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文档简介

4.1.4.1.4.1.紫外吸收光谱为物质对紫外区辐射的能量吸收图。郎伯-比尔(Lambert-Beer)定律为光的吸收定律,它是紫外分光光度法定量分析的依据,其数学表达式为:A=log1/T=ECL式中A为吸光度;T为透光率E为吸收系数C为溶液浓度L为光路长度4.2仪器4.4.4.4.4.4.3紫外-可见分光光度计的检定4.4.3.1.1波长准确度的允差范围紫外-可见分光光度计波长准确度允许误差,紫外区为±1.0nm,500nm处4.34.3.1.2.1用低压汞灯检定关闭仪器光源,将汞灯(笔式汞灯最方便)直接对准进光狭缝,如为双光束仪器,用单光束能量测定方式,采用波长扫描方式,扫描速度“慢”(如15nm/min)、响应“快”、最小狭缝宽度(如0.1nm)、量程0~100%,在200~800nm范围内单方向重复扫描3次,由仪器识别记录各峰值(若仪器无“峰检测”功能,必要时可对指定波长进行4.3.2吸光度准确度精密称取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,置1000ml量瓶中,用0.005mol/L硫酸液溶解并稀释至1000ml,用配对的1cm石英池,以0.005mol/L硫酸液为空白,在235,257,313,350nm分别测定吸光度,然后换算成(Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm分光光度法允差范围波长(nm)吸收强度吸收系数(Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))允差范围235最小124.5123.0~126.0257最大144.0142.8~146.2313最小48.6247.0~50.3350最大106.6105.5~108.54.4样品测定操作方法4.4.4.4.4.34.4.34.4.3.2.1采用吸收系数法应对仪器进行校正后测定,如为测定新品种的吸收系数,需按后列4.44.5注意事项4.4.54.4.5.以空气为空白测定溶剂在不同波长处的吸光度的规定波长范围(nm)220~240241~250251~300300以上吸光度<0.4<0.2<0.1<0.05每次测定时应采用同一厂牌子批号,混合均匀的同批溶剂.4.5.4.4.5.7测定时除另有规定者外,应在规定的吸收峰4.值对吸收有影响,则应调溶液的PH值一致后再测定吸光度。4.6结果与计算4.C样品=A样品×C对照/A对照式中A为吸光度值;C为测试液浓度(以mg/ml计)。4.6.2吸收系数法中国药典规定的吸收系数,系指(Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm)),即在指定波长时,光路长度为1cm,试样浓度换算为1%(g/ml)时的吸光度,故应先求被测样品的(Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))值,再与规定的(Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))值比较,可计算出供试品的含量。A(Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))(样品)=────C×L式中A为供试品溶液测得的吸光度值;C为供试品溶液的进分浓度,即100ml中所含溶质的克数(g/ml);L为吸收池的光路长度(cm)Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))(样品)供试品的含量%=─────×100Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))(标准)式中Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))(样品)为根据前式计算出的供试品吸收系数Eeq\o(\s\up6(1%),\s\do2(1cm))(标准)为药典或药品标准中规定的吸收系数。4.4.6.3.1测定方法取精制样品精密称取一定量,使

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