甲硝唑片含量测定

任务三甲硝唑片含量测定示例：甲硝唑片含量测定【含量测定】照高效液相色谱法（附录ⅤD）测定。色谱条件与系统适应性试验用十八烷基键合硅胶为填充剂，以甲醇-水（20：80）为流动相对而言检测波长为320nm，理论板数按甲硝唑峰不低于2000。测定法取本品20片，精密称定，研细，精密称取适宜重量（约相当于甲硝唑0.25g），置20ml量瓶中，加20%甲醇适量，振摇使甲硝唑溶解，用20%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl,注入液相色谱仪，记录色谱图，另取甲硝唑对照品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.25mg的溶液，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。（1）糖类：

干扰:氧化还原滴定

赋形剂中含有淀粉、糊精、蔗糖、乳糖等，它们水解后均生成葡萄糖，葡萄糖为醛糖，具有还原性，干扰氧化还原法，因此，采用氧化还原法测定药物时，应考虑到其干扰。

5、片剂中辅料的干扰及其排除

排除改用氧化电位稍低的氧化剂硫酸铈不能氧化葡萄糖，故消除干扰。

（2）硫酸钙和碳酸钙的干扰及排除：Ca2+能与EDTA发生配位反应，故对配位滴定法有干扰。一般可加入掩蔽剂、或分离除去或采用其他方法进行测定。

（3）硬脂酸镁：

（A）对配位滴定法的干扰与排除：

Mg2+干扰配位法，使测定结果偏高，选用合适的指示剂或掩蔽剂可排除其干扰。（B）对非水滴定法的干扰：

硬脂酸镁消耗高氯酸滴定液，使测定结果偏高。

一般排除的方法有：提取分离法

碱化后提取分离法

加入无水草酸的醋酐溶液法

水蒸气蒸出后滴定法。

（4）滑石粉等滑石粉、淀粉、磷酸氢钙、硫酸钙等1过滤法水溶性药物2提取分离法5、片剂的含量测定及结果计算

6、片剂的含量测定及结果计算

片剂含量测定结果的计算

（1）容量分析法

（A）直接滴定法（B）剩余滴定法

（2）紫外分光光度法（A）吸收系数法（B）对照法

任务三：其它片剂检验任务一阿司匹林片的质量检测任务二对乙酰氨基酚片的质量检测任务三异烟肼片的质量检测任务四硫酸阿托品片的质量检测任务一阿司匹林片的质量检测

结构与性质鉴别杂质检查含量测定结构与性质1、阿司匹林片的质量检测（1）阿司匹林为白色结晶或结晶性粉末；无臭或微带醋酸臭，味微酸；遇湿气即缓缓水解；在乙醇中易溶，在氯仿或乙醚中溶解，在水或无水乙醚中微溶，在氢氧化钠溶液或碳酸纳溶液中溶解，但同时分解。

阿司匹林片为白色片；遇湿气易变质。（2）显酸性（3）三氯化铁反应（4）重氮化-偶合反应（5）水解性鉴别（阿司匹林片）（1）取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.1g），加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1滴，即显紫堇色（中国药典2005版）。阿司匹林水解成水杨酸，在中性或弱酸性条件下，与FeCl3生成紫堇色配位化合物鉴别（阿司匹林片）（2）取本品的细粉适量（约相当于阿司匹林0.5g），加碳酸钠试液10ml，振摇后，放置5分钟，滤过，滤液煮沸2分钟，放冷，加过量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并发生醋酸的臭气（中国药典2005版）。杂质检查（阿司匹林ASA）（1）溶液的澄清度：主要检查Na2CO3中不溶物，有苯酚、醋酸苯酯、水杨酸苯酯、乙酰水杨酸苯酯；阿司匹林溶解，因此阿司匹林溶液应澄清。（2）游离水杨酸（SA）检查：利用SA可与FeCl3呈色，用比色法检查。（3）易炭化物检查：主要检查ASA中能被硫酸炭化显色的低分子有机杂质。采用与标准比色液比色的方法检查。（4）炽灼残渣：不得过0.1%（附录ⅧN）。（5）重金属：取本品1.0g，加乙醇23ml溶解后，加醋酸盐缓冲液（pH3.5）2ml，依法检查（附录ⅧH第一法），含重金属不得过百万分之十。杂质检查（阿司匹林片）游离水杨酸中国药典2005版

