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文档简介

实验五、血涂片制备染色及白细胞形态观察付毓平临床检验诊断学教研室根据不同的细胞种类及细胞的不同成分,对酸性及碱性染料的结合能力不同,而使各种细胞呈现出各自的特点。掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态。原理

目的器材

载玻片、推片、洗耳球、显微镜、微量吸管、拭镜纸试剂

瑞氏染液、磷酸缓冲液、香柏油、乙醇-乙醚溶液、标本

EDTA抗凝静脉血血涂片制备推片载玻片血液将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(薄)一张满意的血涂片应厚薄均匀头体尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B1231.玻片清洗:新玻片常有游离碱质,因此应用清洗液或10%盐酸浸泡24h,然后再彻底清洗。用过的玻片可放入适量肥皂水煮沸20min,再用热水将肥皂和血膜洗去,自来水反复冲洗,必要时再置95%乙醇中浸泡1h,然后擦干或烤干备用。2.使用玻片:只能手持玻片边缘,切勿触及玻片表面,以保持玻片清洁、干燥、中性、无油腻。3.良好的血涂片,厚薄适宜,头体尾分明,分布均匀,边缘整齐,两侧留有空隙。

血滴越大,角度越大,速度越大,血膜越厚。注意事项血涂片染色滴加瑞氏染色Ⅱ液3-5滴,用洗耳球将Ⅰ液和Ⅱ液轻轻吹混,静置10分钟直接流水冲洗3-5分钟(切勿先倒掉染液)干燥后用油镜观察白细胞形态李四123涂片干燥后加瑞氏染色Ⅰ液3-5滴至覆盖整个血膜,约1分钟血涂片的观察低倍镜观察1.染色情况(满意、偏酸or偏碱)2.细胞分布情况油镜下观察各细胞形态(体尾交界处)李四123外周血白细胞正常形态粒细胞淋巴细胞单核细胞外周血正常白细胞形态正常白细胞形态

中性杆状核粒细胞

中性分叶核粒细胞正常白细胞形态

嗜酸性粒细胞正常白细胞形态嗜碱性粒细胞正常白细胞形态

单核细胞正常白细胞形态淋巴细胞正常白细胞形态注意事项1.血涂片干透后方可染色,否则染色过程中容易脱落。2.加染液应适量,过少易蒸发形成沉渣,不易观查。3.冲洗时不能倾倒掉染液,应先以流水冲洗,以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不宜过久,以防脱色。4.分类时要沿一定方向连续进行,避免主观选择视野。5.镜

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