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文档简介

枯草芽孢杆菌的分离筛选微生物设计性实验第六组1实验目的2实验原理配方：牛肉膏1.0g蛋白胨2.0g氯化钠1.0g可溶性淀粉2.0g琼脂4.0g蒸馏水200ml调整PH值至7.23.1选择培养基本次实验进行产淀粉酶的枯草芽孢杆菌的筛选，所以应选淀粉培养基。配置时应先把淀粉用少量蒸馏水调成糊状，再加入到融化好的培养基中。

3实验材料3.2溶液或试剂牛肉膏蛋白胨氯化钠可溶性淀粉琼脂碘

碘原液碘化钾可溶性淀粉磷酸氢二钠柠檬酸氯化钴重酪酸钾0.01NHCL3.3仪器或设备平板培养皿试管三角瓶烧杯称量纸高压蒸汽灭菌锅干燥箱无菌吸管无菌培养皿酒精灯接种钩滴管

4实验步骤1制备土壤稀释液选好采样点，去土表面5cm，去5-15cm处，用无菌器具规范采样几十克。记录采样时间，地点环境等，以备考证。采样后应尽快分离。使土样与水分充分混合，将细胞分散，放入99ml无菌水三角瓶中，80度水浴处理1小时候取出。用一支1ml无菌吸管从中吸取1ml土壤悬液加入盛有9ml无菌水的大试管中充分混匀，然后从该试管中吸取1ml加入另一盛有9ml无菌水试管中，以此类推。制成五分不同稀释度的土壤溶液。2涂布

将上述每种培养基的三个平板底面分别用记号笔写上3、4、5、三个稀释度，然后分别由3、4、5三管土壤稀释液中各吸取0.2ml，小心的滴在对应的平板培养基表面中央位置。用无菌涂布器涂布，均匀分布，在室温下静置5—10分钟，使菌液浸入培养基。3培养

将淀粉培养基平板倒置于30摄氏度的培养箱中培养1-3d4初筛

观察菌落表面粗糙不透明，呈污白色或微黄色，将这样的菌种单个菌落分别挑取少许细胞接种到培养基上，置于30度的培养箱中培养，若发现有杂菌，需要再进行分离纯化。（若果不能用肉眼更好的观察，可以对其进行革兰氏染色，在显微镜下观察，与标准菌种比较）5复筛测定淀粉酶活2方法步骤7结果分

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