取本品的细粉适量（相当于阿司匹林0.1g），加无水氯仿3ml,不断搅拌2分钟，用无水氯仿湿润的滤纸滤过，滤渣用无水氯仿洗涤2次，每次1ml，合并滤液与洗液，在室温下通风挥发至干；残渣用无水乙醇4ml溶解后，移置100ml量瓶中，用少量5％乙醇洗涤容器，洗液并入量瓶中，加5％乙醇稀释至刻度，摇匀，分取50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液〔取盐酸溶液(9→100)1ml，加硫酸铁铵指示液2ml后，再加水适量使成100ml〕1ml，杂质检查（阿司匹林片）游离水杨酸摇匀，30秒钟内显色，与对照液（精密称取水杨酸0.1g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1ml，摇匀，再加水适量至刻度，摇匀，精密量取1.5ml，加无水乙醇2ml与5％乙醇使成50ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液1ml，摇匀）比较，不得更深(0.3％)。杂质检查（阿司匹林片）溶出度

取本品，照溶出度测定法（附录ⅩC第一法），以稀盐酸24ml加水至1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取溶液10ml滤过；精密量取续滤液3ml置50ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液5ml，置水浴中煮沸5分钟，放冷，加稀硫酸2.5ml，并加水稀释至刻度，摇匀。照分光光度法（附录ⅣA），在303nm的波长处测定吸收度，按C7H6O3的吸收系数（Ｅ1%1cm）为265计算，再乘以1.304，计算出每片的溶出量。限度为标示量的80％，应符合规定。中国药典2005版杂质检查（阿司匹林片）其他中国药典2010版应符合片剂项下有关的各项规定（附录ⅠB）。

（1）直接滴定法基于本类药物-COOH；可用碱直接滴定，如ASA的含量测定，其原理如下：原理：条件：在中性乙醇中，以酚酞作指示剂；摩尔比为1:1。应用：多国药典用于双水杨酯、苯甲酸、丙磺舒、布洛芬测定；USP和BP还用于甲芬那酸的测定。含量测定酸碱滴定法含量测定酸碱滴定法阿司匹林含量测定（中国药典2010版）

取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）滴定。每lml的氢氧化钠滴定液（0.1mo1/L）相当于18.02mg的C9H8O4。含量测定酸碱滴定法（2）水解后剩余滴定法

ASA片含量测定原理：条件：水溶液含量测定酸碱滴定法ASA片含量测定具体试验：I份NaOHVo-V相当于ASA消耗

硫酸的ml数I份NaOHVOVASA%=(Vo–V)×F×T/W×100%中国药典2010版含量测定酸碱滴定法取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。

ASA片含量测定中国药典2010版取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20ml，振摇使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3滴，滴加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)40ml，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液(0.05mol/L)滴定，并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于18.02mg的C9H8O4。

含量测定酸碱滴定法（3）两步滴定法

ASA片的含量测定ASA+NaOHASA-Na+H2O水解产物SA+NaOHSA-Na+H2O酸性稳定剂+NaOH中性盐第二步为水解与测定第一步为中和任务二对乙酰氨基酚片的质量检测

结构与性质鉴别杂质检查含量测定结构与性质2、对乙酰氨基酚片的质量检测对乙酰氨基酚（扑热息痛）（1）对乙酰氨基酚为白色结晶或结晶性粉末；无臭，味微苦；在热水或乙醇中易溶，在丙酮中溶解，在水中略溶。对乙酰氨基酚片为白色片或薄膜衣片。（2）水解后显芳香第一胺特性（3）水解后易酯化（4）三氯化铁反应（酚羟基的特性）对乙酰氨基酚片

取本品的细粉适量（约相当于对乙酰氨基酚0.5g），用乙醇20ml分次研磨使对乙酰氨基酚溶解，滤过，合并滤液，蒸干，残渣照对乙酰氨基酚项下的鉴别（1）、（2）项试验，显相同的反应（中国药典2005版）。

鉴别（1）本品的水溶液加三氯化铁试液，即显蓝紫色（中国药典2010版）。对乙酰氨基酚+FeCl3蓝紫色化合物鉴别（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2ml，振摇，即显红色（中国药典2010版）

