选修课总结课件

医用小型猪的应用2014年4月25日第一章医用小型猪概述疾病模型生物材料药物评价国外常用小型猪品系北美：Hanford，Yucatan，Sinclair，Hormel，Pitman-Moore小型猪欧洲：Gottingen小型猪日本：Ohmini小型猪国外小型猪品系特点杂交选育,遗传背景及其表型不稳定近交程度低，近交培育开展少背景资料清楚，应用广泛商品化产业化程度高，规模化生产国外小型猪品系特点国内主要小型猪品系资源品（种）系：藏猪甘肃蕨麻小型猪封闭群香猪（巴马香猪、从江香猪、环江香猪、剑白香猪、久仰香猪）五指山小型猪版纳微型猪近交培育品系近交培育西双版纳小耳猪近交培育五指山猪资源品（种）系：作为一个畜禽品种成立。存在于品系所在地，当地有饲养的传统，或尽管具有资源保种场，但封闭及选育的时间较短，其遗传及生物学特性有待稳定。封闭群：不仅作为一个畜禽品种成立，而且具有资源保种场及固定的种群，经过长期的封闭培育，具有稳定的遗传与生物学特性。近交培育小型猪品系：指利用资源品系，严格按近亲交配的原则培育的品系。国内小型猪品系特点自然形成，近交程度高封闭及近交培育，遗传稳定品系各具特色，适应多种需求应用较少，商品化、产业化程度低一、小型猪用于人类疾病模型的特点和优势比较基因组学表明人与猪相似程度高小型猪实验动物化及标准化程度高小型猪实验技术体系配套，遗传工程技术体系基本建立第三章

医用小型猪与异种移植二、异种器官移植的三大难题1免疫排斥：目前最急需解决的问题随着α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲出猪的克隆成功，为猪→人异种移植带来了希望，显示出诱人的前景。2生理生化不相容：目前的次要问题3病毒安全性：目前最受关注的问题临床上与异种移植相关的两种主要资源是猪和非人灵长类(NHPs)。由于很多原因，包括伦理上的忧虑，NHPs的小型构造及可用的有限性，从而被拒绝作为供体动物。同时，一个物种的进化程度与人越接近，传播疾病的危险就越大，因此NHPs可能会把大量有感染性的病菌传播给人。三、如何理解猪是异种移植最佳供体随着移植医学和免疫学研究的进展，到目前为止，猪被选定为最合适的异种移植供体。小型猪在解剖学、生理学特性、营养代谢等方面与人类极为相似。我国具有独特而又丰富的小型猪资源，它们在原产地均为长期近亲交配形成的封闭群体，是优良猪种，一直是人类异种移植的首选供体和研究开发的热点。第四章医用小型猪与遗传工程一、遗传工程动物模型的概念运用各种技术手段有目的地干预动物的遗传组成，导致动物新的性状的出现，并使其能有效地遗传下去，形成新的可供生命科学研究和其他目的所用的动物模型，这类动物可被称为遗传工程动物模型。三、转基因的导入--DNA显微注射DNA显微注射法是目前最常用的最经典的导入外源基因的方法之一，早在1966年就有报道显示，被细玻璃针刺入原核的小鼠合子可以存活；将大分子物质注射入合子，并移植到假孕小鼠受体内，可以生出活体小鼠。时至今日，该技术已经相当成熟并被科学家广泛接受和应用。DNA显微注射的基本过程是将线性化的DNA，利用显微注射仪，通过注射针将外源基因注射到小鼠受精卵的雄性原核中，然后将含有外源基因的受精卵移植到假孕母鼠的输卵管中，产生转基因小鼠。显微注射优点外源DNA大小基本不受限制（1～50kb）导入过程直观整合率高四、体细胞核移植法将外源目的基因导入能传代培养的动物体细胞（包括动物成体体细胞、胚体成纤维细胞等，将这些动物体细胞称为核供体，通过显微注射或是电融合使核供体与相应的核受体（去核的原核胚或成熟的卵母细胞）不经过有性繁殖过程，在体外直接进行重组融合，将重组的胚胎进行移植，进而得到带有外源基因的转基因动物的。运用这种方法，1997年美国科学家率先克隆出第一只转基因绵羊“多莉”。但是，小鼠细胞核移植成功率非常低，目前对于小鼠的体细胞核移植主要借助压电驱动显微操作仪进行直接注射。小鼠体细胞克隆的首次成功是用卵丘细胞注射去核卵母细胞实现的。目前国内外许多实验室都在重新开发改进细胞核移植技术来制备细胞核移植转基因小鼠。遗传工程猪制备主流技术--猪体细胞核移植技术猪的体细胞核移植技术曾经落后于小鼠、牛和羊，然而自从2000年首例体细胞克隆猪诞生以来，猪体细胞核移植技术得到了迅猛的发展，取得了很大的进步。在不到十年的时间里，通过核移植技术获得转基因猪已经成为制作转基因猪的主流技术，并在全世界多个实验室中广泛应用，并且已经成功获得了几种基因定点修饰(基因打靶)克隆猪。转基因猪技术现在正处于由基础研究走向实际应用的过渡阶段。一、新药评价中的动物试验药效：疾病动物模型安全性：实验动物模型药代(ADME)：实验动物模型自发性动物疾病模型一般诱发动物疾病模型基因修饰动物疾病模型二、医用小型猪与药效学评价相似性、可重复性、可控性三、小型猪在毒理学研究中的应用一般毒理研究（Generaltoxicologystudies）皮肤毒理（Dermaltoxicology）生殖毒性（Reproductivetoxicity）儿科研究（Juvenilestudies）安全药理学（SafetyPharmacology）长期毒性（repeatdosetoxicology）药物代谢及毒性机理（Pharmacokineticsandmetabolism）第六章医用小型猪与微生态学一、微生态学(microecology)以微生物学和实验动物学为基础，研究正常微生物菌群与其宿主的相互关系及其作用机制的新兴边缘学科(全国科学技术名词审定委员会)。微生态学是细胞水平或分子水平的生态学，它是研究人类、动物、植物正常微生物群与其宿主相互关系的生命科学（VolkerRush,1985）二、无菌动物&悉生动物无菌动物（germ-freeanimal,GF）：是指体内外无可检出一切生命体的动物。是指用现有的检测知识和检测技术，在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物(细菌、真菌、病毒等)和寄生虫的动物悉生动物（gnotobioticanimal,GN）：也称已知菌动物或已知菌丛动物（defined-floraanimal），是指在无菌动物体内植入已知微生物的动物三、无菌动物的应用模式无菌与有菌动物比较，通过比较菌群存在与否对机体的影