蛋白质结构与功能

化学教研室杨甲号662857生物化学生物化学的概念生物化学是研究生命的化学，即研究生物体内化学分子与化学反应，从分子水平探讨生命现象本质的科学。医学生物化学主要研究人体内化学变化规律，即研究人体的物质组成、新陈代谢及其生理功能的关系，从而为提高人类健康水平、预防、诊断和治疗疾病提供理论基础。生化研究内容蛋白质、酶、核酸的结构与功能糖、脂类、氨基酸、核苷酸代谢生物氧化遗传信息的传递肝的生物化学维生素

(一)人体的物质组成

(占体重)水：55％～67％蛋白质：15％～18％脂类：10％～15％糖类：1％～2％无机盐：3％～4％

核酸：2％(二)生物分子的结构与功能

结构是功能的基础，而功能是结构的体现。生物大分子的功能可通过分子之间的相互识别和作用来实现，如蛋白质、糖、脂类之间、蛋白质与核酸之间的相互作用在基因表达调节中起着决定性作用。生物化学研究内容

1.生物体的基本特征是新陈代谢，人的一生中与外界环境进行交换的水大约为60000kg、糖类10000kg、蛋白质1600kg、脂类1000kg，其总量约高达人体重量的1300余倍。(三)物质代谢及其调节

2.各种物质代谢途径之间存在着密切而复杂的关系，按照一定规律有条不紊地进行，需要神经、激素等整体性精确的调节来完成。

3.物质代谢中的绝大部分化学反应由酶催化，酶结构和含量的变化起着重要调节作用。(四)基因信息传递及调控基因信息传递涉及到遗传、变异、生长、分化等生命过程，与遗传性疾病、恶性肿瘤、代谢异常性疾病、免疫缺陷性疾病、心血管病等的发病机制有关。DNA复制RNA复制转录逆转录蛋白质翻译生物化学与医学(一)发病机制的阐明1.糖类代谢紊乱导致的糖尿病。2.脂类代谢紊乱导致的动脉粥样硬化。3.氨代谢异常与肝性脑病。4.胆色素代谢异常与黄疸。5.维生素缺乏与夜盲症和佝偻病。6.基因突变导致肿瘤。7.遗传性酶缺乏导致白化病、痛风等。8.蛋白质空间构象改变导致疯牛病。(二)疾病的诊断、治疗

1.体液中无机盐类、有机化合物和酶类等的检测诊断。

2.PCR技术和基因诊断检测技术的临床应用、法医学鉴定和流行病学调查。

3.遗传病基因疗法、传染病基因疗法、肿瘤基因疗法和其他疾病基因疗法的完善和应用。

生物化学的发展必将对临床、预防、护理、影像、检验和药学等领域产生重大影响。只有扎实地掌握生物化学的基本理论和基本技能，才能有望成为合格的医务工作者。

问题烫发原理？（pr结构）减肥该怎样减？（糖代谢）狗急为什么能跳墙？（生物氧化）为什么增肥容易减肥难？（aa代谢）适当多吃西红柿美白吗？（aa代谢）肝病患者喝酸奶好还是喝纯奶好？第一章

蛋白质结构与功能学习要求掌握蛋白质的元素组成与平均含氮量掌握蛋白质的一、二、三、四级结构及维系键熟悉20种氨基酸名称熟悉蛋白质的理化性质了解血浆蛋白质的种类和功能第一节蛋白质的分子组成一、蛋白质的元素组成和特点有些蛋白质含有少量磷或金属元素铁、铜、锌、锰、钴、钼，个别蛋白质还含有碘。组成:主要有C、H、O、N和S。各种蛋白质的含氮量很接近，平均为16％

蛋白质含量(g%)=含氮量(g%)×6.25特点:平均含氮量为16％;

每g氮相当于6.25g蛋白质三聚氰胺事件习题蛋白质中氮的含量约占的百分数是：A6.25%B10.5%C16.0%D19%E25%一个生物样品的含氮量为5%，它的蛋白质含量为（）A8.80%B12.50%C16.0%D38.0%E31.25%什么是蛋白质?蛋白质(protein)是由许多氨基酸(aminoacids)通过肽键(peptidebond)相连形成的高分子含氮化合物。二、蛋白质的基本单位——氨基酸Praa(一)氨基酸的通式H+、OH-、E最终水解产物存在自然界中的氨基酸有300余种，但组成人体蛋白质的编码氨基酸仅有20种。H甘氨酸CH3丙氨酸L-氨基酸的通式R