。分子结构中含有芳伯氨基或潜在芳伯氨基的药物，均可发生此反应。Ar-NH2NaNO2HCl重氮盐-萘酚OH-橙黄~猩红色（2）取本品约0.1g，加稀盐酸5ml，置水浴中加热40分钟，放冷；取0.5ml，滴加亚硝酸钠试液5滴，摇匀，用水3ml稀释后，加碱性β-萘酚试液2ml，振摇，即显红色（中国药典2010版）

。杂质检查（对乙酰氨基酚）

酸度取本品0.10g，加水10ml使溶解，依法测定（附录ⅥH），pH值应为5.5～6.5。

乙醇溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加乙醇10ml溶解后，溶液应澄清，无色；如显浑浊，与1号浊度标准液(附录ⅨB)比较，不得更浓；如显色，与棕红色2号或橙红色2号标准比色液(附录ⅨA第一法)比较，不得更深。中国药典2010版杂质检查氯化物

取本品2.0g，加水100ml，加热溶解后，冷却，滤过，取滤液25ml，依法检查（附录ⅧA），与标准氯化钠溶液5.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.01％）。硫酸盐

取氯化物项下剩余的滤液25ml，依法检查（附录ⅧB），与标准硫酸钾溶液1.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.02％）。

杂质检查

有关物质

取本品的细粉1.0g，置具塞离心管或试管中，加乙醚5ml，立即密塞，振摇30分钟，离心或放置至澄清，取上清液作为供试品溶液；另取每1ml中含对氯苯乙酰胺1.0mg的乙醇溶液适量，用乙醚稀释成每lml中含50μg的溶液作为对照溶液。照薄层色谱法(附录ⅤB)试验，吸取供试品溶液200μl与对照溶液40μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上。以氯仿-丙酮-甲苯(13：5：2)为展开剂，展开后，晾于，置紫外光灯（254nm）下检视，供试品溶液如显杂质斑点，与对照溶液的主斑点比较不得更大，更深。杂质检查对氨基酚

取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置30分钟；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50μg用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005％）。杂质来源：中间体、水解产物反应原理：

杂质检查

干燥失重

取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过0.5％（附录ⅧL）。

炽灼残渣

不得过0.1％（附录ⅧN）。

重金属

取本品0.1g，加水20ml，置水浴中加热使溶解放冷，滤过，取滤液加醋酸盐缓冲液（PH3.5）2ml与水适量使成25ml，依法检查（附录ⅧH第一法），含重金属不得过百万分之十。杂质检查（对乙酰氨基酚片）

取本品，照溶出度测定法（附录ⅩC第一法），以稀盐酸24ml加水至1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液1ml，加0.04％氢氧化钠溶液稀释至50ml，摇匀，照分光光度法（附录ⅣA），在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数（Ｅ1％1cm）为715计算出每片的溶出量，限度为标示量的80％，应符合规定。

溶出度中国药典2010版杂质检查对乙酰基酚片溶出度测定（测定条件同上）1片＋稀HCl24ml+H2O1000ml精密量取5ml+0.4%NaOH10ml+H2O100mlλ257nm测定A。W×1／1000×5／100×100＝C（g/100ml)W(g)=200×C;C=A/715∴溶出度＝W／标示量×100％＞80％为合格杂质检查（对乙酰氨基酚片）其他中国药典2010版应符合片剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。

含量测定

（1）对乙酰基酚

在0.4%NaOH介质中；257nmD%＝［E1%1cm]样／［E1%1cm]标×100％；E1%1cm＝715

【含量测定】取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，置100ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照分光光度法(附录ⅣA)，在257nm的波长处测定吸收度，按C8H9NO2的吸收系数(E1%1cm)为715计算，即得。含量测定【含量测定】

取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于对乙酰氨基酚40mg），置250ml量瓶中，加0.4％氢氧化钠溶液50ml及水50ml，振摇15分钟，加水至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，照对乙酰氨基酚项下的方法，自“置100ml量瓶中”起，依法测定，即得。

（2）对乙酰基酚片任务三异烟肼片的质量检测

结构与性质鉴别杂质检查含量测定结构与性质3、异烟肼片的质量检测异烟肼吡啶（1）异烟肼为无色结晶或白色至类白色结晶性粉末；无臭，味微甜后苦；遇光渐变质；在水中易溶，在乙醇中微溶，在乙醚中极微溶解。本品的熔点（附录ⅥC）为170～173℃

