口岸样品采集技术及生物安全基础课件

口岸样品采集技术及生物平安根底口岸样品采集技术及生物平安根底1现场卫生检疫查验现场采样样品保存样品运输技术验证执法有效性安全防护安全操作不确定现场卫生现场采样样品保存样品运输技术验证执法有效性安全防护安2一、样品采集的目的、作用和原那么二、采样器具的配置三、样品采集的方法四、样品的保存和运送五、生物平安根底及样品采集的生物平安防护一、样品采集的目的、作用和原那么3一、样品采集的目的、作用和原那么1、目的:一是查明突发公共卫生事件或疾病爆发流行的原因；二是进展卫生质量监测和评价。2、作用:一是查明传染源，提供可靠技术支持；二是通过检测分析，积累技术资料；提高科研水平。一、样品采集的目的、作用和原那么1、目的:4一、样品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么▲Ⅰ制定详细样品采集方案：根据口岸卫生检疫疫情和可疑遭受生物袭击的现场情况，确定样品采集的范围和种类；按采样点的多少组成假设干采样小组，并准备好必要的采样器材和保存液；每个采样小组最少由两人组成，便于采样时互相协作。一、样品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么5表1根据检测目的拟选择的样品种类检测目的样品选择检测抗体血液、呼吸道分泌物、唾液、脑脊液、可疑物等检测抗原血液、呼吸道分泌物、唾液、脑脊液、粪便、组织、可疑物等分离病原血液、各种拭子标本、含漱液、粪便、尿液、脑脊液、疱疹液、空气采样标本、各种卫生评价样品等检测核酸血液、粪便、尿液等各种分离病毒用标本表1根据检测目的拟选择的样品种类检测抗体血液、呼吸道分泌6表2根据临床症状拟选择的样品种类临床症状样品选择发热、呼吸道症状鼻咽拭子、含漱液、痰、双份血清等高热、周身疼痛鼻咽拭子、含漱液、痰、双份血清等神经症状脑脊液、脑组织、双份血清等出血性症状血液、胸水、尿、粪便、双份血清等黄胆血液、肝组织、尿、双份血清等出疹、痘脓疱液、痂、双份血清等表2根据临床症状拟选择的样品种类发热、呼吸道症状鼻咽拭子7▲Ⅱ样品采集和处置的生物平安：主要是通过个人防护和废弃物品的合理处置，到达在采样中防止造成人员感染、标本和环境的污染。样品采集前样品采集时样品采集后▲Ⅱ样品采集和处置的生物平安：样品采集前样品采集时样品采集后8样品采集前充分做好的个人生物平安防护准备。包括：个人的安康状况确认平安防护用品准备应急处置用品准备样品采集人员是否有皮肤破损，是否患有免疫力低下的疾病或其他高危状况。主要包括防护口罩、面罩或眼罩、帽子、乳胶手套、防护服、防护鞋套等。配置急救包，供意外暴露时应急使用。样品采集前充分做好的个人生物平安防护准备。包括：个人的安9样品采集时根据所估计的疫情级别，选择不同的防护服和相关防护用品，按生物平安防护要求佩戴和进展样品采集操作；如疑心有高度传染力的病原，需使用连体式隔离防护服、呼吸面罩、防护目镜、N95级防护口罩和双层乳胶手套等。对接触不同患者，在样品采集时不应重复使用一副手套，以免穿插感染，并注意检查手套的平安性。样品采集时根据所估计的疫情级别，选择不同的防护服和相关防护用10样品采集后及时消毒处理使用过的防护用品及时消毒污染区表面和溢出物污染的废弃物品必须进行无害化消毒后废弃样品采集后及时消毒处理使用过的防护用品及时消毒污染区表面和溢11▲Ⅲ样品采集的时效性

在现场卫生检疫工作中，及时到达现场，及时采集到有价值的样品，是及时检验、及时诊断、及时处置的重要前提；尤其是一些应急突发公共卫生事件更应注重其时效性。有时样品采集的迅速及时比完整还要重要，如对外界标本的采集，要在消毒或处理之前；疑似病人的样品采集，要在发病初期或使用抗生药物或治疗之前采集等。▲Ⅲ样品采集的时效性

