江苏省血培养实验室操作指南

〔试行〕目录第一节 一、 血流感染定义二、 其次节 样本采集和运送一、 二、 采血时机三、 四、 采血量五、 血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的安排六、 采血要求七、 标本的运送要求和拒收标准第三节血培育标本分别病原菌的关键要素一、采血量二、血-肉汤比例三、培育基的选择四、孵育条件五、培育周期六、培育瓶摇动七、监控频率第四节特别类型的血培育一、 真菌血培育二、 分枝杆菌血培育三、 导管相关的血流感染〔CRBSI〕四、 第五节结果报告一、培育结果报告原则二、 培育结果的分级报告制度第六节血培育的质量把握一、 二、 分析中质量保证三、 第一节血培育的临床意义一、血流感染定义：是指各种病原微生物侵入血循环，在血液中生殖，释放S能障碍综合征S，是一种严峻的全身感染性疾病。病人血流中存在活的微生物对诊断和预后都有重〔或〕〔或感染灶〕去除，同时从血中分别的病原菌类型对预后也有重要的提示信息。其次节样本采集和运送一、血培育送检指征：当病人消灭以下系统炎症反响的临床或试验室特征时应次/PaCO2＜32mmHg；白细胞计数＞12*109/L或＜4*109/L。二、采血时机前采血培育。1患者有利，故做出以上建议。二、血培育的次数2—3套血培育，至少做到“双瓶双侧”。婴幼儿患者，推举同时采集2次(不同部位)血培育标本。1采集一套血培育。一次静脉采血注入到多个培育瓶中应视为单个血培育。l2380％90%。单瓶的血培育检出率不高，而且结果很难做出临床解释。2525天内，血液中的细菌不会马上消逝。一般来说菌血症(真菌血症)患者可通过临床表现来推断疗效，无需复查血〔或真菌血症〕是否被去除可被用于评估和指导治疗；其次4896小时的追踪可以很好的推想简洁的金黄色葡萄球菌菌血症。三、采血量10ml5ml，2ml〔1。说明：血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素，成人血培育采血量在2-30m11ml同于成人。试验室必需依据血培育瓶厂家的建议，采集足够的血液标本。血液量是否符合要求，并准时反响给临床，这是质量保证的一项重要指标。四、血液标本在需氧瓶和厌氧瓶中的安排当采血量不能满足推举的采血量时，应首先满足需氧瓶的需要。说明：承受一对(需氧瓶+厌氧瓶)组合比承受二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。五、采血要求〔一〕皮肤消毒：推举使用碘酊、次氯酸和洗必泰或碘伏作为皮肤消毒剂说明：碘酊、次氯酸和洗必泰的消毒效果要优于碘伏；消毒剂要有足够的作用时间以保证消毒效果〔301.5-2；洗必泰的作2〔二〕推举从外周静脉采集血液标本。说明：不建议采集：1，动脉血，因其诊断价值不大；2，静脉留置导管，集另外一个血培育标本，以帮助阳性结果的判读。〔三〕如何削减污染170％异丙醇酒精消毒并枯燥，然后再进展穿刺部位的皮肤消毒。2、严格依据皮肤消毒步骤操作(酒精、碘酊、酒精)，并等待足够的消毒时间3、严格无菌操作，不允许在消毒后按压静脉，除非带有无菌手套。4、不推举采血后更换注射器针头接种血培育瓶，承受真空采血装置能降低污染率。六、标本的运送要求和拒收标准〔一〕运送要求11小时内送往试验室。2、接种前或后的血培育瓶均不得冷藏或冷冻。〔二〕拒收标准：如遇以下状况，试验室应拒收并要求重送1、标签错误或未贴标签。2、血培育瓶破损或渗漏。3、血液凝固。第三节血培育标本分别病原菌的关键要素一、培育设备：提倡使用全自动血培育仪，可以更早觉察病人的菌血症。二、〔〕-肉汤比例〔例如：补体、溶菌酶、抗体、抗生素〔假设病人采血前已承受抗生素治疗。为了削减这些抑菌因子浓度从而降低其抑菌活性，通常血-1:51:10，一些商品化血培育瓶使用的血-1:5是由于在其中增加了与血中抑制因子结合并使其失活的特别物质；儿科病人的血标本可以被接种入专为儿科设计的血培育瓶，这些瓶子可以接种较少的血容量却保持了合理的血-肉汤比例。四、培育基的选择推举使用商品化的培育基。(如树脂或活性碳)五、孵育条件1、温度：35℃，35℃2、气体：商品化的需氧血培育瓶中参与了不等量的二氧化碳，厌氧瓶中则参与了二氧化碳和氮气以利于不同种类细菌的生长。五、培育周期57天。