临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件

临床检验方法的评价郭健卫生部临检中心临床检验方法的评价郭健方法评价方法选择常规分析前准备常规分析样品统计质控报告结果预防措施方法发展方法评价方法选择常规分析前准备常规分析样品统计质控报告结果预分析方法分级决定性方法（definitivemethod）：经详尽研究尚未发现不准确度或不确定性原因的方法。参考方法（referencemethod）：经详尽研究证实其不准确度与不精密度可以忽略的方法。常规方法（routingmethod）：可满足临床或其他目的需要的日常使用的方法。分析方法分级决定性方法（definitivemethod）临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件常规方法参考方法决定性方法准确度增加应用范围增加不同方法的关系常规方法参考方法决定性准确度增加应用范围增加不同方法的关系标准品（referencematerial）：充分均匀并具有一个或多个良好确定的特性值的材料或物质，用来校准仪器设备、评估测定方法或给其它物质赋值。一级标准品（原级参考物）：稳定、均一，由高度准确的若干方法定值，可用于校准决定性方法及为二级标准品定值。二级标准品：用一级标准品校准，参考方法定值。校准品：用二级标准品校准，拟被用于校准的常规方法定值。用于对常规方法和仪器的校准。标准品分级标准品（referencematerial）：充分均匀并具

参考方法决定性方法

厂家方法

常规分析

一级标准品二级标准品校准品准确度的传递溯源校准仪器参数试剂参考方法决定性方法厂家方法常规分析一人血清无机成分分析标准物质—GBW09135血清胆固醇标准物质—GBW09138一级标准物质二级标准物质红细胞微粒标准物质—GBW（E）090001胆红素标准物质—GBW（E）090002氰化高铁血红蛋白溶液标准物质—GBW（E）090004纯化血红蛋白标准物质—GBW（E）090011人血清无机成分分析标准物质—GBW09135一级标准物质二级评价内容：初步评价（NCCLSEP10）

精密度（NCCLSEP5）

对比及偏差（NCCLSEP9）

线性（NCCLSEP6）抗干扰能力（NCCLSEP7）基质效应（NCCLSEP14）临床准确度（敏感性和特异性）（NCCLSGP10，ROC曲线）方法的评价评价内容：方法的评价NCCLS文件EP9-A用患者样本进行方法对比及偏差评估批准指南1995年12月NCCLS文件EP9-A用患者样本进行方法对比批准指南199评价两种分析方法（同一分析项目）的偏差。评价要求：熟悉仪器操作熟悉评价方案质控足够的数据（最少5个工作日，40个样本）用途：目的：引进新方法前或用一种方法替代另一种方法时进行偏差分析。评价两种分析方法（同一分析项目）评价要求：熟悉仪器操作用途：实验样本：来源于健康人或患者，无干扰，尽量避免贮存。对比方法：厂家要求的实验室常规方法或公认的参考方法。

具有好的精密度没有已知的干扰物相同单位相对国家标准或参考方法的偏差是已知的实验样本：对比方法：测定范围：医学决定水平范围内（均匀分布）

样本数：至少40例，增加可提高可信性。测定方法：两种方法分别做双份测定。测定顺序：

每天：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1测定范围：医学决定水平范围内（均匀分布）测定次数：每天分别用两种方法进行测定，至少测定5天，共40个样本数据监督：系统误差、人为误差质控：常规质控测定次数：熟悉仪器及方法收集数据检查方法内的离群点

界限：（双份测定）相对差值均值的4倍实验步骤熟悉仪器及方法实验步骤绘图

均值散点图（X，Y）所有值散点图（Yij，Xi）偏差图散点图（（Yij-Xij），Xi）绘图均值散点图（X，Y）临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件均值散点图（X，Y）均值散点图（X，Y）偏差图：每次测定的Y均值与X均值之差-相应X均值图偏差图：每次测定的Y均值与X均值线性相关目测检查两种方法间离群值目测检查

界限：4倍两种方法间绝对偏差的均值

绝对差值允许范围:

