[J].,1996,2:66-70.[10]孟繁磊,陈瑞战，张敏,等.刺五加多糖的提取工艺及抗氧化活性研究[J].食品科学,2010,10(31):168-173.[11]李筱玲，邓寒霜．刺五加茎叶化学成分分析[J]．商洛师范专科学校学报，2006，20（1）：103-105．[12]徐峰,赵江燕,刘天硕.刺五加提取物抗疲劳作用的研究[J].食品科学,2005,9(26):453-455.[13]NishibeS.PhenolicpoundsfromslembatkofAcanthopanaxsemicosusandtheirpharmacologicaleffectinchwnicsuirmmngstesscelrats[J].ChemPharmBull,1990,38(6):1763.[14]实验研究[J]．中国中谣医结合脾胃杂志，1998，6(4)：226—228.[15]贺立人．刺无加注射液治疗重症肝炎26例效果观察[J].右江比族医学院学报，1999，21(2)：318.[16]步文磊，王茵．原花青素的生物活性及作用机制研究进展[J]．国外医学卫生学分册，2007，34(5)：311-315．[17]KaurCandKapoorHC.Anti-oxidantactivityandtotalphenoliccontentofsomoAsianvegetables[J].InternationalJournalF00dScienceandTechnology,2002,(37):153—161.[18].LamuelaoftotalphenolsandotheroxidationsubstratesandantioxidantsbyllleansofFolina2ioealteureagent[J].MethodsinEnzyrmology,1999,299:152-178.[19]暴悦梅，佟永薇，章勤学．葡萄籽中原花青素的研究[J]．食品研究与开发，2010，l(5)：185．186．[20]HouDX,MasuzahiS,HashimotoEeta1.Greenteaproanthocyanidinsinhibitcyclooxygenase-2expressioninLPS—activatedmousemaerophages:molecularmechanismsandstructure-activityrelationship[J].ArchBiochemBiophys,2007,460(1):67—74.[21]张