各种氨基酸的结构区别在于侧链（R基团）的不同，故具有不同的理化性质。C+NH3COO-H透视式缬氨酸valineValV5.96甘氨酸glycineGlyG5.97丙氨酸alanineAlaA6.00亮氨酸leucineLeuL5.98异亮氨酸isoleucineIleI6.02苯丙氨酸phenylalaninePheF5.48脯氨酸prolineProP6.30中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

CHCOOHNH2HCH3CH3-CHCH3CH3-CH-CH2CH3CH3-CH2-CHCH3CHCOOHNH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2-CH2CHCOOHNH2

CH2CHCOOHNHCH2CH2蛋氨酸methionineMetM5.74CH3SCH2CH2CHCOOHNH2色氨酸tryptophanTrpW5.89丝氨酸serineSerS5.68酪氨酸tyrosineTryY5.66半胱氨酸cysteineCysC5.07天冬酰胺asparagineAsnN5.41谷氨酰胺glutamineGlnQ5.65苏氨酸threonineThrT5.60CHCOOHNH2-CH2NHHO-CH2CHCOOHNH2-CH2CHCOOHNH2HO-HS-CH2CHCOOHNH2H2N-C-CH2CHCOOHNH2OCHCOOHNH2H2N-C-CH2-CH2OCHCOOHNH2HO-CHCH3中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

非极性侧链氨基酸(8种)

水溶性小。其侧链为非极性疏水基团。

极性中性侧链氨基酸(7种)

易溶于水，但色氨酸微溶于水。其侧链具有亲水性(除色氨酸外)。酸性氨基酸(2种)

侧链上有羧基，在水溶液中能释放出H+而带负电荷。碱性氨基酸（3种）

侧链上有氨基、胍基、咪唑基等，在水溶液中能接受H+

而带正电荷。（二）氨基酸的分类缬氨酸valineValV5.961.非极性疏水性侧链氨基酸(8种)甘氨酸glycineGlyG5.97丙氨酸alanineAlaA6.00亮氨酸leucineLeuL5.98异亮氨酸isoleucineIleI6.02苯丙氨酸phenylalaninePheF5.48脯氨酸

prolineProP6.30中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

CHCOOHNH2HCH3CH3-CHCH3CH3-CH-CH2CH3CH3-CH2-CHCH3CHCOOHNH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2-CH2CHCOOHNH2

CH2CHCOOHNHCH2CH2蛋氨酸methionineMetM5.74CH3SCH2CH2CHCOOHNH22.极性中性侧链氨基酸(7种)色氨酸tryptophanTrpW5.89丝氨酸serineSerS5.68酪氨酸tyrosineTryY5.66半胱氨酸cysteineCysC5.07天冬酰胺asparagineAsnN5.41谷氨酰胺glutamineGlnQ5.65苏氨酸threonineThrT5.60CHCOOHNH2-CH2NHHO-CH2CHCOOHNH2-CH2CHCOOHNH2HO-HS-CH2CHCOOHNH2H2N-C-CH2CHCOOHNH2OCHCOOHNH2H2N-C-CH2-CH2OCHCOOHNH2HO-CHCH3中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

3.酸性氨基酸(2种)天冬氨酸asparticacidAspD2.97精氨酸arginineArgR10.76组氨酸histidineHisH7.59

HOOC-CH2CHCOOHNH2谷氨酸glutamicacidGluE3.22CHCOOHNH2

HOOC-CH2-CH24.碱性氨基酸(3种)中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

赖氨酸lysineLysK9.74NH2CH2CH2CH2CH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2NH2-CNHCH2CH2CH2NHCHCOOHNH2HCCH2NHCNCH1.含硫氨基酸半胱氨酸

+-HH-CH-CH-NHHOOC-CH-CH2-SHNH2HS--COOHCH-CH2NH2半胱氨酸

-CH-CH-NHHOOC-CH-CH2-SNH2S--COOHCH-CH2NH2二硫键胱氨酸(三)几种特殊氨基酸2.芳香族氨基酸CH2CHCOOHNH2苯丙氨酸CH2CHCOOHNHCH2CH23.亚氨基酸脯氨酸共同特性α-氨基酸（pro是α-亚氨基酸）L-α-氨基酸（Gly除外）结构特点20种编码氨基酸（名称和缩写）；碱性aa：拣来精读（碱-赖-精-组）酸性aa：三伏天（酸-谷-天）含硫aa：留帮光蛋（硫-半-胱-蛋）对映异构体α-碳原子手性碳原子共同特性α-氨基酸（pro是亚氨基酸）L-α-氨基酸（Gly除外）结构特点20种编码氨基酸（名称和缩写）；碱性aa：拣来精读（碱-赖-精-组）酸性aa：三伏天（酸-谷-天）含硫aa：留帮光蛋（硫-半-胱-蛋）8种必需氨基酸缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苏氨酸、赖氨酸写一两本淡色书来缬异亮苯蛋色苏赖习题下列为非编码氨基酸的是（）A半胱氨酸B组氨酸C鸟氨酸D丝氨酸E亮氨酸蛋白质的基本组成单位是（）A肽键平面B核苷酸C肽D氨基酸E碱基(四)氨基酸的理化性质1.两性解离及等电点氨基酸是两性电解质，其解离方式取决于所处溶液的酸碱度。等电点(isoelectricpoint,pI)

