临床微生物质量控制

临床微生物质量控制

临床微生物检验是对人体的各种物质进行微生物学检验，整个检验过程包括病人样品的采集、运送、处理，样品中致病微生物的分离、培养、鉴定，药物敏感试验，出具检验报告。临床微生物检验，在感染性疾病及相关病患的诊断治疗预防及研究工作中起着越来越重要的作用，为了保障检验结果的准确性和可靠性，日常工作中要注意开展质量控制。临床微生物检验质控工作的特点环节多涉及的知识面广复杂性高、需要超强的责任心临床微生物检验质量控制的有关概念细菌检验的质量结果真实显示标本中存在的病原菌及其生化特征和抗药性细菌检验的质量控制制定细菌检验的质量水平，并采取监测手段，这一过程称为细菌检验的质量控制。质量保证为达到应有的质量水平而采取的措施质量评价用一个客观的公认的标准来评定一个实验室或实验室中某项试验是否达到标准的过程室间质量控制室间质量控制是各地实验室之间进行质量控制的一种方式，也是上一级实验室对各实验室进行质量管理的手段。参加由省临床检验中心或卫生部临床检验中心组织的室间质控，会遇见一些平时罕见或未见过的菌株，通过质控检验对它们的生长条件、菌落形态、染色、镜下形态等有了较深的感性认识。日后工作中倘若再遇见这些菌将不再会漏检。

室内质量控制

做好室内质控直接关系到日常检验工作的质量。室内质控主要包括几个方面：实验室前的质量控制、标本接种前的质量控制、培养基的质量控制、试剂质量控制、常用仪器的质量控制、药敏实验的质量控制、及发报告前的质量控制。实验室前的质量控制

要想获得可靠的检验结果，首先要取得一份合格的标本，所以实验室前的质量控制是保障检验结果准确性的关键。包括标本采集时间（时机）、采集方法与运送等。血液细菌培养

临床上疑为败血症、脓毒血症或其他血流感染的患者，需做血液细菌培养以明确病原。及时、准确地从患者血液中分离出病原菌，才能正确实施有效地抗菌治疗，从而有助于提高治愈率和降低医疗费用。1.采血时机

应在用抗菌素治疗前,最好在患者发冷发热前半小时采血为宜。2.采血次数与间隔急性感染患者

从两臂分别采2份血样。感染性心内膜炎患者

24h内采血3次,每次间隔不少于30分钟。发热原因不明患者

24～48h后可再采血2次,间隔不少于60分钟。呼吸道标标本细菌菌培养标本留取取质量的的好坏直直接影响响到对下下呼吸道病原原学的诊诊断标本的采采集要尽尽量减少少上呼吸吸道正常常菌群干扰应在用药药前或停停药1天天后留取取标本。。泌尿道标标本细菌菌培养应在用药药前或停停药5天天后留取取标本,并使使尿液在在膀胱内内停留6～8h以上。。尽量避免免或减少少尿道口口正常菌菌群干扰扰。采集中段段尿尿量不宜宜太多，，试管塞塞子与尿尿液不应应直接接接触留取导尿尿管尿要要排空导导尿管内内陈旧尿尿液，倘倘留置尿尿管超过过三天应应避免采采用。粪便标本本的采集集应在发病病早期并并且尽量量在用抗抗生素治治疗前采采集，稀稀便不少少于1ml，固固体便不不少于1克，无无便患者者可用直直肠拭子子采集标标本。要挑取含含脓、黏黏液、血血等病理理改变或或水样粪粪便送检检。直肠肠拭子采采样量要要足够，，拭子上上肉眼应应可见粪粪便。脓液标本本要尽量避避免病灶灶表面细细菌污染染。开放放性脓肿肿，采样样前无菌菌盐水冲冲洗伤口口，拭去去表面污污染脓液液，挑取取病灶深深部脓液液；封闭闭性脓液液，严格格病灶皮皮肤或黏黏膜表面面的消毒毒后用无无菌干燥燥注射器器穿刺抽抽取，置置无菌试试管内送送检，或或切开排排脓时用用无菌拭拭子采集集深部脓脓液。标本接种种前质量量控制各种临床床标本送送到实验验室后，，大致检检查其是是否合格格。不合合格的标标本不应应进行检检验。痰外观观分为脓痰痰（P））、粘液液（M））、血（（B）、、唾液（（S）、、水样（（W）五五个级别别，以P、M、、B级别别适合细细菌培养养。痰标本显显微镜检检查的分分类分类白细胞上皮细胞5>25<104>2510~25