在现场卫生检疫工作中，及时到达现场，及12▲Ⅳ样品采集的代表性或针对性以卫生质量评价为目的的样品采集，影响采样的主要因素是代表性，包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均匀性，以及外部条件等。以查明突发公共卫生事件或疾病爆发流行的原因为目的的样品采集，不要求样品的代表性，强调要有针对性，应根据疾病表现和流行病学调查资料，正确采集病原微生物含量最多的部位和足够检测用的样本。昆虫和动物标本，除自毙鼠外，尽量采集活的，并保持原形，便于鉴定；啮〔nie)齿动物一般装在鼠袋内，盛放昆虫的容器要具有即及既可以透气，又要防止昆虫跑掉。▲Ⅳ样品采集的代表性或针对性13▲Ⅴ样品采集时间和种类根据不同疾病的特点和临床表现，确定采样时间和标本种类：以别离培养细菌为目的作病毒别离和病毒抗原检测的标本尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本，如已使用抗生素，采样和分离培养最好加入相应的中和剂（中和样品中残存的抑菌物质）或进行其他处理，避免抗菌药物对细菌培养的干扰。在发病初期和急性期采样，最好在发病1～2天内采取，此时病毒在体内大量繁殖，检出率高。▲Ⅴ样品采集时间和种类根据不同疾病的特点和临床表现，确定采样14▲Ⅵ样品采集的防污染避免采样引入新的污染或者对微生物有杀灭作用或抑菌作用的物质采样用具、容器需严格灭菌，避免有消毒剂残留，并以无菌操作采样容器要选耐用材料制成，可防渗漏，并能承受空中或地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。▲Ⅵ样品采集的防污染避免采样引入新的污染或者对微生物有杀灭作15▲Ⅶ样品采集的标记样品采集后，应及时标明相关信息样品名称编号采样时间采样量采样者检测工程其他可以识别或适用信息等▲Ⅶ样品采集的标记样品采集后，应及时标明相关信息16▲Ⅷ样品采集后的合理处置和及时送检样品采集后原那么上应及时送检；对病毒样品不能及时送检的，应合理保存：短期保存可以置4℃环境条件下；长期保存必须置-70℃或-70℃以下。▲Ⅷ样品采集后的合理处置和及时送检样品采集后原那么上应及时送17二、采样器具的配置口岸卫生检疫采样包〔箱〕的根本配置要求和内容包括：1、采样箱是采样工具的主体；其配置要易于携带、消毒和密封，有足够的空间可以容纳采集的样品和使用的采样工具，具有要防渗漏、耐受性性能好、环境温度保证功能。包括箱体、冰排、温控设备等。二、采样器具的配置口岸卫生检疫采样包〔箱〕的根本配置要求和内182、采样管、采样瓶、采样袋是盛放样品的主要容器；要易于封口，具有能防破碎、防渗漏功能的可密封容器，可容纳初始样品或样品容器。包括多种型号的样品保存管〔病毒采样管、真空采血管、运送培养基等〕、钢化或塑料瓶、优质包装袋等；接触样品的容器必须干净、无污染。对于卫生学评价可能会需要大容量的容器，可根据需要配置。2、采样管、采样瓶、采样袋是盛放样品的主要容器；要易于封口，193、样品采集的辅助工具：剪刀、镊子、止血带、试子、棉签、碘伏、酒精棉球、生理盐水、不干胶标签、记号笔、钢笔或圆珠笔、记录纸等。4、生物平安防护用品：包括一次性手套、一次性口罩、一次性帽子、一次性鞋套、工作服，隔离服，防护眼镜、免洗洗手液等。3、样品采集的辅助工具：剪刀、镊子、止血带、试子、棉签、碘伏20三、样品采集的方法样品种类很多，结合口岸卫生检疫工作需要，就以下样品的采集和要求进展介绍。1、用于微生物分离培养或抗原检测的样品：主要用于查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因。

1.1呼吸道样品

1.2粪便

1.3血液

1.4尿液

1.5皮肤

1.6尸检组织三、样品采集的方法样品种类很多，结合口岸卫生检疫211.1呼吸道样品呼吸道样品种类有：咽拭子、鼻拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液、气管插管的病人的气管吸取物和痰液等。咽拭子的采集：让患者仰头张口〔适用时可用压舌板压舌〕，将采样拭子适度用力拭抹咽后壁和扁桃体部位，应防止触及舌部，取出后迅速将拭子浸入样品保存液中，在靠近顶端处折断拭子杆，旋紧管盖并密封。