在某一pH的溶液中，氨基酸解离成阳离子和阴离子的趋势及程度相等，成为兼性离子，呈电中性。此时溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。调节pI、分离提纯氨基酸。pH=pI+OH-pH>pI+H++OH-+H+pH<pI氨基酸的兼性离子阳离子阴离子CHNHCOOHRCHNH2COOHRCHNHCOORCHNH2COO-RCHNHCOORCHNH3COO-R+CHNHCOOHRCHNH3COOHR+中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

酸性氨基酸(2种)天冬氨酸asparticacidAspD2.97精氨酸arginineArgR10.76组氨酸histidineHisH7.59

HOOC-CH2CHCOOHNH2谷氨酸glutamicacidGluE3.22CHCOOHNH2

HOOC-CH2-CH2碱性氨基酸(3种)中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

赖氨酸lysineLysK9.74NH2CH2CH2CH2CH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2NH2-CNHCH2CH2CH2NHCHCOOHNH2HCCH2NHCNCH色氨酸

tryptophanTryW5.89丝氨酸serineSerS5.68酪氨酸

tyrosineTryY5.66半胱氨酸cysteineCysC5.07天冬酰胺asparagineAsnN5.41谷氨酰胺glutamineGlnQ5.65苏氨酸threonineThrT5.60CHCOOHNH2-CH2NHHO-CH2CHCOOHNH2-CH2CHCOOHNH2HO-HS-CH2CHCOOHNH2H2N-C-CH2CHCOOHNH2OCHCOOHNH2H2N-C-CH2-CH2OCHCOOHNH2HO-CHCH3中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm

附近。大多数蛋白质含有这两种氨基酸残基，此方法是分析溶液中蛋白质含量的快速简便的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收240250260270280290300310光密度色氨酸酪氨酸波长(nm)2.紫外吸收3.茚三酮反应

氨基酸与茚三酮水合物共热，可生成蓝紫色化合物，其最大吸收峰在570nm处。由于此吸收峰值与氨基酸的含量存在正比关系，因此可作为氨基酸定量分析方法。2NOOOOOOOHOH+R-CH-COOHNH2+RCHOCO2+H++水合茚三酮罗曼紫(蓝紫色)三、氨基酸在蛋白质分子中的连接方式

(一)肽键(peptidebond)是由一个氨基酸的-羧基与另一个氨基酸的-氨基脱水缩合而形成的化学键。肽键甘氨酸+HNH2CHCOOHHNHCHCOOHH甘氨酸-HOH甘氨酰甘氨酸HNH2CHCOHNHCHCOOH1.肽是由氨基酸通过肽键缩合而形成的化合物。2.两分子氨基酸缩合形成二肽，三分子氨基酸缩合则形成三肽……(二)肽(peptide)3.由十个以内氨基酸相连而成的肽称为寡肽，由更多的氨基酸相连形成的肽称多肽。

4.肽链中的氨基酸分子因为脱水缩合而基团不全，被称为氨基酸残基(residue)。5.多肽链(polypeptidechain)是指许多氨基酸之间以肽键连接而成的一种结构。分别有：N末端：多肽链中有自由氨基的一端，C末端：多肽链中有自由羧基的一端。SerAspSer+H3NLysGluThrAlaAlaAlaLysPheGluArg110GlnHisMetAspSerSerThrSerAlaAlaSerSerTyrSerAsnCysAsnGlnLeuArgProValLeuValAsnArg30GlnHisMetAspGlnValThrSerAlaAlaSerAsnThrSerAsnCysAsn20MetLysLysLys40ThrValGlu50AspGlnCysCysCysCys60LysAlaCysCysLysAsnGluThrGlnThr70ThrSerTyrSerAspThrIleSerMet80SerArgGlySerGluThr90AsnProLysTyrTyrLysThrAlaThr100LysIleGlnHisAlaAsnAlaIleValAlaAspPheHisValProValTyrProAsnGlyGlu110120ValSerCOON末端C末端牛核糖核酸酶124（三）几种生物活性肽

