医院环境微生物监测

环境卫生学监测范围空气物体表面医护人员手灭菌后物品使用中的消毒剂及灭菌剂采样和检查原则

《医院消毒卫生标准》采样后应尽快对样品进行相应指标的检测送检时间不得超过4h若样品保存于0℃～4℃时送检时间不得超过24h采样和检查原则

《医院消毒卫生标准》不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查当流行病学调查怀疑医院感染事件与灭菌物品有关时，进行相应物品的无菌检查常规监督检查可不进行致病性微生物检测涉及疑似医院感染暴发、医院感染暴发调查或工作中怀疑微生物污染时应进行目标微生物的检测空气监测医院空气环境分类Ⅰ类环境：采用空气洁净技术的诊疗场所，分洁净手术部和其他洁净场所Ⅱ类环境：非洁净手术部（室）；产房；导管室；

血液病区、烧伤病区等保护性隔离区；重症监护病房；新生儿室等Ⅲ类环境：消毒供应中心的检查包装灭菌区和无菌物品存放区；母婴同室；

血液透析中心（室）；其他普通住院病区Ⅳ类环境：感染性疾病科门诊和病区；

普通门急诊及其检查、

治疗（注射、换药等）室

空气净化方法1通风2集中空调通风系统3空气洁净技术6静电吸附式空气消毒器4紫外线消毒5循环风紫外线空气消毒器7化学消毒法人员要求：着无菌的工作服、戴口罩、帽子操作前洗手或手卫生所带物品清洁后方可带入手臂及头部不可越过打开的培养皿上方行动及放置动作要轻尽量减少对空气流动状态的影响每次采样人员不得超过2人采样时间：

消毒后操作前2、未采用洁净技术净化空气的房间（Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ）消毒、通风换气后操作前1、采用洁净技术净化空气的房间（Ⅰ）洁净系统自净后操作前3、怀疑空气与医院感染暴发有关时空气消毒效果监测浮游菌法采用沉降法：

室内面积≤30m2，设内、中、外对角线三点，内、外点应距墙壁1m处；

室内面积＞

30m2，设四角及中央五点，四角的布点位置应距墙壁1m处。未采用洁净技术净化空气的房间的空气消毒效果监测

室内面积＞30m2。室内面积≤30m2

Ⅰ级手术室(手术区百级，周围千级）：手术台两侧边至少各外推0.9m

两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域Ⅱ级手术室(手术区千级，周围万级）：手术台两侧边至少各外推0.6m

两端至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域Ⅲ级手术室（手术区域万级，周围十万级）：手术台四边至少各外推0.4m后（包括手术台）的区域Ⅳ级手术室（三十万级）：不分手术区和周边区周边区：除去手术区以外的其他区域手术区：手术台及其周围的区域洁净手术室

空气消毒效果监测方法：将普通营养琼脂平皿（Φ9cm）放置各采样点，采样高度为距地面0.8m-1.5m；采样时将平皿盖打开，扣放于平板边延，暴露规定时间后盖上平皿盖及时送检。√手臂越过平皿×皿盖朝上×√空白对照采样时，必须有2次空白对照第1次对用于检测的培养皿或培养基条做对比试验每一批做一个对照皿第2次是在检测时，每区或每室1个对照皿对操作试验做对照试验模拟操作过程但培养皿或培养基条打开后又迅速封盖两次对照试验都必须为阴性整个操作过程都必须无菌操作暴露时间采用洁净技术净化空气的房间暴露30min未采用洁净技术净化空气的房间Ⅱ类环境暴露15min

Ⅲ、Ⅳ类环境暴露5min注意事项消毒前，关好门、窗；消毒机、空调停止至少10分钟方可采样。在无人走动的情况下，静止10分钟进行采样。放培养皿时从里到外，收培养皿时从外到里。平板收好后，在盖上注明“里、中、外”及科室，五点布点的标“东、南、西、北、中”等级手术室名称空气洁净度级别沉降法/浮游菌细菌最大平均浓度手术区周边区手术区周边区I特别洁净手术室百级千级0.2个/（30min·90皿）0.4个/（30min·90皿）5个/m310个/m3Ⅱ标准洁净手术室千级万级0.75个/（30min·90皿）1.5个/（30min·90皿）25个/m350个/m3Ⅲ一般洁净手术室万级十万级2个/（30min·90皿）4个/（30min·90皿）75个/m3150个/m3Ⅳ准洁净手术室三十万级5个/（30min·90皿）175个/m3结果判定:

Ⅰ类环境洁净手术部：要求符合GB50333要求结果判定:

Ⅱ类环境细菌菌落总数标准非洁净手术部（室）、产房、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房等空气中的细菌菌落总数≤4cfu/（15min·直径9cm）结果判定：

Ⅲ、Ⅳ类环境细菌菌落总数标准儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数≤4cfu/（5min·直径9cm）。实验室结果计算：平均暴露法按平均没皿的菌落数报告：