推荐使用的采样拭子为头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），铝或塑料做柄，不推荐棉拭子和木柄。样品管中保存液应根据样品采集的目的配置（如病毒采样液一般为2～3毫升，含有蛋白质、稳定剂、阻止细菌和真菌生长的抗生素和缓冲液）。

1.1呼吸道样品221.1呼吸道样品鼻拭子：用推荐使用的无菌采样拭子〔适用时将生理盐水将拭子沾湿〕，轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭另侧鼻孔。将拭子头浸入样品保存液中，于尾部折断，旋紧管盖并密封。1.1呼吸道样品231.1呼吸道样品鼻腔吸取物/鼻腔冲洗液：适用时，用无菌采集器具收集鼻腔吸取物/鼻腔冲洗液5-10ml放入样品保存液中，旋紧管盖并密封。气管吸取物：必要时，对于气管插管的病人可以采集气管吸取物5-10ml放入样品保存液中，旋紧管盖并密封。痰液：对于肺部感染应采取痰标本，以清晨第一口痰为最正确。采取标本的时间一般在发病的第一日采集，最迟不得超过3日，最好选择体温在38℃以上时采集。洗漱液：必要时，用生理盐水或自配淡盐水约15ml作为洗漱液，让患者咳嗽后，倒入灭菌生理盐水或自配淡盐水约15ml，反复洗漱咽部1分钟；洗漱时让患者头部微后仰，发“噢〞声，让生理盐水在咽部转动。然后直接将洗漱液吐入灭菌容器内。1.1呼吸道样品241.2粪便▲方法对黏液脓血便应挑取黏液或脓血局部;液状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便2～5ml；成形粪便至少取蚕豆大小粪便1块〔约5g〕放于灭菌容器内，最好加有保存液或增菌液;假设无法获得粪便时，可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4～5cm深处〔小儿2～3cm〕轻轻转动一圈，取直肠外表的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检。▲要求同一患者应至少采集2支肛拭；采样时注意勿将尿液或水混入粪便或容器内；采样后尽快塞紧或旋紧容器，所采取的粪便标本应尽快送检，运送时间不得超过2小时，否那么应保存在4～8℃条件下送检；集体腹泻或食源性疾病爆发患者粪便采集，应根据患者人数决定采取标本的数量；尽量在急性腹泻期及用药前采集。1.2粪便▲方法251.3血液血清样品一般使用一次性真空采血管，严格无菌操作，静脉采集全血4-5ml；全血样品一般使用一次性真空采血管，严格无菌操作，静脉采集全血2ml〔内含抗凝剂〕；作血液病原培养时，严格无菌操作采静脉血，一般成人采血10～15ml，儿童2～5ml，婴儿0.5～2ml，放入无菌的参加抗凝剂的有螺口容器或培养瓶中及时送检。1.3血液血清样品一般使用一次性真空采血管，严格无菌操作，静26静脉采血静脉采血271.4尿液主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗外阴部，再以无菌水洗净，一般取首次晨尿的中段尿10～20ml于无菌容器内，最好在2～3小时内送到实验室检测，否那么应在4～8℃条件下保存运送样品。

有时需要采集皮疹或皮肤病变标本帮助诊断。如怀疑皮肤炭疽或淋巴腺鼠疫时可从病变皮肤（焦痂和腹股沟淋巴结）取样做细菌学培养。出现囊疱疹或脓疱疹时可直接从囊疱或脓疱采集液体用于镜检或培养。采集疱疹标本时要注意无菌操作，刺破疱囊后用无菌拭子尽量拭抹足够量的疱疹内液体。