相对差值允许范围:线性相关目测检查适合范围

计算r，r2>=0.95范围适合

r2<0.95扩大数据范围线性回归

计算均匀离散度的直观检查适合范围临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件预期偏差及可信范围

线性回归方程计算偏差（高、中、低3组）解释实验结果并与内部标准比较预期偏差及可信范围临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件定量分析方法的线性评价EvaluationofTheLinearityofQuantitativeAnalyticalMethodsEP6-P定量分析方法的线性评价EvaluationofTheL目的为实验室中采用定量分析方法的用户提供评价仪器或方法是否满足厂家线性指标的评价方法。用户可为分析方法设定线性范围。目的为实验室中采用定量分析方法的用户提供评价仪器或方法是否满定义AssayRange（LinearRange)

Therangeofconcentrationoractivityinwhichthefinaloutputvalueofasystemisproportionaltotheanalyteconcentrationoractivitywithinastatedtolerance.定义AssayRange（LinearRange)定义Linearity:Themeasureofthedegreetowhichacurveapproximatesastraightline.Itreferstooverallsystemresponse(i.e.,thefinalanalyticalanswerratherthantheinstrumentoutput)定义Linearity:ScopeandLimitations线性是分析方法的一个特征，不同于准确性和精密度。线性实验应该使用与待分析物基质相似的样本。线性检验系统反应，包括校准、线性化技术、系数和仪器反应。ScopeandLimitations线性是分析方法的一使用者的需求用简单的实验来检验厂家标示的线性范围及定量分析方法的分析范围。在实验室中作为方法学的信息（方法线性）。进行线性评价实验。使用者的需求用简单的实验来检验厂家标示的线性范围及定量分析方仪器的熟悉过程执行分析过程的实验室人员必须掌握仪器操作和维护程序、样本准备方法和校准。对较简单的设备需要5天或更少时间。对较复杂的多通道设备需要5天或更长时间。仪器的熟悉过程执行分析过程的实验室人员必须掌握仪器操作和维护实验周期在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。全部实验和数据采集应在同一工作日内完成。实验周期在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。线性评价实验样本要求：最少4个浓度水平，推荐5个水平。基质效应：应使用与病人样本相似的样本或注明基质类型。线性评价实验样本要求：可以使用的样本病人混合血清理想的样本基质高值样本：高于上限30%

低值样本：线性低限或更低。可以使用的样本病人混合血清可以使用的样本Patient-SamplePoolSpikedwithAnalyte

加入品在没有干扰物存在时不需高纯度。PoolDilutedwithTreatedPoolMaterial

用于降低分析物浓度，如：透析、热处理、层析。可以使用的样本Patient-SamplePoolSpi可以使用的样本PoolDilutedwithSaline。在线性实验中使用此类样本可掩盖不同的基质效应。CommercialControl/CalibratorMaterial

此类样本由于不是正常的生理形式，可掩盖实际的线性结果。可以使用的样本PoolDilutedwithSalin可以使用的样本Underdiluted/OverdilutedCommercialControlMaterialAqueousSolutions（一般无基质效应）SolutioninOtherSolvents（基质效应与有机溶剂相似）可以使用的样本Underdiluted/Overdilute推荐的样本添加材料ALB：白蛋白干粉、humanfractionV.乙醇：无水乙醇ALP：纯酶AMS：腮腺或胰腺提取物BIL：胆红素纯品Ca:CaCO3Cl:NaCl推荐的样本添加材料ALB：白蛋白干粉、humanfract推荐的样本添加材料CHOL：胆固醇纯品或稀释质控品CO2：CaCO3CREA：标准液或高值血清-ALT：纯酶GLU：右旋糖AST：纯酶ALT：纯酶推荐的样本添加材料CHOL：胆固醇纯品或稀释质控品推荐的样本添加材料HBD：纯酶LDH：纯酶Lipase：胰腺提取物Mg：MgCl2P:K(H)2PO4或Na(H)PO4TP：白蛋白干粉、人或牛的成份VUA：在得不到高值病人样本时，使用标准储备液或干燥尿酸。BUN：在得不到高值病人样本时，使用标准储备液或干燥尿素。推荐的样本添加材料HBD：纯酶样本分析顺序分析序列应为随机排列。有显著携带污染时，应用空白隔开样本。每个实验组内应至少分析4个（最好是5个）不同浓度水平的样本。样本分析顺序分析序列应为随机排列。样本浓度范围应覆盖待评线性范围的上、下限。评价结果不满意时应重新设定浓度。线性范围内至少应保留有4个浓度。样本浓度范围应覆盖待评线性范围的上、下限。样本的准备足量的混合血清。低浓度混合血清（No1）；高浓度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1”+1份“No5”血清（No3）：2份“No1”+2份“No5”血清（No4）：1份“No1”+3份“No5”样本的准备足量的混合血清。样本浓度计算