异烟肼片为白色片。（2）弱碱性：吡啶环上的氮为碱性氮原子，吡啶环的pKb值为8.8（水中）。（3）还原性：异烟肼的吡啶环γ位上被具有还原性酰肼取代，可被氧化剂氧化，可与含羰基的化合物发生缩合反应。（4）吡啶环的特性缩合反应

异烟肼的酰肼基与芳醛缩合形成腙，其有固定的熔点，可用以鉴别（中国药典2010版）。

黄色结晶mp为228℃～231℃鉴别（异烟肼）鉴别（异烟肼）

（1）取本品约0.1g，加水5ml溶解后，加10%香草醛的乙醇溶液1ml，摇匀，微热，放冷，即析出黄色结晶；滤过，用稀乙醇重结晶，在105℃干燥后，依法测定（附录ⅥC），熔点为228～231℃，熔融同时分解（中国药典2010版）。还原反应异烟肼+AgNO3异烟酸银+N2+Ag(白色）银镜鉴别（异烟肼）鉴别（异烟肼）

（2）取本品约10mg，置试管中，加水2ml溶解后，加氨制硝酸银试液1ml，即发生气泡与黑色浑浊，并在试管壁上生成银镜（中国药典2010版）。（3）本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集166图）一致。鉴别（异烟肼片）取本品的细粉适量（约相当于异烟肼0.1g），加水10ml，振摇，滤过，滤液照异烟肼项下的鉴别（2）项试验，显相同的反应（中国药典2010版）。杂质检查（异烟肼）

酸度取本品0.10g，加水10ml使溶解，依法测定(附录ⅥH)，pH值应为6.0～8.0。

乙醇溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加水10ml溶解后，溶液应澄清无色；如显浑浊，与1号浊度标准液(附录ⅨB)比较，不得更浓；如显色，与同体积的对照液（比色用重铬酸钾液3.0ml与比色用硫酸铜液0.10ml，加水稀释至250ml)比较，不得更深。中国药典2010版杂质检查异烟肼中游离肼的检查

Ch.P中异烟肼及其注射,采用TLC法中杂质对照法。

对照品：硫酸肼0.20mg/ml（相当于游离肼50μg）薄层板：硅胶（用羧甲基纤维素钠溶液制备）展开剂：异丙醇-丙酮（3：2）显色剂：乙醇制对-二甲氨基苯甲醛试液检测结果：供试品主斑点前方，不得显黄色斑点

杂质来源:

原料引入、降解产生杂质检查

干燥失重

取本品，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过0.5％(附录ⅧL)。

炽灼残渣

取本品1.0g,依法检查(附录ⅧN)不得过0.1％。

重金属

取炽灼残渣项下遗留的残渣，依法检查(附录ⅧH第二法)，含重金属不得过百万分之十。杂质检查（异烟肼片）中国药典2010版溶出度

取本品，照溶出度测定法（附录ⅩC第一法），以水1000ml为溶剂，转速为每分钟100转，依法操作，经30分钟时，取溶液5ml滤过，精密量取续滤液适量，用水定量稀释制成每1ml中含10～20μg的溶液，照分光光度法（附录ⅣA），在263nm的波长处测定吸收度，按C6H7N3O的吸收系数（Ｅ1cm1%）为307计算出每片的溶出量，限度为标示量的60％，应符合规定。

其他应符合片剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。

含量测定溴酸钾法（氧化还原滴定法）中国药典（2010版）原料及制剂反应物质的量之比3：2

含量测定计算公式：含量测定异烟肼原料取本品约0.2g，精密称定，置100ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取25ml，加水50ml、盐酸20ml与甲基橙指示剂1滴，用溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)缓缓滴定(温度保持在18～25℃)至粉红色消失。

含量测定异烟肼片取本品20片，精密称定。研细，精密称取适量（约相当于异烟肼0.2g），置100ml量瓶中，加水适量，振摇使异烟肼溶解并稀释至刻度，摇匀，用干燥滤纸滤过，弃去初滤液；精密量取续滤液25ml，照异烟肼项下的方法，自“加水50ml、盐酸20ml”起，依法测定。每1ml的溴酸钾滴定液(0.01667mol/L)相当于3.429mg的C6H7N3O。