1.5皮肤1.4尿液1.5皮肤281.6尸检组织主要采集肺、气管、心脏、脾、肝、脑、肾和淋巴结等重要器官样品；每种组织应多部位采集，每份样品应采集20-50g，淋巴结2个，分别置于50ml，放入装有相应液体或培养基的无菌容器中，立即送检。如需要采血那么需进展心脏穿刺。1.6尸检组织主要采集肺、气管、心脏、脾、肝、脑、肾和淋巴结292、用于病原体抗体检测的标本2.1血液样品：一般采集急性期和恢复期的血清来检测抗体滴度的变化情况。适用于住院病人；采集时间：第一份血清于入院后24小时内采集；第二份血清于发病后10-14天采集；第三份血清于发病后22-28天或出院当日采集。对于口岸传染病抗体检测的血液样品采集没有特殊要求，按常规要求采集，采集方法如前所述。2.2脑脊液：一般用于临床诊断，要求在无菌条件下，由有经验的医生按腰椎穿刺技术，穿刺抽取3～5ml，放于无菌试管或厌氧瓶内（需厌氧培养时），立即送检；用于病毒培养时在4～8℃最多可维持48小时，否则需在-70℃保存。2、用于病原体抗体检测的标本2.1血液样品：302.1血液样品一般采集急性期和恢复期的血清来检测抗体滴度的变化情况。适用于住院病人；采集时间：第一份血清于入院后24小时内采集；第二份血清于发病后10-14天采集；第三份血清于发病后22-28天或出院当日采集。对于口岸传染病抗体检测的血液样品采集没有特殊要求，按常规要求采集，采集方法如前所述。

一般用于临床诊断，要求在无菌条件下，由有经验的医生按腰椎穿刺技术，穿刺抽取3～5ml，放于无菌试管或厌氧瓶内（需厌氧培养时），立即送检；用于病毒培养时在4～8℃最多可维持48小时，否则需在-70℃保存。

2.2脑脊液2、用于病原体抗体检测的标本2.1血液样品2.2脑脊液2、用于病原体抗体检测的标本313.1空气样品空气采样器有不同的分类方法，种类繁多：→如按流量的不同，采样器可分为大、中、小三类；→根据采样器所用介质性质可分为固体采样器和液体采样器；→根据采样器的工作原理可分为撞击式、沉降式、过滤式、静电吸附式、旋风式和离心撞击式六种。用于检测微生物或化学因子，一般使用空气采样器采集；空气中细菌和真菌可使用平板沉降法。▲平板沉降法由于方法简单，不需要特殊设备，虽然准确性低于仪器法，但仍被广泛应用，采样方法是将琼脂平板置于各采样点，翻开平皿盖，扣放于平皿旁，暴皿于规定时间后立即盖好盖送检；采样布点，室内面积＜30平米时，设内、中、外对角线3点，距墙壁1m，距地面高1.5ml；＞30平米，设4角及中央5点，距墙壁1m，采样高度距地面高1.5m处。3、环境样品：