C1×V1+C5×V5浓度=----------------------------------V1+V5样本浓度计算数据收集x1y1-1y1-2y1-3y1-4x2y2-1y2-2y2-3y2-4x3y3-1y3-2y3-3y3-4x4y4-1y4-2y4-3y4-4x5y5-1y5-2y5-3y5-4数据收集x1y1-1数据评价观察有无明显的数据错误。若有明显异常时应判断是否为离群点。如离群点超出2点，则保留全部数据或重做全部实验。数据评价观察有无明显的数据错误。离群点检查用于特定浓度Y值离群点的检验。将4个重复值从大到小排列（Y1到Y4）。计算：D=Y1-Y4若Y1可能是离群点，计算：

D1=（Y1-Y2）/D若Y4可能是离群点，计算：

D4=（Y3-Y4）/D离群点检查用于特定浓度Y值离群点的检验。离群点判断判断值（Criticalvalue)(0.05)0.765(0.01)0.889离群点判断判断值（Criticalvalue)绘图和评价线性X-Y图，X轴为分析物浓度。反应值或仪器输出值为Y轴。目测离群值。(Y=aX+b)目测线性判断是否符合要求。进行统计学判断和评价。绘图和评价线性X-Y图，X轴为分析物浓度。注意：统计学标准和临床可接受限不同。慎用方法学线性范围从0开始。有临床意义的浓度应在线性评价中：最小的线性浓度医学决定水平最大的线性浓度注意：统计学标准和临床可接受限不同。参考文献DixonW.J.andMasseyF.J.introductiontostatisticalanalysis,3rdedition,McGraw-HillBookCo.,NewYork,1969,pp308-310,500,536-537.WeissbergA.andBeattyG.H.Tablesoftolerance-limitfactorsfornormaldistributions,Technometrics2:4,1960Graybill,FranklinA.Anintroductiontolinearstatisticalmodels,volumeI,McGraw-HillBookCompany,1961,p191.参考文献DixonW.J.andMasseyF.J.临床化学设备的精密度评价EvaluationofPrecisionPerformanceofClinicalChemistryDevices,ApprovedGuideline,1984EP5临床化学设备的精密度评价EvaluationofPrec精密度的内容批内批间日内日间总精密度精密度的内容批内实验方法试剂和校准物：同一批号样本：基质与临床样本相似，2个以上浓度（参考医学决定水平）。实验天数：20天以上实验次数：每天2批，每批2个（批号）样本，每个样本重复2次实验方法试剂和校准物：同一批号精密度实验天数1批2批XX11X12X1X11-X12X21X22X2X21-X2212345精密度实验天数1批2批XX11X12X1X11-X12X21精密度评价批内：日内：（批间）日间：总精密度：精密度评价批内：临床检验方法的评价郭健卫生部临检中心临床检验方法的评价郭健方法评价方法选择常规分析前准备常规分析样品统计质控报告结果预防措施方法发展方法评价方法选择常规分析前准备常规分析样品统计质控报告结果预分析方法分级决定性方法（definitivemethod）：经详尽研究尚未发现不准确度或不确定性原因的方法。参考方法（referencemethod）：经详尽研究证实其不准确度与不精密度可以忽略的方法。常规方法（routingmethod）：可满足临床或其他目的需要的日常使用的方法。分析方法分级决定性方法（definitivemethod）临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件常规方法参考方法决定性方法准确度增加应用范围增加不同方法的关系常规方法参考方法决定性准确度增加应用范围增加不同方法的关系标准品（referencematerial）：充分均匀并具有一个或多个良好确定的特性值的材料或物质，用来校准仪器设备、评估测定方法或给其它物质赋值。一级标准品（原级参考物）：稳定、均一，由高度准确的若干方法定值，可用于校准决定性方法及为二级标准品定值。二级标准品：用一级标准品校准，参考方法定值。校准品：用二级标准品校准，拟被用于校准的常规方法定值。用于对常规方法和仪器的校准。标准品分级标准品（referencematerial）：充分均匀并具

