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文档简介
β2ELISA检测试剂盒,人(integrinβ2/CD11+CD18)ELISA试剂盒使用说明书上海古朵生物供应本试剂仅供研究使用 标本:血清或血浆Ourcompanyspecializesintheproductionofthesupplyofkitproductsare:doubleantisandwichELISAdetection,ELISAkit,HumanELISAkit,ELISAkit,domesticimportreagent,reagentkitfortestingELISAkit,ELISATestkit,ratELISAkit,mouseELISAkit,apoptosisrelatedfactorkit,white使用目的:2β2/CD11+CD18)含量。ELISAkit,ELISAkitVIP使用目的:2β2/CD11+CD18)含量。试验原理:integrinβ2/CD11+CD18试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验integrinβ2/CD11+CD18浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将integrinβ2/CD11+CD18和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的integrinβ2/CD11+CD18的浓度呈比例关系。β2整合素试剂盒,elisa试剂盒说明书,ELISA试剂盒,ELISA检测试剂盒,elisa试剂盒说明书试剂盒内容及其配制试剂盒成份(2-8℃保存)96/48份酶标板塑料膜板盖96孔配置1块板(96T)1块48孔配置半块板(48T)半块配制即用型即用型标准品:80ng/ml1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型生物素标记的抗integrinβ2/CD11+CD18抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型自备材料1.蒸馏水。2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3.振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物AB。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物、B液时,避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物BOD值。加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法110分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液5-70℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂37充分解冻。【β2整合素β试剂盒】试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:80ng/ml(6号标准品)原倍浓度不用稀释直接加入50ul。40ng/ml(5号标准品)100ul100ul的标准品稀释液20ng/ml(4号标准品)100ul5100ul的标准品稀释液10ng/ml(3号标准品)100ul4100ul的标准品稀释液5.0ng/ml(2号标准品)100ul3100ul的标准品稀释液2.5ng/ml(1号标准品)100ul2100ul的标准品稀释液0ng/ml(空白对照)原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液50倍稀释。操作步骤使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:150ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,1小时。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次数增加一次。80ul-HRP30分钟。甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次数增加一次。每孔加入底物AB50ul10分钟。避免光照。取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。450nmOD值。标准品浓度标准品浓度A8080样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品B4040样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品C2020样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品D1010样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品E5.05.0样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品F2.52.5样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品G00样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品H样品样品样样样样样样样样样样品品品品品品品品品品局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。β2整合素(integrinβ2/CD11+CD18)ELISA试剂盒性能灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为。特异性:不与其它细胞因子反应。重复性:板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的integrinβ2/CD11+CD18标准品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的integrinβ2/CD11+CD18含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0-80ng/ml4、敏感度:0.1ng/mlELISAELISA试剂盒、ELISAelisaELISAELISA盒、白介素ELISAVIPELISAkitTheperformanceofkit:1sensitivity:minimumdetectionconcentrationislessthan1standard.Liintegrin 2/CD11+CD18arityofdilution.Sampleliintegrinβ2/CD11+CD18arregressionandtheexpectedconcentrationcorrelationcoefficientRvalueis0.990.2:nospecificreactionwithothercytokiintegrinβ2/CD11+CD18s.3repeaintegrinβ2/CD11+CD18ility:plate,platebetweenthecoefficientsofvariationwerelessthan10%.HumantypeIIIprocollagenaminoterminalpeptideELISAkitsteps:beforeuse,allreagentsandmixing.Donotallowliquidtoproducealargenumberofbubbles,soastoavoidaddingalargenumberofbubbles,resultingintheadditionoftheerror.accordingtodetermiintegrinβ2/CD11+CD18thenumberofsamplenumberplusstandardstripnumber.Eachstandardandblankholeisrecommendedtodothehole.Eachsamplecanbemadeaccordingtoitsownquantity,andcanbeusedasaholeinthehole.dilutedafterstandard50ulinreactionhole,addedtothesample50ULinreactionholetobemeasured.Immediatelyjoiintegrin β2/CD11+CD18dthe50ULantibodybiotin.Coverthemembraintegrinβ2/CD11+CD18plate,gentlyoscillatingmixing,37degreesCelsiusfor45minutes.leftholeliquid,eachholefilledwithwashingliquid,oscillating30secondsoffthewashingliquid,patdrywithabsorbentpaper.Repeatthisoperation4times.Ifthewashingmachiintegrinβ2/CD11+CD18withwashing,washingtimesincreasedonce.perholeaddingchainaffinityenzyme-HRP100ul,gentlyoscillatingmixing,37degrees30minutesincubation.leftholeliquid,eachholefilledwithwashingliquid,oscillating30secondsoffthewashingliquid,patdrywithabsorbentpaper.Repeatthisoperation4times.Ifthewashingmachiintegrinβ2/CD11+CD18withwashing,washingtimesincreasedonce.perholeaddingsubstrateA,B50ul,gentlyoscillatingmixing,37degrees5minutesincubation.Avoidlight.removeELISAplate,quicklyadd50ulterminatedliquid,addingthestopsolutionimmediatelyafterthedeterminationresults.oddeterminationofeachholeatthewavelengthof450nm.Theresultofjudgmentandanalysis:1,instrumentvalue:YuBo450nmELISAodreadtheholeontheinstrument2,totheODvalueasaverticalcoordinate(y),correspondingotstandardconcentrationsasahorizontalcoordinate(x),dohavecorrespondingcurve,sampleotcontentcanbeaccordingtotheODvaluebystandardcurveconversionoutcorrespondingconcentration,multipliedbythedilutionmultiple;orwiththestandardconcentrationandtheODvaluecalculatedthe
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