一般用于检测环境被污染的状况，并对其进行卫生学评价，也可作为食源性疾病、突发公共卫生事件的原因样本。主要是空气、水、土壤样品。3.1空气样品3、环境样品：

一般用于检测环境被污染323.2水样水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水，在疫区还包括稻田、塘水、井水和邻近畜舍、厕所的积水点。采样器具主要有手工采样的采样瓶和自动采样器。▲手工采样：水样瓶用铁架固定，塞住瓶口，待瓶沉入到一定深度时拉开瓶塞，让水样进入。▲自动采样：是用自动采样器在一定间隔时间中或连续采集样品，分别放入样品瓶或合并于一个样品瓶中成为混合样。疫区传染病病原污染的上述水体，采集时最好采非日光直射处的表层水。采集自来水样品时，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒，然后将龙头翻开，放水5～10分钟，再采集水样。采样量可根据工作条件和样品处理方法以及检测要求进展采集，用于化学因子检测的水样盛装容器可以不灭菌，但应彻底清洗干净。3.2水样水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水，在疫区还333.3土壤根据检测目的，选择有代表性的土壤，确定采样地点。按对角穿插〔五点法〕取样；要求：除去地表污物，再铲除1cm左右表层土，用烧灼过的勺或铲取土样约200～300g，装于灭菌容器内，并注意保存适当空间;标明采样地点、深度、日期后送检。3.3土壤344、产品样本：口岸传染病检测涉及到的主要是血液制品，检查是否带有传染性因子；对于食品、化妆品、涉水产品、消毒及卫生用品等，主要用于卫生理化和卫生微生物指标检测，对其进行卫生学评价及产品效果评价。样品采集要求：注意包装的完整性和抽样的随机性。4、产品样本：355、昆虫、动物样品：蚊、蝇等，可用捕虫网和吸蚊器捕捉；蚤类、蜱类可用布旗或毛巾在草丛、灌木、地面上拖动，使它们攀附在布旗或毛巾上；蜱类可用镊子夹入试管内；蚤类可用棉签或毛笔蘸上水粘住，迅速放入试管内；鼠类可用捕鼠器捕捉，死鼠可装入塑料袋内送检。一般蚊、蚤应收集50只以上，蜱不少于20只。6、可疑物品：可在可疑物品表面使用拭子擦拭后，保存于样品保存液中/无菌容器,适用时，也可直接截取适量污染物，保存于样品保存液中/无菌容器。5、昆虫、动物样品：36四、样品的保存和运送1、样品保存1.1检测病原体样品的保存：▲原则：尽量保护待检微生物的属性和注意生物安全。▲微生物属性保护基本要素：→温度：一般低温可增加微生物的存活和抑制杂菌的过度生长，特殊除外。→湿度：→营养：→pH：→抑制杂菌：▲对于口岸卫生检疫样品原则上要求样品采集后立即置4℃环境保存送检，如果不能立即送检，短时间（24小时内）保存应置于4℃冰箱，若在24小时后检测，保存于-70℃冰箱保存。四、样品的保存和运送1、样品保存371.2进行卫生学评价样品的保存:▲原则：样本采集后要根据对温度、湿度的要求分类处理,及时送检。但大多数样本都可以常温下保存，保持原有属性。▲要求：避免污染！主要是环节控制;1.3.化学因子或毒物样品的保存：各类样本要分别盛▲原则：装于密闭容器中，包装固定、安全,冷藏保存，及时送检。多数毒物检验样本对保存的条件不是特别严格，如果需要特殊条件保存的样本要按要求保存，▲要求：防止外泄！1.2进行卫生学评价样品的保存:382、样品运送2.1总体要求：必须应符合生物安全要求，遵循WH0对传染性物质和诊断性标本的安全运送指南（WH0，1997）和《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或标本运输管理规定》（卫生部第45号令）。达到标准的包装方法和材料应能确保即使在运送中包装意外受损时也能保护人员的安全及标本的完整。2.2样品运送的包装要求：使用WHO三级包装系统第一层：装样品，要防渗漏。样品容器应置于带盖的容器（试管）内，容器（试管）上应有明显标记样品的编号或受检者信息。第二层：耐受性好，防渗漏，可以容纳第一层若干个容器。第一层容器与第二层包装之间放置足以吸附可能漏液的吸附材料，能防止第一层容器互相碰撞，对容器启到缓冲作用。第三层：可以容纳若干个第二层包装，防渗漏，保温、防污染，便于运输和消毒的密封容器，在外包装必须有明确的生物危害标识。