液质使用操作规程

液质联用仪操作规程CG-YF1358-2023操作前检查检查氮气和氩气的出口压力，压力分别为0.5~0.6MPa和0.1~0.2MPa检查洗针溶液和流淌相流淌相须现配并超声，缓冲盐溶液过0.22μm微孔滤膜〔或者使用色谱纯的盐溶液和酸溶液〕ESI探针尖端。检查系统真空度，电离真空计读数〔区域〕应小于5×10-6Torr。检查废液液位，准时清空废液。操作步骤及留意事项开机翻开UPS电源翻开质谱电源，即翻开质谱主电源开关〔MainPowerSwitch〕至On〔/〕位置；翻开真〔VacuumSwitch〕Operational10小时后，翻开电子开关ElectronicsServiceSwitch〕Operational状态；〔CPU1～2分钟〕双击Quantumtune图标，进入质谱界面，点击QuantumTuneMaster界面上图ForePumpPressure1.0~1.5mTorr，IonGaugePressure小于6e-6Torr。翻开自动进样治理器和液相泵的电源化合物ESI/MS/MS质谱条件优化建立双击桌面 图标，翻开QuantumTuneMaster界面；在TuneMaster中界面上，选择菜单Workspace，选择CompoundOptimizationWorkspace按钮，显示CompoundOptimization工作界面；设置优化参数：选择OptimizationModes(优化模式)：MSOnly按钮；OptimizationMass列表中，输入母离子质量数;在优化参数列表中，选择( )优化的参数(SprayVoltage，Sheathgaspressure，Auxgaspressure，Tubelensoffset，Skimmeroffset)；Start按钮，开头优化；优化完毕后,选择Accept按钮；选择OptimizationModes(优化模式):MS+MS/MS按钮；OptimizationMass列表Numproduct列中，输入子离子个数(1~8)；在优化参数列表中,选择( )优化的参数(Collisionenergy)；Start按钮，开头优化；优化完毕后，选择Accept按钮；参数优化完成，保存质谱方法：选择Savetuneas按钮，选择保存位置，输入文件名称，保存质谱方法(.TSQTune文件)；单击定义扫描模式Definescan快捷图标，在扫描模式区单击鼠标右键,选择Copyscanevent。化合物LC/MS/MS方法建立双击桌面上LCQuan快捷图标,点击CreataNewWorkbook，输入相应StudyName〔争论课题的名称等〕Workbooknam〔试验的名称和日期nex，选择同一文件夹里已存在的workbook〔首次编辑方法时不选择该项Next，进入LCquan主界面在LCquan主页上，点击InstrumentSetup按钮，建立LC/MS/MS方法；设置液相色谱局部参数：Surveyor自动进样器参数设置：点击InstrumentSetup窗口中的SurveyorAS图标；输入WashVolume(如400μl)，FlushVolume(如400μl)；InjectionVolume：进样量，假设定量环为25ｕL，PartialLoop10ｕL〔即小于定量环体积的1/〔建议使用PartialLoop局部进样FullLoop25ｕLNeedleHeightfrombottom：2.0mmSyringeSpee〔ｕL/：8.0FlushVolume：如400ｕLFlush/WashSource：BottleTrayTemperature：10℃左右〔视样品性质而定〕ColumnOvenControl：35℃左右〔视样品性质而定〕Surveyor液相泵的参数设置：点击InstrumentSetup窗口中Surveyorpump图标；输入A，B，C，D流淌相名称，ColumnDescription(色谱柱标注)；设置流淌相条件(流淌相比例，流速等)；点击PumpGeneral，输入A、B、C、D各相代表流淌泵中的流淌相溶液的名称，最大柱压设定为400.0Bar；点击GradientProgram，设定流淌相梯度，可以使用等度洗脱或梯度洗脱。设置质谱局部(TSQQuantum)参数:点击InstrumentSetup窗口中的TSQQuantum图标;图中第一栏Runsetting是设定样品的运行时间〔MSAcquireTime〕是否使用分段扫描〔Segments〕等MSAcquireTime：样品的运行时间Segments：假设被测化合物较多时，可设置此项ScanEvents：设定扫描大事TuneMethodQuantumTune软件下优化的目标化合物的质谱条件ScanEvents：对于定量分析来说我们常常使用的是SR〔选择反响监测定母离子和子离子，扫描时间和各子离子的碰撞能量。SamevalueforallSRMsScanWitdt〔m/0.002~5Scantime：0.5左右〔具体值是扫描点数而定〕2.7.1.点击LCQuan界面下的Identification界面；PeakWidthQ〔FWH0.4或.点击LCQuan界面下的Identification界面；Datatype：Centroidprofile，样品分析时一般设置为CentroidSkimmerOffset：视化合物状况打算是否需要设定Pastescanevent按钮.