CFU/（皿·暴露时间）物体表面消毒效果监测物体表面消毒效果监测采样时间在消毒处理后或怀疑与医院感染暴发有关时进行采样。物体表面消毒效果监测采样方法用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积被采表面＜100cm2，取全部表面被采面积≥100cm2，取100cm2打开试管，烧试管口与橡胶塞用棉签蘸取中和剂用5cm×5cm的灭菌标准规格板，放在被检物体表面在规格板内横竖往返均匀涂擦各5次5cm横竖往返各五次剪除、掰断或烧断手接触前部分烧试管口与橡胶塞物体表面的消毒效果监测注意事项

1、根据物品表面是否规则选用规格板或直接涂擦的方法进行采样。2、严格注意无菌操作，采样前采样者洗手戴帽子口罩。3、强调采样前物品表面，已经作过消毒处理。4、用棉签蘸取含相应中和剂的无菌洗脱液时，注意不要将手指伸入试管中。（可适当倾斜试管）物体表面的消毒效果监测注意事项5、避免采样时跨越采样区域，避免采样过程中污染。6、一只棉签连续采样4个。7、强调用充分浸湿棉签，在规格板内横竖往返涂擦各5次。8、采样过程中要转动棉签。9、剪断或烧断手接触的棉签。物体表面消毒效果监测结果判定洁净手术部、非洁净手术部（室）、、产房、新生儿室、烧伤病房、重症监护病房等；物体表面细菌菌落总数≤5cfu/cm2

儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等；物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2小型物体表面的结果计算，用cfu/件表示物体表面菌落总数（

CFU/cm2）实验室结果计算：医护人员手消毒效果监测医护人员手消毒效果监测采样时间

采取手卫生后，在接触患者、进行诊疗活动前采样。医护人员手消毒效果监测采样方法

被检者五指并拢，用浸有含相应中和剂的无菌洗脱液浸湿的棉拭子在双手指曲面从指端到指根再到指端为往返1次，共往返涂擦2次，一只手涂擦面积约30cm2，涂擦过程中同时转动棉拭子将棉拭子接触操作者的部分剪去，投入10ml含相应中和剂的无菌洗脱液试管内，及时送检医护人员手消毒效果监测医务人员手消毒效果监测注意事项1、对双手的指曲面进行采样。2、强调用充分浸湿棉签，在双手的指曲面从指根到指端往返涂擦2次。采样过程中要转动棉签。3、剪断或烧断手接触的棉签。卫生手清毒监测的细菌菌落总数应≤10cfu/㎝2外科手消毒监测的细菌菌落总数应≤5cfu/㎝2

不能检出致病性微生物手的消毒效果监测医务人员手菌落总数（CFU/cm²）实验室结果计算使用中的消毒剂及灭菌剂监测使用中的消毒剂及灭菌剂监测

采样时间：开瓶后使用中的消毒、灭菌剂。采样方法：用无菌注射器按无菌操作方法吸取1.0mL被检消毒液，加入9mL中和剂中混匀使用中的消毒剂及灭菌剂监测监测频率：皮肤黏膜消毒液、消毒剂每季度监测一次灭菌剂每月监测一次（如戊二醛）结果判断：使用中灭菌剂：无菌生长使用中皮肤黏膜消毒液染菌量≤10cfu/ml其他使用中消毒液染菌量≤100cfu/ml注意事项：采样后及进送检实验室结果计算：消毒液染菌数（CFU/mL）

=平均每皿菌落数×10×稀释倍数消毒、灭菌后物品监测消毒、灭菌后物品监测采样时间在消毒或灭菌处理后，存放有效期内采样灭菌后物品监测可用破坏性方法取样的，如一次性输液（血）器、注射器和注射针等参照《中华人民共和国药典》《无菌检查法》进行。对不能用破坏性方法取样的医疗器材，应在100级洁净实验室，用浸有无菌生理盐水采样液的棉拭子在被检物体表面涂抹采样，被采表面＜100cm2，取全部表面；被采表面≥100cm2，取100cm2；然后将采样棉拭子进行无菌检查。牙科手机采样：应在100级洁净实验室将每支手机分别置20-25mL采样液的无菌大试管（内径25mm）中，液面高度为4.5cm，于旋涡混合器上洗涤震荡30s，取洗脱液进行无菌检查。清洁用品的消毒效果监测（新增）

清洁用品的消毒效果监测（新增）采样时间：消毒后、使用前进行采样

采样方法：布巾、地巾等物品可用无菌的方法剪取1cm×3cm，直接投入5ml含相应中和剂的无菌生理盐水中，及时送检。每季度一次。结果判定：未检出致病菌为消毒合格中和剂在微生物杀灭实验中，用以消除试验微生物与消毒剂的混悬液中和微生物表面上残留的消毒剂，使其失去对微生物的抑制和杀灭作用的试剂本身对菌无影响确能去除杀菌因子生成物对菌无影响临床采样用试管内相应中和剂及含量注：配制各种中和剂除物表、手表监测中和剂外，其余均使用磷酸钠盐缓冲液（PBS）为基础溶剂。PBS：吐温-801g，蛋白胨10g，氯化钠8.5g，蒸馏水1000ml。消毒剂相应中和剂浓度（%）物表、手生理盐水含氯消毒剂硫代硫酸钠0.2—1.0复合含氯消毒剂硫代硫酸钠+吐温