生物活性肽是具有重要生理功能的小分子肽，由几个至几十个氨基酸残基组成。谷胱甘肽1.谷胱甘肽(glutathione,GSH)由谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸组成的三肽保肝药与GSSG间的相互转换GSH有抗氧化性，能保护一些含巯基的蛋白质和酶免受氧化剂的破坏，维持红细胞膜结构的稳定。自由基2.多肽类激素及神经肽寡肽或多肽类激素，如催产素（9肽）、加压素（9肽）、促肾上腺皮质激素（39肽）、促甲状腺素释放激素（3肽）等。神经肽：一类在神经传导过程中起信号转导作用的肽类。如脑啡肽（5肽）、强啡肽（17肽）。习题属于生物活性肽的是（）AGSHB核蛋白C血浆蛋白质D脂肪E血红素一级结构二级结构三级结构四级结构高级结构或空间构象第二节蛋白质的分子结构1.定义：

蛋白质的一级结构指多肽链中氨基酸的数目、排列顺序及共价连接。一、蛋白质的一级结构2.主要的化学键

：肽键，有些蛋白质还包括二硫键。(一)定义与主要化学键牛胰岛素——第一个被测定的一级结构二、蛋白质的二级结构定义

蛋白质分子中某一段肽链的局部空间结构，即该段肽链主链骨架原子的相对空间位置，并不涉及氨基酸残基侧链的构象。

(一)定义与主要化学键肽单元(肽键平面)参与肽键的6个原子C1、C、O、N、H、C2位于同一平面，C1和C2在平面上所处的位置为反式构型，此同一平面上的6个原子构成了所谓的肽单元

。CR1HCR2HONHC0.123nm0.100nm0.132nm0.147nm0.153nm0.360nm肽键平面示意图

肽键的键长为0.132nm，短于单键的0.147nm，长于双键的0.123nm，故具有部分双键的特性，不能旋转。肽链主链骨架原子由－N－Ca－CO－序列重复排列而成

(二)蛋白质二级结构的主要形式

-螺旋(-helix)

-折叠(-pleatedsheet)

-转角(-turn)

无规卷曲(randomcoil)

稳定这些结构主要的化学键：氢键

1.

-螺旋

1951年根据X线衍射图提出。肽键平面为单位以碳原子为转折点，形成右手螺旋。左手和右手螺旋NC-螺旋特点：(1)螺旋每圈含3.6个氨基酸残基，残基跨距0.15nm，螺距0.54nm。(2)螺旋以氢键保持稳固。(3)各氨基酸残基的R基团均伸向螺旋外侧。0.15nm

在β-折叠结构中，多肽链充分伸展，每个肽单元以α-C原子为转折点，依次折叠成锯齿状结构，氨基酸残基侧链交替的位于锯齿状结构的上下方。2.-折叠（-片层）

-折叠特点

(1)是多肽链一种比较伸展、成锯齿状的肽链结构。(2)β-折叠是由两条以上肽链或一条肽链内的若干个肽段平行排列而成。(3)由氢键维持稳定,其方向与折叠的长轴接近垂直。(4)侧链Ｒ基团交错地分布在片层平面的两侧。3.-转角是没有确定规律性的那部分肽链结构。4.无规卷曲肽链出现180°回折的部分形成β-转角。第二个残基

常为Pro

(二)蛋白质二级结构的主要形式

-螺旋(-helix)

-折叠(-pleatedsheet)

-转角(-turn)

无规卷曲(randomcoil)

稳定这些结构主要的化学键：氢键

5.模体（motif）在许多蛋白质分子中，可发现两个或三个具有二级结构的肽段，在空间上相互接近，彼此相互作用，形成一个特殊的空间构象，即二级结构聚集体。一个模体总有其特征性的氨基酸序列，并发挥特殊的功能。

蛋白质是生物大分子，分子量硕大。通常一个蛋白质分子可含有多种二级结构或多个同种的二级结构。三、蛋白质的三级结构整条肽链中全部氨基酸残基的相对空间位置，即肽链中所有原子在三维空间的排布位置。只有具有三级结构的多肽链才能称为蛋白质。(一)定义与主要化学键三、蛋白质的三级结构疏水键（主要）、盐键、氢键和范德华力等。维持三级结构稳定主要的化学键(一)定义与主要化学键H2NH3N+NbHCOO-OaCCCOOHSSHOHOCH2OaaCHCH3CHCH3CH3CH2CH3CH3CH3cccOOCcCH2OHCH2OHbNH2+H2NCOCO-abc氢键离子键疏水键维持蛋白质分子构象的各种化学键肌红蛋白(Mb)