2、样品运送39口岸样品采集技术及生物安全基础课件40口岸样品采集技术及生物安全基础课件412.3样品运送具体要求：▲Ⅰ地面运送样品：→运送过程必须专人专车；→送样的人必须具有防护及消毒基础知识；→车上应备有能处理突发事件的防护用品（吸水材料、消毒剂、手套、口罩、护目镜、密封防水的废弃物容器等）；→使用专用送样工具；→样品存放环境必须满足要求（短途运送加冰保冷即可；长途运送需加干冰保冷，保持2-8℃的恒温条件）；→样品运送过程中不得将样品转托他人；→在确定样品运送时，将样品运送的时间和运输方式告知接收实验室等；→对于血液样品为避免路途颠簸引起溶血，可在运送前分离血清。2.3样品运送具体要求：42▲Ⅱ空运样品：→完整的包装其整个外部最小尺寸不能小于10cm；→每个包装中标本量不超过4kg或4L（每个原始容器最大500m1）；→每个包装标本中所含的感染物不应超过50g或50ml；→运输标本的外包装必须有明确的标签，标明寄送人和接收人的详细联系方式、包装日期和运输日期等。▲Ⅱ空运样品：43▲Ⅲ样品运送附带的文件：样品的编号、种类、性质、数量、采样日期等详细资料。▲Ⅳ化学因子或毒物样品的运送：→密封包装；→送检的样本要根据对温度、湿度的要求分类处理；特殊条件运送的样本要特殊处理；→运送过程中，要保证条件能够持续保障；→要严防泄漏；→严格按照化学品管理的有关规定及时到公安部门备案；→为防止在运输过程中的意外情况，要制定应急预案；，→专人押运。▲Ⅲ样品运送附带的文件：44五、生物平安根底及样品采集的生物平安防护实验室生物平安和生物平安实验室的生物平安要求，有相关标准标准，如?实验室生物平安通用要求?〔GB19489-2021〕、?病原微生物实验室生物平安管理条例?〔国务院令第424号〕等；针对职业人员在传染病处理过程中的防护，卫生部也有相关的指导原那么，如SARS、禽流感、甲型H1N1期间制定的职业暴露人员防护指导原那么等，其目的都是加强人员的生物平安防护，防止人员暴露和感染。五、生物平安根底及样品采集的生物平安防护实验室生451、根本概念1.1生物平安防护：防止危险生物因子造成人员暴露，向外扩散并导致危害的综合措施。1.2个人防护装备：用防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的的器材和用品。1.3危害程度分级：根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级.危害等级Ⅰ〔低个体危害，低群体危害〕：不会导致安康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。危害等级Ⅱ〔中等个体危害，有限群体危害〕：能引起人或动物发病，但一般情况下对安康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。危害等级Ⅲ(高个体危害，低群体危害)：能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。危害等级Ⅳ〔高个体危害，高群体危害〕：能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物之间传播的病原体。1、根本概念461.4消毒：杀灭或去除传播媒介上病原微生物，使其到达无害化的处理。1.5消毒剂：用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。1.6灭菌：杀灭或去除传播媒介上一切微生物的处理。1.7灭菌剂：可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其到达灭菌要求的制剂。1.8有效氯：有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量(非指消毒剂所含氯量)，其含量用mg/L或%浓度表示。1.4消毒：杀灭或去除传播媒介上病原微生物，使其到达无害化的472、个人防护用品防护服面部及身体保护装备手套鞋/鞋套呼吸防护装备2、个人防护用品防护服483、防护用品的使用方法3.1穿防护用品顺序第一步：戴口罩，一只手托着口罩，扣于面部适当的部位，另一只手将口罩带戴在适宜的部位，压紧鼻夹，紧贴于鼻梁处。在此过程中，双手不接触面部任何部位。第二步：戴帽子，戴帽子时注意双手不接触面部。第三步：穿防护服。第四步：戴上防护眼镜，注意双手不接触面部。第五步：穿上鞋套或胶鞋。第六步：戴上手套〔必要时戴两副手套〕，将手套套在防护服袖口外面。3、防护用品的使用方法3.1穿防护用品顺序493、防护用品的使用方法