3>25>25210~25>251<10>251～3类类为不合合格标本本,不不做培养养。4～5类类为合格格标本。。油镜下观观察并记记录可能能的病原原菌，尤尤其是白白细胞内内吞噬的的细菌首先用灭灭菌生理理盐水将将痰液洗洗3次，，然后将将痰块打打碎，或或加入等等量10g/L的胰蛋蛋白酶将将痰块消消化后再再接种。。培养基的的质量控控制一般性状状无菌试验验细菌生长长试验１、一般般性状外观透明、清清亮、无无混浊、、无沉淀淀，颜色色符合要要求，表表面湿润润但无水水汽、平平整、光光洁无凹凹坑和气气泡。整整块平板板厚薄均均匀。厚度一般厚度度在3mm，但MH平板厚度度不得小小于4mm。斜面的的长度不不得超过过试管长长度的2/3。pH是细菌生生长的重重要条件件之一，，合格培培养基的的pH应在规定定值上下下0.2的范围内内。2、无菌菌试验新制备的的培养基基要随机机抽取一一定数量量的样品品作无菌菌试验。。对于压压力蒸气气灭菌后后倾注的的固体培培养基，，抽样后后放35℃±1℃温箱箱培养24～～48h；灭菌菌后经无无菌操作作分装的的液体培培养基要要全部放放入35℃±1℃温箱箱内培养养24h；对有有些无需需高压灭灭菌只需需煮沸消消毒的选选择性培培养基要要取部分分琼脂，，放入无无菌肉汤汤管培养养24h。上述述试验证证实无细细菌生长长时才算算合格。。若有细细菌生长长，说明明培养基基制备过过程中已已受杂菌菌污染，，除了寻寻找原因因外，应应不再使使用。３、细菌菌生长试试验所有的培培养基在在使用前前除了做做无菌试试验外还还必须用用已知的的标准菌菌株做细细菌生长长试验以以测定培培养基性性能是否否符合要要求。标标准菌株株分2种：：一种是是已知的的可在某某种培养养基上生生长并产产生典型型生物学学性状的的，对培培养基中中的某种种物质产产生阳性性反应的的菌株；；另一种种是用已已知的不不能在某某种培养养基上生生长或对对培养基基中的某某种物质质产生阴阴性生化化反应的的菌株。。试剂质控控临床微生生物实验验室常用用的试剂剂包括染染色液、、诊断血血清以及及各种生生化反应应试剂等等。染色液及及染色方方法质量量控制染色液的的配置必必须按标标准方法法与分量量，过滤滤后使用用，每次次记录配配置量与与操作者者。还要要进行染染色步骤骤质控。。如革兰兰染色在在一张玻玻片上同同时涂有有金葡菌菌和大肠肠杆菌。。以保证证染色性性判断准准确无误误。常用生化化试剂的的质控随着细菌菌鉴定仪仪和快速速微量生生化鉴定定板条的的普及，，临床微微生物检检验常用用的生化化试剂种种类日趋趋减少，，应注意意在用试试剂在贮贮存时的的避光、、冷藏等等要求，，保证试试剂的稳稳定性。。不要使使用过期期的试剂剂。诊断血清清的质控控诊断血清清是一种种重要的的细菌鉴鉴定的试试剂，应应从有资资质的生生产单位位购买。。验收时时必须看看清生产产批号、、血清效效价、透透明度与与色泽。。试验中中应注意意无菌操操作，避避免细菌菌污染。。要经常常检查贮贮存在4℃冰箱箱中的各各种血清清，若发发现混浊浊，出现现絮状，，应停止止使用。。为保证证血清凝凝集反应应结果准准确，应应每3个个月对血血清进行行一次质质控。不不要使用用过期的的血清。。仪器设备备的质控控包括对冰冰箱、二二氧化碳碳孵箱、、普通孵孵箱、水水浴箱等等基本设设备的每每日温度度、气体体浓度的的监控记记录；显显微镜、、细菌鉴鉴定仪等等仪器的的使用、、保养、、维修记记录。以以保障实实验室各各种设备备、仪器器的正常常运转。。药物敏感感试验的的质控药物敏感感试验是是临床微微生物检检验的重重要步骤骤之一，，其结果果正确与与否涉及及治疗效效果的好好坏。影响药敏敏试验的的因素菌悬液浓浓度药敏纸片片的质量量MH培培养基的的质量孵育的时时间、温温度、气气体操作人员员的技术术药敏质控控系统经过正规规培训，，掌握药药敏试验验操作方方法的人人员有标准操操作规程程，包括括药敏试试验方法法、标准准菌株种种类及应应用、药药敏试验验的质控控方法及及允许范范围、药药物种类类选择与与判断标标准等有试验所所需的质质控菌株株使用质量量合格的的消耗性性检验材材料仪器设备备运转正正常，控控制标准准在允许许范围内内纸片药药敏试试验的的室内内质控控基础质质控：：连续续做30天天，如如失控控超过过3次次还需需继续续，如如失控控低于于3次次可改改为每每周1次。。纠控：：每周周质控控中发发生失失控应应纠控控，方方法：：连续续5天天，每每天1次，，每次次重复复5个个纸片片，如如找到到明确确失控控原因因，可可立即即改为为每周周1次次，否否则继继续。。发报告告前的的质量量控制制核实病病原菌菌鉴定定结果果被鉴定定的细细菌菌菌落形形态、、生化化特征征等与与鉴定定出来来的菌菌种是是否相相吻合合被鉴定定菌是是否真真的需需要或或值得得鉴定定与报报告核实药药敏结结果抑菌圈圈测量量是否否准确确特殊的的药敏敏现象象有无无遗漏漏是否符符合耐耐药规规则最后的的质控控是前前面所所有质质控效效果的的总体体表现现