（二）结构域(domain)对分子量较大的三级结构，通常它可分隔为两个和数个球状或纤维状的区域，折叠得较为紧密，各行其功能，称为结构域。结构域也可由蛋白质分子中不连续的肽段在空间结构中相互接近而构成。磷酸甘油酸激酶

DNA聚合酶3-磷酸甘油醛脱氢酶激酶

NAD+

(三)分子伴侣

1.分子伴侣是一类可识别肽链非天然构象，促进各功能域和整体蛋白质折叠的保守蛋白质。

3.已发现分子伴侣具有形成二硫键的酶活性，在蛋白质分子折叠过程中对二硫键正确形成起到重要的作用。

2.分子伴侣能可逆地与未折叠肽段结合，防止错误的聚集发生，使肽链正确折叠.四、蛋白质的四级结构定义：两个或两个以上独立三级结构的多肽链通过次级键结合而形成的空间结构氢键、盐键、疏水键亚基每条具有完整三级结构的多肽链，称为亚基。四级结构定义与主要化学键

血红蛋白是由含有血红素的2个α亚基和2个β亚基组成的四聚体。血红蛋白的四级结构胰岛素是四级结构吗？总结蛋白质分子结构一级结构二级结构三级结构四级结构定义pr分子中从N到C端的氨基酸排列顺序Pr分子中主链原子局部空间排列整条肽链中所有原子的空间排列Pr分子中各亚基间的空间排布表现形式肽键α-螺旋β-折叠β-转角无规卷曲结构域分子伴侣亚基维系键肽键（主要）二硫键（次要）氢键疏水键（主要）盐键氢键范德华力氢键离子键（盐键）疏水键意义决定pr空间结构，但不是决定空间构象的唯一因素是由一级结构决定的。分子量较大的pr常形成结构域单独的亚基一般没有生物学功能习题关于蛋白质二级结构叙述正确的是（）A氨基酸的排列B氨基酸侧链的空间构象C主链局部的空间构象D亚基间相对的空间位置E每一个原子的相对空间位置习题维持蛋白质一级结构的化学键是（）Ａ盐键Ｂ肽键Ｃ疏水键Ｄ氢键Ｅ酯键蛋白质的基本结构是（）A一级结构B二级结构C三级结构D四级结构E单个亚基结构不属于蛋白质二级结构的是（）Aα-螺旋Ｂβ-螺旋Ｃβ-折叠Ｄβ-转角Ｅ无规卷曲五蛋白质结构与功能的关系一级结构是空间构象的基础空间结构决定生物学功能

(1)将A链N端的第1个氨基酸残基切去，其活性只剩2％～10％，再将第2～4位氨基酸残基切去，其活性完全丧失。

(2)

将A、B两链间的二硫键还原，A、B两链即分离，胰岛素的功能完全消失。*胰岛素一级结构与功能的关系*血红蛋白一级结构与功能的关系镰刀形红细胞贫血N-val·his·leu·thr·pro·glu·glu·····C(146)患者Hbβ肽链正常人Hbβ肽链N-val·his·leu·thr·pro·val

·glu·····C(146)这种由蛋白质分子发生变异所导致的疾病，称为分子病蛋白质构象病：

若蛋白质的折叠发生错误，尽管其一级结构不变，但蛋白质的构象发生改变，仍可影响其功能，严重时会导致疾病发生。病例：人纹状体脊髓变性病、老年痴呆症、亨廷顿舞蹈病、疯牛病等。2．蛋白质构象病例：疯牛病中的蛋白质构象改变疯牛病是由朊病毒蛋白(prionprotein,PrP)引起的一组人和动物神经退行性病变。正常PrP富含α-螺旋，称为PrPc。在某种未知蛋白质作用下转变成为β-折叠的PrPsc，从而致病。第三节蛋白质的理化性质一、蛋白质的两性解离和等电点(一)两性解离

蛋白质分子除两端的氨基和羧基可解离外，氨基酸残基侧链中某些基团，在一定的溶液pH条件下都可解离成带负电荷或正电荷的基团，故称两性解离。中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