3.2．脱掉防护用品顺序第一步：脱去外层手套，一次性手套应将反面朝外，放入黄色塑料袋中，橡胶手套放入消毒液中。第二步：摘下防护镜，放入消毒液中。第三步：脱掉防护服，将反面朝外，放入黄色塑料袋中。第四步：摘下防护帽子，将手指反掏进帽子，将帽子轻轻摘，反面朝外，放入黄色塑料袋中。第五步：摘下防护口罩，一手按住口罩，另一只手将口罩带摘下，放入黄色塑料袋中，注意双手不接触面部。第六步：脱下鞋套或胶鞋，将鞋套反面朝外，放入黄色塑料袋中，将胶鞋放入消毒液中。第七步：脱内层手套，一次性手套应将反面朝外，放入黄色塑料袋中，橡胶手套放入消毒液中。注意：如在脱卸个人防护装备时发现个人防护装备受到潜在污染或受到明显污染时，必须再戴上一副干净的手套后，再脱卸其余装备。3、防护用品的使用方法504、洗手和手消毒方法4.1根本要求是接触确诊病人和疑似病人前后要消毒洗手是接触血液、体液、排泄物、分泌物和被污染的物品后要消毒洗手；是进入和离开隔离病房穿戴防护用品前、脱掉防护用品后要消毒洗手；是在同一病人身上，从污染操作转为清洁操作之间要消毒洗手；是戴手套之前，摘手套之后要消毒洗手。4、洗手和手消毒方法514.2标准洗手方法手消毒后的洗手方法可遵循六步十五秒洗手法。即掌心对掌心搓擦；手指交织掌心对手背搓擦；手指交织掌心对掌心搓；两手互握互搓指背；拇指在长中转动搓擦；指尖在掌心中搓擦。A掌心对掌心搓擦B手指交织掌心对手背搓擦C手指交织掌心对掌心搓擦D两手互握互搓指背E拇指在长中转动搓擦F指尖在掌心中搓擦4.2标准洗手方法524、洗手和手消毒方法4.3手消毒的方法可用0.3—0.5%碘伏消毒液或快速手消毒剂〔异丙醇类、洗必泰-醇、新洁尔灭-醇、70-75%酒精等消毒剂〕按洗手方法，揉搓作用1—3分钟。4、洗手和手消毒方法535、物品消毒处理5.1常用消毒方法▲物理消毒燃烧：高温消毒，终末处理。干烤：140℃，作用时间2-3h。主要用于非一次性器具的消毒。高压蒸汽灭菌消毒：121℃，作用时间20-30分钟〔可根据消毒物品要求设定〕。用于废弃物品消毒处理。紫外线消毒：照射时间30分钟，用于空气、台面消毒。5、物品消毒处理5.1常用消毒方法545、物品消毒处理▲化学消毒化学消毒剂的选择原那么：有效浓度低、作用速度快、性状稳定、配置简便、杀灭效果好、腐蚀性小、残留痕迹易祛除、对人、畜毒性小、价格低廉易运输。主要消毒剂和使用方法包括：→含氯消毒剂：主要是次氯酸钠。〔有效氯500mg/片〕●使用浓度：根据需要配置成2000-5000mg/L水溶液；●作用时间：30分钟以上。●适用范围：5000mg/L次氯酸钠溶液用于废弃污物缸和溢出物、污水、排泄物消毒处理；2000mg/L用于污染台面、器具、地面、墙面或伤口的消毒处理。●评价：使用方便、价格低，有腐蚀作用。→过氧化物消毒剂：主要是过氧乙酸。●使用浓度:将过氧乙酸原液〔A、B〕按比例配置后过夜使用。用于浸泡，配置成0.2-0.4%的水溶液，用于喷雾配置成0.04-0.4%水溶液，用于熏蒸配置成3-5%水溶液。●作用时间：10-30分钟。●适用范围：主要用于污染台面、地面或房间生活用品的消毒；●评价：使用方便，无残毒性，有腐蚀作用。5、物品消毒处理▲化学消毒555、物品消毒处理→醛类消毒剂：主要是甲醛、戊二醛。●使用浓度：用于浸泡配置成4-10%(甲醛)或2-4%〔戊二醛〕水溶液；用于熏蒸直接使用18ml/m2；●作用时间：10-30分钟。●适用于：房间、生活用品消毒；●评价：广谱，稳定性好，耐存放，受有机物影响小，有异味和刺激性。→含碘消毒剂：主要是碘伏●使用浓度：0.5%碘伏成品溶液。●作用时间：1-5分钟。●使用范围：主要用于皮肤、伤口以及餐具消毒处理。●评价：毒性低、易保存，作用快.5、物品消毒处理→醛类消毒剂：主要是甲醛、戊二醛。565、物品消毒处理→乙醇溶液●使用浓度：取无水乙醇配置成70-75%的水溶液或直接使用成品。