埃博拉出血热采样及标本运送课件

埃博拉出血热的采样与防护一、基本情况潜伏期2-21天,一般为5-12天。传播途径：接触传播、气溶胶传播。临床表现：突然发病，各器官出血，肌肉疼痛，DIC（弥散性血管内凝血）等90%的死亡患者在发病后12天内死亡(7-14天)。病死率高，可达50%-90%。尚无特效药和疫苗。埃博拉出血热是最严重的出血热一、基本情况型别⑴扎伊尔型（Ebola-Zaïre）：毒力强，人感染后病死率高。⑵苏丹型（Ebola-Sudan）：⑶科特迪瓦（Ebola-Côted’Ivoire）：对黑猩猩有致死性,对人的毒力较弱。⑷雷斯顿型（Ebola-Reston）：在非人灵长类中有致死性,人感染不发病。抵抗力

埃博拉病毒在室温下稳定，60℃1小时大部分病毒被灭活,对紫外线、γ射线、甲醛、次氯酸、酚类等消毒剂和脂溶剂均敏感。二、临床表现及诊断1、流行病学：来自疫区，或3周内有疫区旅行史，或与患者、感染动物接触。2、临床表现：急性起病，发热伴极度乏力、牙龈出血、鼻出血、黏膜出血、瘀点和紫斑、血便等及其他症状（头痛、肌痛、咽痛、恶心、呕吐)。3、实验室检测：

（1）病毒抗原阳性（2）血清特异性IgM抗体阳性（3）恢复期血清IgG比急性期有4倍升高（4）核酸阳性（5）分离到埃博拉病毒疑似病例：1+2确诊病例：疑似病例+3中任一检测阳性三、标本采集-生物安全防护1、所有样本的采集或处理应遵守《医院感染管理规范》和《病原微生物实验室生物安全管理条例》等相关生物安全规定，在标准预防的基础上采用飞沫和接触隔离的预防措施。2、样本采集时，应严格按照BSL-3级实验室规定做好个人防护。应穿戴医用防护服、可遮盖口鼻的医用防护口罩(N95)、双层乳胶手套、护目镜、头部面部保护罩、专用橡胶靴等。四、标本采集与保存1、标本采集时间初次送检：目前检测方法中主要是核酸检测，埃博拉出血热患者发病后3天内的血标本，病毒核酸阳性的可能性很小，因此建议采集发病72小时后的血标本送检。再次送检：如果留观/疑似病例发病72小时后血标本实验室检测阴性，但临床表现比较典型的患者，可在初次检测24-48小时后再次采集血标本送检。解除隔离治疗送检：确诊病例解除隔离治疗前采集血标本进行复检。四、标本采集与保存

2、标本采集方法⑴.用分离胶无菌真空促凝管采集静脉血，每管3mL，标记后4℃保存。并填写标本采集登记表（附表1）⑵.

标本采集数量留观病例、疑似病例采集4管，其中2管送省疾控中心进行埃博拉病毒检测，2管保存于本单位，待排除埃博拉病毒感染后用于其他病原体的筛查；

确诊病例采集恢复期血标本，送国家疾控中心病毒病所进行检测。四、标本采集与保存3、标本保存方法

⑴.

未分离血清的全血标本应4℃保存，并尽快分离血清；⑵.血清标本长期保存应置于-70℃以下；⑶.标本保存不超过1周可置-20℃。

4、标本信息收集（填写埃博拉出血热流行病学个案调查表）病例一般信息：姓名、性别、年龄、国籍来自疫区国名、入境时间，发病日期，发病前21天的疫区居住史，旅行史、类似病例接触史等。主要临床症状：发热、严重乏力、头痛、肌痛、呕吐、腹泻、出血表现等标本详细信息：采样时间、种类、标本量等。送样信息：负责送检的联系人姓名、联系电话、送检时间等标本容器第一层2mL,可离心有垫圈第二层15mL,封口膜封口易标记五、标本包装与运输1、包装方式：A类包装（UN2814要求）按照三重包装系统包装：第一层包装（可密封样本袋、50mL离心管）；第二层安全壳容器（防水、防漏）；第三层外层运输包装。样本袋放入防水防漏的第二层安全壳容器中，为降低破碎或泄漏的风险，用吸水纸等填充物固定标本袋。安全壳容器和外包装放冰袋。五、标本包装与运输2、运输方式：全血采用冷藏运输，血清可采用冷冻运输不要打开采集管或分装样本。专人专车。六、实验室检测1、病原学检测：⑴核酸检测：主要检测方法。发病后3天内，血标本中埃博拉病毒核酸检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒感染。发病后3～10天血标本病毒核酸检出率高，检测阴性可排除埃博拉病毒感染。⑵病毒抗原检测：用酶联免疫法检测埃博拉病毒核蛋白抗原。病毒抗原检测阳性可确诊。发病后3天内，血标本中埃博拉病毒抗原检出率低，检测阴性不能排除埃博拉病毒感染，发病后3～10天血标本病毒抗原检出率高。六、实验室检测2.血清学检测：⑴血清特异性IgM抗体：采用捕获法ELISA方法检测。IgM抗体阳性可确诊。⑵血清特异性IgG抗体：目前采用间接法ELISA检测IgG抗体。单份血清埃博拉病毒IgG抗体阳性提示曾感染埃博拉病毒，双份血清埃博拉病毒IgG抗体阳转或恢复期滴度较急性期4倍或者以