3.酸性氨基酸(2种)天冬氨酸asparticacidAspD2.97精氨酸arginineArgR10.76组氨酸histidineHisH7.59

HOOC-CH2CHCOOHNH2谷氨酸glutamicacidGluE3.22CHCOOHNH2

HOOC-CH2-CH24.碱性氨基酸(3种)中文名称英文名称缩写符号结构式等电点

赖氨酸lysineLysK9.74NH2CH2CH2CH2CH2CHCOOHNH2CHCOOHNH2NH2-CNHCH2CH2CH2NHCHCOOHNH2HCCH2NHCNCH当蛋白质溶液处于某一pH时，蛋白质解离成正、负离子的趋势相等，即成为兼性离子，净电荷为零，此时溶液的pH称为蛋白质的等电点。(二)蛋白质的等电点＋－蛋白质电泳二、蛋白质的胶体性质(二)蛋白质胶体稳定的因素颗粒表面同种电荷水化膜(一)蛋白质属于生物大分子之一，分子量可自1万至100万之巨，其分子的直径可达1～100nm，为胶粒范围之内。血液透析+++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质在等电点的蛋白质水化膜++++++++带正电荷的蛋白质－－－－－－－－带负电荷的蛋白质不稳定的蛋白质颗粒酸碱酸碱酸碱脱水作用脱水作用脱水作用溶液中蛋白质的沉淀三、蛋白质的变性、沉淀和凝固在某些物理和化学因素作用下，其特定的空间构象被破坏，也即有序的空间结构变成无序的空间结构，从而导致其理化性质改变和生物活性的丧失。变性的本质即破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质一级结构中的肽键（氨基酸序列）。(一)

蛋白质的变性导致变性的因素如高温、高压、强酸、强碱、有机溶剂、重金属离子、生物碱试剂及辐射等因素。

应用举例①临床医学上，变性因素常被应用来消毒及灭菌。②防止蛋白质变性也是有效保存蛋白质制剂（如疫苗等）的必要条件。

(二)蛋白质沉淀在一定条件下，蛋白疏水侧链暴露在外，肽链融会相互缠绕继而聚集，因而从溶液中析出。蛋白质的沉淀方法1.

盐析法2.

有机溶剂法乙醇、甲醇和丙酮等硫酸铵、硫酸钠、亚硫酸钠和氯化钠等中性盐3.

生物碱试剂苦味酸、钨酸、鞣酸、三氯乙酸等4.

重金属盐类不变性汞、铅、铜、银等检测尿蛋白重金属盐中毒(三)蛋白质的凝固作用蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块，此凝块不易再溶于强酸或强碱中。

变性凝固沉淀一定不一定辨析沉淀：Pr分子聚集从溶液析出，本质是水化膜和去除颗粒表面电荷。不一定变性。变性：空间构象改变，失活。本质是破坏非共价键和二硫键，不改变蛋白质一级结构中的肽键（氨基酸序列）。容易沉淀。凝固：变性后的Pr再经过加热。本质是蛋白质变性后进一步发展的不可逆结果。一定变性。四、蛋白质的紫外吸收由于蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸和色氨酸，因此在280nm波长处有特征性吸收峰。蛋白质的OD280与其浓度呈正比关系，因此可作蛋白质定量测定。五、蛋白质的呈色反应(一)茚三酮反应(ninhydrinreaction)蛋白质经水解后产生的氨基酸也可发生茚三酮反应。(二)双缩脲反应(biuretreaction)蛋白质和多肽分子中肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热，呈现紫色或红色，此反应称为双缩脲反应，双缩脲反应可用来检测蛋白质水解程度。习题蛋白质变性时，不受影响的结构是（）Ａ一级结构Ｂ二级结构Ｃ三级结构Ｄ四级结构Ｅ单个亚基结构蛋白质变性时（）Ａ一级结构破坏Ｂ二级结构破坏Ｃ三级结构破坏Ｄ四级结构破坏Ｅ空间结构破坏习题在下列沉淀蛋白质的方法中蛋白质不变性的是（）Ａ盐析Ｂ有机溶剂沉淀Ｃ重金属盐沉淀Ｄ生物碱试剂沉淀Ｅ加热凝固第四节蛋白质的分类(一)根据蛋白质组成成分1.单纯蛋白质2.结合蛋白质=蛋白质部分+非蛋白质部分(二)根据蛋白质形状1.纤维状蛋白质2.球状蛋白质习题下列属于单纯蛋白质的是（）A清蛋白B血红蛋白C核蛋白D脂蛋白E糖蛋白第五节血浆蛋白质几个概念血液病血浆和血清非蛋白氮（NPN）尿素氮（BUN）非蛋白氮（NPN）非蛋白含氮化合物，主要有尿酸、尿素、氨、肌酸、肌酐、胆红素等，其中所含的氮称为非蛋白氮（non-proteinnitrogen，NPN）。尿素氮（bloodureanitrogen，BUN）约占NPN的一半。血浆蛋白质种类已知的200多种。分类方法1按分离方法分：清蛋白、球蛋白2按来源分：抗体、补体、凝血酶原、血红蛋白，淀粉酶等。3按功能分：凝血纤溶系统Pr、载体Pr、免疫系统Pr、酶、酶抑制剂、激素、炎症应答蛋白等＋－蛋白质电泳清蛋白也称白蛋白由肝脏合成。正常人含量38~48g/L。白球比（A/G比）：1.5~2.5维持血浆胶体渗透压中起主要作用。清蛋白临床上血浆清蛋白含量降低的主要原因是：1合成原料不足（营养不良）2合成能力降低（严重肝病）3丢失过多（肾脏疾病、大面积烧伤）4分解过多（甲亢、发热）γ-球蛋白由浆细胞产生。主要是抗体，包括IgA、IgD，IgE，IgM和IgG。血清总蛋白含量的测定小于正常值的相关疾病：长期慢性发热、大面积烧伤（白细胞增多），