点击质谱界面上的液相色谱掌握按键AS/LC/GCDirectControl观看各管路中是否有气泡，假设有气泡，翻开purge阀，AccelaPump界面上的flow设定为100ｕL/mi100Applpurge阀，将与purge阀连接的注射器中的液体排出。观看自动进样治理器挂壁上的注射器内是否有气泡，假设有气泡，则点击下拉菜单中100ｕL/minApply，完成后，假设还有气泡则重复一次，直到没有气泡为止。设定进样方法所用流淌相的起始比例及对应流速，平衡色谱柱至泵压稳定。样品序列建立及样品分析点击菜单栏Acquisition中的Setup选择样品类型SampleType:Unknown,QC,Blank,输入文件名称FileName：可以手动输入，也可点击鼠标右键扫瞄，选择已经存在的文件的文件名;SampleName：样品名称，一般设定为样品编号Level：用于定量计算时设置的不同浓度点的代号F.VialPos：设定样品瓶在进样器中的位置Position:A:1-A:40,B:1-B:40,C:1-C:40,D:1-D:40.E:1-E:40;G.InjVol：FromAS样品分析运行单个样品，在Sequence列表中鼠标点击选择需要运行的样品，单击按钮 ，设定样品运行完毕后仪器状态AfterSequenceSetSystem(On，仪器仍在扫描状态，Standby，仪器处在待机状态，Off，仪器关机)，单击OK，开头进样分析；运行多个样品:单击按钮，在RunRows空格中输入要运行的样品范围(在序列表中的行标,1-6)，设定样品运行完毕后仪器状态AfterSequenceSetSystem(On，仪器仍在扫描状态，Standby，仪器处在待机状态，Off，仪器关机)，单击OK，开头进样分析。通常需要将界面切换到在线监测界面，即点击Status完成界面切换定量数据处理方法建立2.7.2设置定量方法A定义定量方法(内标法，外标法)：单击Option菜单，单击Calibrationby,选择定量方法(内标法,InternalStandard,或者外标法ExternalStandard),点击OK;B.翻开一演示数据文件：左下角图谱中右键鼠标，openrawfiles，翻开一原始数据文件(在要作定量处理的数据中选择一个,最好是翻开一个标样的数据文件)；设置定量方法(内标法)参数:2.8.1点击定量列表设置图标，点击next，选择Createnewsequence，从工程文件夹下2.8.2点击Survey图标，查看Standards和QCs计算结果2.8.3点击ReviewAll图标查看全部样品计算结果2.8.4点击Report图标，选择相应的报告模板，生成定量结果文件，保存并供打印使2.8.1点击定量列表设置图标，点击next，选择Createnewsequence，从工程文件夹下2.8.2点击Survey图标，查看Standards和QCs计算结果2.8.3点击ReviewAll图标查看全部样品计算结果2.8.4点击Report图标，选择相应的报告模板，生成定量结果文件，保存并供打印使内标物的识别Identification参数：在component栏内菜单，选择add，直接输入内标物名称,扫描方法Filter(下拉菜单中选择内标物对应的扫描方法),点击OK,输入内标物保存时间Retentiontime,点击OK；内标物积分参数设定PeakDetectionAlgorithmICIS或者Genesis，输入内标物各积分参数,点击OK；定量组分积分参数设定PeakDetectionAlgorithm：积分方法，选择ICIS或者Genesis，输入该组分各积分参数,点击OK；校正曲线Calibration参数设定：单击Calibration缺省菜单；点击界面右上角组分(Components)列表栏内内标物的名称，定义其为内标物：在组分类型Componenttype栏内选择ISTD，点击OK；点击界面右上角组分(Components)列表栏内定量组分的名称，在Targetcompounds栏内,ISTD的下拉菜单中选中内标物,点击OK；标准溶液浓度Levels设定:单击Level缺省菜单，在左侧浓度列表内，CalLevel列内从上到下依次输入每个浓度的代号(如1,2,3···,或cal-1,cal-2,cal-3···,或者A,B,C···等)，Amount列内从上到下依次输入各标准溶液浓度值，单击OK，定量方法(内标法)建立完成；保存方法设置定量方法(外标法)参数：定量组分的识别Identification参数：设定定量组分的名称Name(点击界面右上角组分(Components)，直接输入该组分名称)，扫描方法Filter(下拉菜单中选择该组分对应的扫描方法)，点击OK，输入保存时间Retentiontime，点击OK；(假设是多组分定量,点击界面右上角组分(Components)，选择add，输入其次个组分名称，其他参数设定一样)；定量组分积分参数设定Detection：点击界面右上角组分(Components)列表栏内定量组分的名称，输入该组分各积分参数，点击OK；校正曲线Calibration参数设定：单击Calibration缺省菜单，设定各参数。LC/MS/MS方法保存，保存后，以后每次进展同一争论课题的样品分析时可以在此根底上调用和修改定量数据处理及定量结果扫瞄的RawfilesSta