参考方法决定性方法

厂家方法

常规分析

一级标准品二级标准品校准品准确度的传递溯源校准仪器参数试剂参考方法决定性方法厂家方法常规分析一人血清无机成分分析标准物质—GBW09135血清胆固醇标准物质—GBW09138一级标准物质二级标准物质红细胞微粒标准物质—GBW（E）090001胆红素标准物质—GBW（E）090002氰化高铁血红蛋白溶液标准物质—GBW（E）090004纯化血红蛋白标准物质—GBW（E）090011人血清无机成分分析标准物质—GBW09135一级标准物质二级评价内容：初步评价（NCCLSEP10）

精密度（NCCLSEP5）

对比及偏差（NCCLSEP9）

线性（NCCLSEP6）抗干扰能力（NCCLSEP7）基质效应（NCCLSEP14）临床准确度（敏感性和特异性）（NCCLSGP10，ROC曲线）方法的评价评价内容：方法的评价NCCLS文件EP9-A用患者样本进行方法对比及偏差评估批准指南1995年12月NCCLS文件EP9-A用患者样本进行方法对比批准指南199评价两种分析方法（同一分析项目）的偏差。评价要求：熟悉仪器操作熟悉评价方案质控足够的数据（最少5个工作日，40个样本）用途：目的：引进新方法前或用一种方法替代另一种方法时进行偏差分析。评价两种分析方法（同一分析项目）评价要求：熟悉仪器操作用途：实验样本：来源于健康人或患者，无干扰，尽量避免贮存。对比方法：厂家要求的实验室常规方法或公认的参考方法。

具有好的精密度没有已知的干扰物相同单位相对国家标准或参考方法的偏差是已知的实验样本：对比方法：测定范围：医学决定水平范围内（均匀分布）

样本数：至少40例，增加可提高可信性。测定方法：两种方法分别做双份测定。测定顺序：

每天：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1测定范围：医学决定水平范围内（均匀分布）测定次数：每天分别用两种方法进行测定，至少测定5天，共40个样本数据监督：系统误差、人为误差质控：常规质控测定次数：熟悉仪器及方法收集数据检查方法内的离群点

界限：（双份测定）相对差值均值的4倍实验步骤熟悉仪器及方法实验步骤绘图

均值散点图（X，Y）所有值散点图（Yij，Xi）偏差图散点图（（Yij-Xij），Xi）绘图均值散点图（X，Y）临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件均值散点图（X，Y）均值散点图（X，Y）偏差图：每次测定的Y均值与X均值之差-相应X均值图偏差图：每次测定的Y均值与X均值线性相关目测检查两种方法间离群值目测检查

界限：4倍两种方法间绝对偏差的均值

绝对差值允许范围:

相对差值允许范围:线性相关目测检查适合范围

计算r，r2>=0.95范围适合

r2<0.95扩大数据范围线性回归

计算均匀离散度的直观检查适合范围临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件预期偏差及可信范围

线性回归方程计算偏差（高、中、低3组）解释实验结果并与内部标准比较预期偏差及可信范围临床检验方法的评价CLSI-EP文件课件定量分析方法的线性评价EvaluationofTheLinearityofQuantitativeAnalyticalMethodsEP6-P定量分析方法的线性评价EvaluationofTheL目的为实验室中采用定量分析方法的用户提供评价仪器或方法是否满足厂家线性指标的评价方法。用户可为分析方法设定线性范围。目的为实验室中采用定量分析方法的用户提供评价仪器或方法是否满定义AssayRange（LinearRange)