恶性肿瘤

、

肝癌（淋巴细胞和核细胞增多），肝功能严重受损、

肝坏死

、

肝硬化（谷丙转氨酶增多），甲状腺功能亢进、浆膜渗出性损害、

结核病

、

慢性腹泻

、

慢性肝炎

、

肾病综合征

、吸收不良综合征，

营养不良、贫血（红细胞，红蛋白稍偏低）等。大于正常值的相关疾病：大量出汗、

多发性骨髓瘤

、腹泻、

巨球蛋白血症

、严重呕吐、中毒等。血浆蛋白质的特点糖蛋白（清蛋白、CRP除外）分泌型蛋白质合成部位：肝脏（γ-球蛋白例外）半衰期多态性：血型物质急性时相蛋白（APP）：C-反应蛋白清蛋白功能血浆蛋白质抗蛋白酶抗凝乳蛋白酶、α1-抗胰蛋白酶、α2-巨球蛋白、抗凝血酶血液凝固各种凝血因子、纤维蛋白原酶血液中功能酶：如凝血因子、胆碱酯酶组织细胞漏出的酶：如转氨酶、淀粉酶激素红细胞生成素免疫功能γ-免疫球蛋白、补体蛋白、β2-微球蛋白参与炎症反应急性时相反应蛋白：如C反应蛋白、α1-酸性糖蛋白（血清类黏蛋白）肿瘤胚胎性蛋白α1甲胎蛋白（AFP）转运或结合蛋白清蛋白——结合、运输胆红素、非酯化脂肪酸、离子（Ca2＋），金属离子（Cu2＋、Zn2＋）、正铁血红素、类固醇激素和各种药物分子血浆铜蓝蛋白——含有Cu2＋（但Cu2＋转运可能主要依赖清蛋白）皮质类固醇结合球蛋白（运皮质激素蛋白）——结合皮质醇结合珠蛋白——结合细胞外的血红蛋白脂蛋白（乳糜微粒、VLDL、LDL、HDL）——运输甘油三酯、胆固醇、磷脂等血红素结合蛋白——结合血红素视黄醇结合蛋白——结合视黄醇性激素结合球蛋白——结合睾酮、雌二醇甲状腺素结合球蛋白——结合T3、T4运铁蛋白——运输铁甲状腺素运载蛋白——结合T4并与视黄醇结合蛋白形成复合物习题血液中NPN的主要成分是()A尿素B尿酸C肌酸D胺E氨基酸女，中年，有肝炎史，血清A/G倒置，因为（）A肝合成清蛋白减少B清蛋白水解增多C清蛋白从尿中排出Dγ-球蛋白合成增多Eγ-球蛋白破坏减少习题肝脏合成最多的血浆蛋白是（）Aα-球蛋白Bβ-球蛋白C白蛋白D纤维蛋白原E凝血酶原习题肝受损时,血中蛋白质的主要改变是（）A白蛋白含量升高B球蛋白含量下降C白蛋白含量升高,球蛋白含量下降D白蛋白含量下降,球蛋白含量升高或相对升高E.白蛋白和球蛋白含量都正常习题正常人的血浆白蛋白／球蛋白比值是（）A1.3～1.4B0.8～1.0C1.2～1.6D1.8～2.0E1.5～2.5