任务四硫酸阿托品片的质量检测

结构与性质鉴别杂质检查含量测定结构与性质4、硫酸阿托品片的质量检测

硫酸阿托品（1）硫酸阿托品为无色结晶或结晶性粉末；无臭;极易溶于水，在乙醇中易溶，在丙酮中微溶。

硫酸阿托品片为白色片。（2）水解性：分子结构中具有酯的结构，易水解，阿托品可以水解生成莨菪醇(Ⅰ)和莨菪酸(Ⅱ)。（3）碱性：阿托品和东莨菪碱的结构中，五元脂环上含有叔胺氮原子,具有较强的碱性，易与酸成盐。如阿托品的pKb1为4.35。（4）旋光性：阿托品结构中虽然也含有不对称碳原子，但因外消旋化而为消旋体，无旋光性。2、鉴别（硫酸阿托品）中国药典2010版

(1)本品显托烷生物碱类的鉴别反应（附录Ⅲ）。(2)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集487图）一致。(3)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。鉴别（硫酸阿托品）中国药典2010版

托烷生物碱一般鉴别试验鉴别（硫酸阿托品）中国药典2010版

本类药物具有碱性，可与生物碱沉淀剂生成沉淀。如：阿托品+氯化汞醇试液黄色沉淀东莨菪碱+氯化汞醇试液白色沉淀托烷生物碱一般鉴别试验鉴别（硫酸阿托品片）中国药典2010版

(1)取本品的细粉适量（约相当于硫酸阿托品1mg），置分液漏斗中，加氨试液约5ml，混匀，用乙醚10ml振摇提取后，分取乙醚层，置白瓷皿中，挥尽乙醚后，残渣显托烷生物碱类的鉴别反应（附录Ⅲ）。(2)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应（附录Ⅲ）。

杂质检查（硫酸阿托品）酸度取本品0.5g，加水10ml使溶解，加甲基红指示液1滴，如显红色，加氢氧化钠（0.02mol/L）0.15ml滴定液，应变为黄色。莨菪碱

取本品，按干燥品计算，加水制成每1ml中含50mg的溶液,依法测定（附录ⅥE），旋光度不得过－0.40°。中国药典2010版杂质检查其他生物碱

取本品0.25g，加盐酸溶液（9→1000）1ml溶解后，用水稀释成15ml，分取5ml，加氨试液2ml，振摇，不得立即发生浑浊。干燥失重

取本品，在120℃干燥3小时，减失重量不得过5.0％（附录ⅧL）。炽灼残渣

不得过0.1％（附录ⅧN）。杂质检查含量均匀度

取本品1片，置具塞试管中，精密加水6.0ml，密塞，充分振摇30分钟使阿托品溶解，离心，取上清液作为供试品溶液，照含量测定项下的方法测定含量，应符合规定（附录ⅩE）。其他

应符合片剂项下有关的各项规定（附录ⅠA）。

非水溶液滴定法（硫酸阿托品）(1)基本原理当HA酸性较强时，反应不能定量完成，必须除去或降低HA的酸性，使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐被置换出的弱酸因此，要根据不同情况采用相应测定条件。含量测定(2)一般方法供试品+冰醋酸10ml~30ml若供试品为氢卤酸盐再加5%醋酸汞的冰醋酸液3ml~5ml结果高氯酸滴定液滴定以空白试验校正非水溶液滴定法(3)问题讨论A.适用范围

主要用于Kb＜10-8的有机碱盐的含量测定。对碱性较弱的杂环类药物，只要选择合适的溶剂、滴定剂和终点指示的方法，可使pKb为8～13的弱碱性药物采用本法滴定。非水溶液滴定法一般来说：

Kb为10-8～10-10时，宜选冰醋酸作为溶剂；药物的Kb为10-10～10-12时，宜选冰醋酸与醋酐的混合溶液；

Kb＜10-12时，应用醋酐作为溶剂。

另外，在冰醋酸中加入不同量的甲酸，也能使滴定突跃显著增大，使一些碱性极弱的杂环类药物获得满意测定结果。非水溶液滴定法

B.酸根的影响：无机酸类，在醋酸介质中的酸性以下列排