5天后阴性标本无需进展常规转种。95％—973—4〔1028。六、培育瓶摇动24瓶的。七、监控频率查来检查细菌生长状况。和厌氧血培育瓶中细菌生长曲线。当消灭提示生长的阳性信号时进展次代培育。第三节 特别类型的血培育一、真菌血培育：疑心真菌菌血症的患者承受需氧血培育瓶采集标本。2-5〔如光滑念珠菌、型隐球菌〕则需要更长的孵育时间。双相真菌虽然可以在多数商业化的需氧血培育瓶中生长，但检测可能需要2-4周的时间，因此全自动血培育系统不适用于双相真菌的检测，一旦疑心为双相真菌或丝状真菌感染，血二、分枝杆菌血培育425-30℃。补充白蛋白、脂肪酸和二氧化碳，日内瓦分枝杆菌、嗜血分枝杆菌等菌还需要添加分枝菌素、血红素、血红蛋白、枸橼酸铁铵等物质。三、导管相关的血流感染〔CRBSI〕〔一〕短期外周导管2〔双侧双瓶Maki半定量培育。5cm，15〔4℃保存不超2〕。试验室人员用无菌镊子将导管在血琼脂平板上穿插滚动415结果解释如下：假设一套或多套血培育阳性，同时导管片段培育为阳性(半定量≥15个菌CRBSI。CRBSI。CRBSI。CRBSI。〔二〕中心静脉导管及静脉留置口：方法一：至少实行2套血培育，其中至少一套来自外周静脉，并做好标记，接近，各自做好标记。结果解释如下：CBBSI。假设两套血培育阳性且为同一种细菌，而且来自导管的血培育报阳时间比120分钟，而两套血培育阳性为同一种细菌且耐药谱全都，同时缺乏其它感染证据，也提CBBSI。5倍于外周CFUs／mlCRBSI,(适用于手工定量血培育系统)。CRBSI，可能为寄生菌或采集时污染。·假设仅呈来自外周静脉的血培育为阳性，不能定为CRBSI，但如培育结果为CRBSI。CRBSI。方法二：从独立的外周静脉无菌采集2套血培育。无菌状态下取出导管并剪下5cmMaki半定量平板滚动培育。结果解释如下：CRBSI。假设一套或多套血培育阳性，同时导管末梢培育为阴性：如培育结果为金认可能要求血培育阳性结果且是同一种细菌作为结果支持。CRBSICRBSI。四、细菌性心内膜炎24小时内仍报25套。30分钟之内抽取血培育。301小时之内连续抽取数套血培育，管的血培育会伴有很高的污染风险从而导致错误的心内膜炎的结论。第五节结果报告一、血培育结果报告原则：紧急处理和优先原则：血培育的结果，无论阴性和阳性结果，对患者的治疗都很紧急!测的进展状况，该系统应包括：血培育已开单但未收到血培育已收到，符合采样要求血培育已收到，不符合采样要求检测中，尚无结果24小时无生长48小时无生长阳性报警，分别培育和药敏进展中，初步涂片染色结果阳性培育结果(细菌鉴定和药敏试验的最终结果)二、血培育结果的分级报告制度〔一〕初步报告：紧急口头()报告60分钟内，马上进展革兰染色、显微镜镜检，并将结果向临床主管医生进展紧急口头()4小时内将数据录入信息系统。口头报告包含以下内容，并记录在案：报告的时间(无论成功或不成功)所联系医生的全名(或工号)报告镜检结果并强调其紧急价值〔二〕最终结果(书面)报告无菌生长阳性培育结果：最终鉴定结果和药敏结果〔三〕其他报告和记录标本被柜收时，需即刻通知临床马上重采血，并记录在案最终结果与紧急口头报告结果不符，需要变更时，需即刻与临床沟通，做采集份数不够等信息第六节血培育的质量把握一、 检测前的质量保证和处理〔一〕病人评估：试验室应制定指南，明确血培育的临床指征〔二〕血培育标准操作规程(SOP)的制定和培训血培育标准操作规程应包括：·采血指征·采血时机·采血标准流程·标本的运送要求·血培育结果报告所需的检验工程，标准的诊断名称，以及相关试验室检验结果。试验室必需为SOP〔三〕标本采集52毫升)，并严格把握无菌操作规程。定期统计以下数据，作为QA指标：血培育污染率(应低于3％)低于建议的采血量的血培育样本比例单次或单瓶的比例被拒收的比例〔四〕2小时QA2小时的比例。〔五〕样本接收和处理包括评估是否可被接收、柜收标准、试验室接收记录和接种流程等。被柜收的标本需马上通知临床。QA举例：被拒收血培育标本的临床沟通文件。二、分析中质量保证SOP，做出明确和具体的规定血培育微生物检测的步骤菌株鉴定和相关菌株的药敏要求结果的解读时，须有试验室主管确实认意见)阳性和阴性结果的解释可能消灭的假阴性和假阳性结果，并分析缘由释结果的信息地记录。三、分析后的质量保证包括报告、标本和记录的治理、询问〔一〕报告血培育的报告在发出前