习题肝功能严重障碍导致出现水肿，主要是由于下列哪种物质合成减少所致（）A白蛋白Bα1-球蛋白Cα2-球蛋白Dβ-球蛋白Eγ-球蛋白小结蛋白质的元素组成蛋白质的含氮量蛋白质基本组成单位蛋白质的基本结构和空间结构蛋白质的理化性质血浆蛋白质蛋白质的分类1.蛋白质平均含氮量为16%，每克氮相当于6.25克蛋白质；基本组成单位是氨基酸：20种、L–α–氨基酸；2.分子结构含一级结构和空间结构（二级、三级和四级结构）；3.氨基酸间通过肽键相连成肽；多肽链中氨基残基的排列顺序为蛋白质一级结构；主键为肽键；小结4.多肽链局部空间构象称蛋白质二级结构，主要有α－螺旋、β－折叠、β－转角及无规卷曲；主键是氢键；5.多肽链全部原子的空间排布为三级结构；亚基间所形成的空间结构为四级结构；次级键是维系三级、四级结构作用力；小结6.一级结构是空间结构的基础；空间结构决定其生物学功能；蛋白质空间结构改变可引起蛋白质变性。7.氨基酸和蛋白质都是两性电解质；当溶液的pH等于其pI时呈兼性离子；蛋白质胶体溶液稳定因素：同种电荷和水化膜。小结练习题1.蛋白质的空间结构破坏时，下列哪一化学键不发生改变？()A二硫键B离子键C疏水键D氢键E肽键2.蛋白质吸收紫外光能力的大小，主要取决于()A含硫氨基酸的含量B肽键中的肽键C碱性氨基酸的含量D芳香族氨基酸的含量E脂肪族氨基酸的含量3变性蛋白质的主要特点是()A不易被蛋白酶水解B分子量降低C溶解度增加D生物活性丧失E共价键被破坏4.蛋白质二级结构是指分子中()A氨基酸的排列顺序B每一氨基酸侧链的空间构象C.局部主链的空间构象D.亚基间相对的空间位置E.每一原子的相对空间位置练习题5.组成人体蛋白质的基本单位是()AD、L-α-氨基酸BD-α-氨基酸CD-β-氨基酸DL-α-氨基酸6下列关于肽键性质和组成的叙述正确的是()A由CO和C-COOH组成B由Cα1和Cα2组成C由Cα和N组成D肽键有一定程度双键性质E肽键可以自由旋转7.电泳分离蛋白质的依据是()A蛋白质紫外吸收的最大波长280nmB蛋白质是两性电解质C蛋白质分子大小不同D蛋白质多肽链中氨基酸是借肽键相连E蛋白质溶液为亲水胶体练习题8.以醋酸纤维素薄膜为支持物进行血清蛋白电泳，使用PH8.6巴比妥缓冲液，各种蛋白质的荷电状态是()A.清蛋白和球蛋白都带负电荷B.清蛋白带负电荷，球蛋白带正电荷C.清蛋白和α1--球蛋白带负电荷，其他蛋白带正电荷D.清蛋白、α1、α2--球蛋白带负电荷人，其他蛋白带正电荷E.清蛋白和球蛋白都带正电荷9.下列哪一项不是蛋白质二级结构的形式()Aα-右手螺旋Bβ-折叠Cβ-转角Dα-双股螺旋E无规则卷曲练习题10.测得某样品的含氮量为8g/L，则该样品蛋白质的浓度约为()A40g/LB45g/LC50g/LD57.5g/LE62.5g/L11.同时破坏蛋白质表面的电荷和水化膜而使蛋白质沉淀的常用试剂是()A乙醇B丙酮C鞣酸D硫酸铵E醋酸铅12.蛋白质的一级结构指()Aα螺旋结构Bβ片层结构C分子中氢键D分子的二硫键E氨基酸的排列顺序练习题14.关于蛋白质二级结构的叙述，错误的是()A涉及肽链主链骨架原子的相对空间B涉及肽链中氨基酸残基侧链的原子空间排列Cα-螺旋和β-折叠是其主要结构形式D折叠是以肽键平面(肽单元)为结构单位E不具有生物学功能15.蛋白质所形成的胶体颗粒，在下列哪种条件下不稳定()A．溶液pH值大于pIB．溶液pH值小于pIC．溶液pH值等于pID．溶液pH值等于7．4E．在水溶液中16.采用酒精、高温、紫外线的消毒方法是根据哪一原理？()A．蛋白质盐析B．蛋白质沉淀C．蛋白质变性D．蛋白质两性性质E．蛋白质的胶体性质练习题17.组成人体蛋白质的20种氨基酸，都是()AD-α-氨基酸BD-β-氨基酸CL-α-氨基酸DL-β-氨基酸ED-α-或L-α-氨基酸18.维系蛋白质分子一级结构的主要化学键是()A二硫键B离子键C疏水键D氢键E肽键19.在下列氨基酸中碱性氨基酸是()A丝氨酸B赖氨酸C谷氨酸D酪氨酸E苏氨酸20.蛋白质变性是由于()A蛋白质的一级结构的改变B蛋白质亚基的解聚C蛋白质空间构象的破坏D辅基的脱落E蛋白质水解21.血红蛋白的氧解离曲线是()A氢键、盐键、疏水键和二硫键