CF系列免疫荧光染料选择方案

常用抗体标记荧光染料的选择CFTM系列(BIOTIUM,USA);AlexaFluor®系列(Lifetechnology,USA);DyLight系列;Cy系列;IRDye系列等AlexaFluor®CFTM系列。CFTMAlexaFluor®系列具有以下几点优势：型罗丹明核心罗丹明染料以优异的耐光性和良好的荧光量子产量著称。因此很多AlexaFluor®染料具有Biotium科学家觉察CF染料的产CF如：(以以下图)已经淬灭。特异性高的近红外染料聚合体多、荧光量子产量差等问题。为了解决这些问题，很多商用的近红外染料比方AlexaFluor®DyLight®dyes和IRDyes®近红外染料，在制备时吸附了大量的带负电荷的磺化更加严峻的问题，经这种染料标记的生物耦联物的非特异性结合。例如：与大量负电荷结合后可以显著的转变抗体的等电点，进而影响抗原抗体的特异性结合反响。综合以上内容，Biotium的科学家用革命性的方法设计出近红外染料CF，在避开引入大量负电荷的状况下，极大的保证了染料优异的理化特性。Biotium近红外的CF染料以花青或罗丹明染料为核心更好的水溶性。因此，近红外CF染料比其他近红外染料荧光强度更高，光稳定性好。最重要CF染料标记蛋白质样品相对于其他商业用近红外染料制备的抗体偶联物，最大限度的提高了信噪比。(见以以下图)CF系列染料(右图)是经过型改造过的染料，不会存在上述状况，而且染料的水溶性极好。.染料制备过程中含有大量带负电的磺化基团，简洁非特异性结合正电CF790的条带特异性比照。优异的标记效率生物偶联后的活性染料一般很简洁水解，会在运输，操作及储存中带来诸多不便，最终致染AlexaFluor®dyes,DyLight™dyesandIRDyes®等严峻的磺化作用有较强的吸湿性，恶化水解作用等问题。例如：AlexaFluor®488在应用时琥珀酰亚胺脂酯SE活性局部远低于〔8CFSEAlexaFluorSE更耐水解。总体来说，CFSE产品一贯的给出更高的标记效率，供给应用户更好的使用价值。选择方案：蓝色〔350-450nm〕CF350、AlexaFluor350、AMCA等CF350CF350AlexaFluor350AMCA的蓝色荧光染料，CF350的AlexaFluor350、AMCA,50%,水溶性更好,耐光性格外优秀亮,更简洁与现有的绿色荧光基团区分。CF405S/CF405M、AlexaFluor405近乎完善的匹配蓝色二极管激光器CF405S/CF405MAlexaFluor405405nm;谱线的蓝色二极管激光器完善的匹配。在流式细胞仪上的分析结果显示CF405S/CF405MAlexaFluor4051.7倍。绿色〔488nm〕CF488A 、AlexaFluor488、FITC、FAM、DyLight488、Cy2等----488nmCF488A以上染料其标记的抗体蛋白适用于全部配备488nmFL1通道检测；或者可用于荧光显微镜技术；CF488A最低限度的带电量降低了与抗体耦联物的非特异性结合；在红色通道溢出AlexaFluor488；耐光性好；水溶性好和pH料的标记率。ar8在较宽的H值范围内保持稳定〔；FITC488nm525nmPH值影响，PH值降低时其荧光强度减弱。橙红色〔543-555nm〕CF543AlexaFluor546ATTO550,Cy3,DyLight549,Rhodamine(TRITC)543nm的橙色荧光染料；CF™543荧光条带光明，耐光，水溶性好，确保了CF543染料与抗体的耦联物保持优异的水溶性，为该波段最亮的橙色荧光染料。例如：同等的标记程度下，CF543标记的羊抗鼠IgG抗体的亮度高于用AlexaFluor546标记的2~10倍。CF555、AlexaFluor555、Tetramethylrhodamine(TAMRA)等匹配Cy3滤光片的橙色荧光染料；红色〔568-594nm〕CF568、AlexaFluor®568,ATTO565,RhodamineRed568nm处红色荧光染料；CF568染料耐光性最好；高效水溶性；比AlexaFluor568标记的抗体亮度更亮；CF594、AlexaFluor®594,ATTO™594,DyLight™594,TexasRed 等最亮红色荧光染料；CF594由于其高量子产量和优异的水溶性而比AlexaFluor594光明2~4倍。同时CF594对光极其稳定，使它能被抱负地应用于诸如共聚焦显微镜和单分子显像条件苛刻的应用中去。远红外〔620-660nm〕CF620R、LightCyclerRed640620nm处；CF™620R是以红色荧光染料罗假设丹〔rhodamine〕为根底的远红外的荧光染料，该染料有高荧光亮度和极度的耐光性。它的吸取和放射光谱为617和639nm，该染的水溶性有利于生物耦合在水介质中，更好的保持耦联物的生物特异性结合。CF633、AlexaFluor633,AlexaFluor 647,Cy5,DyLight633,DyLight649等633/635nm激光线的最正确染料荧光染料；CF633染料的优点：当被633nm氦氖激光或635nm红色二极管激光激发时，产生最亮的抗体耦联物；光稳定性远高于AlexaFluor647；高效的水溶性CF640、AlexaFluor647,ATTO647N,Cy5,DyLight649等远红外荧光染料；CF640R〔rhodamine〕Cy5、AlexaFluor647；但以罗丹明〔rhodamine〕为根底的红色染料CF640R它最大的优点就是对光稳定性，Cy5和AlexaFluor647以花青素为根底，因此有着和花青素一样的特点即耐光性较差。极好的亮度和耐光性使CF640R被抱负的用于共聚焦显微镜和单分子成像等条件苛刻的检测中。CF647、AlexaFluor647,ATTO647N,DyLight649等远红外荧光染料；CF647Cy5、AlexaFluor647光明。CF660、AlexaFluor®660,Allophycocyanin(APC)等介于远红外近红外之间的荧光染料；近红外〔680-790nm处激发〕CF680R/680、AlexaFluor680,Cy5.5,IRDye680等近红外荧光染料；CF680是高水溶性的以花青素为根底的染料，分子量大约为3000。该染料标记抗体极佳，发出最亮的荧光和在免疫染色光谱相像的染料中产生最高的信噪比。CF680R分子量约为900，更适合标记核酸或者相对小的生物分子。CF680R是型的以罗丹明〔rhodamine〕为根底的高荧光亮度,极度耐光性染料，这使它可被抱负地用于共聚焦显微镜，单分子成像等条件要求苛刻的应用中。CF750、CF™770andCF™790等近红外荧光染料；CF750、CF770、CF790是领域内真正