Therangeofconcentrationoractivityinwhichthefinaloutputvalueofasystemisproportionaltotheanalyteconcentrationoractivitywithinastatedtolerance.定义AssayRange（LinearRange)定义Linearity:Themeasureofthedegreetowhichacurveapproximatesastraightline.Itreferstooverallsystemresponse(i.e.,thefinalanalyticalanswerratherthantheinstrumentoutput)定义Linearity:ScopeandLimitations线性是分析方法的一个特征，不同于准确性和精密度。线性实验应该使用与待分析物基质相似的样本。线性检验系统反应，包括校准、线性化技术、系数和仪器反应。ScopeandLimitations线性是分析方法的一使用者的需求用简单的实验来检验厂家标示的线性范围及定量分析方法的分析范围。在实验室中作为方法学的信息（方法线性）。进行线性评价实验。使用者的需求用简单的实验来检验厂家标示的线性范围及定量分析方仪器的熟悉过程执行分析过程的实验室人员必须掌握仪器操作和维护程序、样本准备方法和校准。对较简单的设备需要5天或更少时间。对较复杂的多通道设备需要5天或更长时间。仪器的熟悉过程执行分析过程的实验室人员必须掌握仪器操作和维护实验周期在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。全部实验和数据采集应在同一工作日内完成。实验周期在完成仪器熟悉过程后开始实验并收集数据。线性评价实验样本要求：最少4个浓度水平，推荐5个水平。基质效应：应使用与病人样本相似的样本或注明基质类型。线性评价实验样本要求：可以使用的样本病人混合血清理想的样本基质高值样本：高于上限30%

低值样本：线性低限或更低。可以使用的样本病人混合血清可以使用的样本Patient-SamplePoolSpikedwithAnalyte

加入品在没有干扰物存在时不需高纯度。PoolDilutedwithTreatedPoolMaterial

用于降低分析物浓度，如：透析、热处理、层析。可以使用的样本Patient-SamplePoolSpi可以使用的样本PoolDilutedwithSaline。在线性实验中使用此类样本可掩盖不同的基质效应。CommercialControl/CalibratorMaterial

此类样本由于不是正常的生理形式，可掩盖实际的线性结果。可以使用的样本PoolDilutedwithSalin可以使用的样本Underdiluted/OverdilutedCommercialControlMaterialAqueousSolutions（一般无基质效应）SolutioninOtherSolvents（基质效应与有机溶剂相似）可以使用的样本Underdiluted/Overdilute推荐的样本添加材料ALB：白蛋白干粉、humanfractionV.乙醇：无水乙醇ALP：纯酶AMS：腮腺或胰腺提取物BIL：胆红素纯品Ca:CaCO3Cl:NaCl推荐的样本添加材料ALB：白蛋白干粉、humanfract推荐的样本添加材料CHOL：胆固醇纯品或稀释质控品CO2：CaCO3CREA：标准液或高值血清-ALT：纯酶GLU：右旋糖AST：纯酶ALT：纯酶推荐的样本添加材料CHOL：胆固醇纯品或稀释质控品推荐的样本添加材料HBD：纯酶LDH：纯酶Lipase：胰腺提取物Mg：MgCl2P:K(H)2PO4或Na(H)PO4TP：白蛋白干粉、人或牛的成份VUA：在得不到高值病人样本时，使用标准储备液或干燥尿酸。BUN：在得不到高值病人样本时，使用标准储备液或干燥尿素。推荐的样本添加材料HBD：纯酶样本分析顺序分析序列应为随机排列。有显著携带污染时，应用空白隔开样本。每个实验组内应至少分析4个（最好是5个）不同浓度水平的样本。样本分析顺序分析序列应为随机排列。样本浓度范围应覆盖待评线性范围的上、下限。评价结果不满意时应重新设定浓度。线性范围内至少应保留有4个浓度。样本浓度范围应覆盖待评线性范围的上、下限。样本的准备足量的混合血清。低浓度混合血清（No1）；高浓度混合血清（No5）血清（No2）：3份“No1”+1份“No5”血清（No3）：2份“No1”+2份“No5”血清（No4）：1份“No1”+3份“No5”样本的准备足量的混合血清。样本浓度计算

C1×V1+C5×V5浓度=----------------------------------V1+V5样本浓度计算数据收集x1y1-1y1-2y1-3y1-4x2y2-1y2-2y2-3y2-4x3y3-1y3-2y3-3y3-4x4y4-1y4-2y4-3y4-4x5y5-1y5-2y5-3y5-4数据收集x1y1-1数据评价观察有无明显的数据错误。若有明显异常时应判断是否为离群点。如离群点超出2点，则