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文档简介

軟骨缺損及關節炎改自網路生物醫學及材料研究雜誌2003,64A:273-281[人類間葉幹細胞於藻膠鹽內之軟骨分化]幹細胞以藻膠鹽水膠作包埋1.2%w/valginatesolutionCaCl2102mmol/l16#syringeCellsuspension2×106/ml10minsSphericalbeads無血清體外培養,生物因子添加SerumfreeDMEM-LGITS+Premix:insulin(6.25μg/ml),transferrin(6.25μg/ml),selenousacid(6.25ng/ml),linoleicacid(5.35μg/ml),bovineserumalbumin(1.25μg/ml)TGF-β1(10ng/ml)Dexamethasone(10-7M)Ascorbate2-phosphate(50μg/ml)水膠內人類間葉幹細胞的軟骨分化單層培養細胞聚集軟骨小窩水膠包埋裸鼠體內軟骨新生(8週)ChondrogenicinductionCartilage-likeconstructsUndifferentiatedtransplantFibrous-liketissue幹細胞及基因治療Adenoviral-orlentiviral-mediatedgenetransferintohMSC基因治療之模式1.直接2.以細胞為基礎基因治療之臨床試驗450個基因治療案件中40%以細胞為基礎其中30%以幹細胞來實施,初期置入報告基因來追蹤細胞癌症AIDS單一基因疾病例如先天性免疫缺乏症候群(SCID)以幹細胞為基礎之基因治療人類間葉幹細胞具多分化能,可作為多種組織之基因治療的靶細胞腺病毒載體短暫表現(約4週),高感染效率Lentiviral載體長期表現(大於6個月),高感染效率,可感染非分裂細胞人類間葉幹細胞之腺病毒載體感染效率及腺病毒載體受容體分布之探討腺病毒載體感染低血清條件培養2小時載體(報告基因:綠螢光)CMV-GFP:4x108PFU/ulPGK-GFP:2x108PFU/ul48小時後流式細胞儀分析倒立螢光顯微鏡鑑定未分化之間葉幹細胞進行骨分化之間葉幹細胞進行脂肪分化之間葉幹細胞進行神經分化之間葉幹細胞腺病毒載體感染效率(%)未分化之hMSC骨分化之hMSC脂肪分化之hMSC神經分化之hMSC91.7

6.610天/31.43天/44.35小時/5117天/13.810天/29.95天/5323天/59.317天/18.8被感染之hMSC仍有骨分化能被感

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