●作用时间：1-5分钟。●使用范围：主要用于用于皮肤、伤口以及实验室台面、门把手、仪器外表等消毒处理。●评价：毒性低、易保存，作用快。→“84〞消毒液●使用浓度：根据使用要求与按水比例混匀。原液有效氯含量1-1.3%。●使用范围：原液与水1：19比例混匀用于地面、物体外表消毒处理。原液与水1：1比例混匀用于废弃污物缸和溢出物消毒处理。●作用时间：30分钟。●评价：毒性低、易保存，作用快。5、物品消毒处理→乙醇溶液575、物品消毒处理5.2消毒要求▲外表消毒地面：工作完成后对地面进展清洁，必要时，用适宜的消毒液进展拖擦。工作台面：工作完成后用2000mg/L次氯酸钠消毒液或0.3%过氧乙酸溶液或适宜的“84〞消毒液进展抹擦消毒或75%乙醇喷洒消毒。门把手及工作椅凳：每天工作完成后用70-75%乙醇喷洒消毒。仪器外表：适宜时，用70-75%乙醇抹擦消毒。外表污染物：如样品外溢或器皿打破〔翻〕外溢，用5000mg/L次氯酸钠溶液或其他有效消毒剂，由外向内洒于被污染的外表，覆盖整个污染区域，保持30分钟；然后清理干净。用过的清洁器具用后浸于上述消毒液内1小时，清洁的抹布按实验废弃物品处理。样品传递箱：可使用移动紫外线消毒车对物体外表进展消毒或用70-75%乙醇喷洒消毒。5、物品消毒处理5.2消毒要求585、物品消毒处理▲空气消毒工作完成后，对工作环境关闭门窗，用紫外线灯，照射30分钟。▲器具消毒凡直接或间接接触过可疑传染病性样品的器材均视为具有传染性，应进展消毒处理。使用的一次性器具按废气物品处理，不准再次使用。使用的非一次性器具，用后浸入5000mg/L次氯酸钠溶液或其他有效消毒剂浸泡过夜后再清洗消毒处理。贵重仪器局部污染时用75%酒精溶液擦拭。对间接接触样品的采样器具，根据污染情况定期或适时进展有效消毒液浸泡或高压蒸汽消毒处理。5、物品消毒处理▲空气消毒595、物品消毒处理▲废弃物品消毒处理一次性手套、帽子、工作衣、鞋套等使用后放入专用污物袋中封口后，加贴废弃物品处理生物平安标识，集中交由地方废弃物品回收部门销毁处理。一次性采样器材，使用后浸泡于盛有5000mg/L次氯酸钠溶液或其他有效消毒剂的污物缸内消毒处理或直接放入专用污物袋中，然后进展高压蒸汽消毒；消毒处理后的废弃物品，封口后加贴实验室废弃物品处理生物平安标识，集中交由地方废弃物品回收部门销毁处理。所有锋利物品应置于不宜刺破的容器内，消毒后用适宜的方法处理。5、物品消毒处理▲废弃物品消毒处理606、意外事故紧急处理措施▲Ⅰ皮肤被刺伤：立即用肥皂和大量流动的水对局部进展冲洗或用刺激性较轻的含氯创伤消毒剂浸泡皮肤创口；尽可能挤出伤出的血液，用70-75%乙醇或其他消毒剂消毒伤口。▲Ⅱ皮肤污染：用水和肥皂冲洗污染部位，用70%乙醇或其他消毒剂消毒液浸泡处理；如手被污染，可置于次氯酸消毒液或其它消毒液内浸泡片刻，然后用肥皂与清水刷洗干净。▲Ⅲ样品或检测试剂溅入眼内立即大量用生理盐水冲洗。▲Ⅳ样品或检测试剂溅入嘴内先吐出残留的液体后，用水或1g/L高锰酸钾溶液屡次反复漱口。6、意外事故紧急处理措施▲Ⅰ皮肤被刺伤：立即用肥皂和大量616、意外事故紧急处理措施▲Ⅴ衣物被污染时，应立即将工作服小心脱下，用高压灭菌消毒处理。▲Ⅵ发生传染性物质外漏〔洒于桌面或地上〕时，应立即在污染区周围倒入2000-5000mg/L次氯酸消毒液或其他有效消毒剂，由外围逐渐向中心消毒处理，待半小时后，清理干净；如果发生大面积污染时，根据严重程度，确定消毒程序后立即处理。▲Ⅶ遇有高危的意外事故发生，除进展局部处理外，同时应立即采取预防措施，并对其进展随访。按相关标准要求执行。▲Ⅷ发生重大意外事故时，在紧急处理的同时，请教相关专家，按专家的意见进展处理，对造成重大人员伤害的，立即送往医疗机构救治。6、意外事故紧急处理措施▲Ⅴ衣物被污染时，应立即将工作服62THANKSFORYOURATTENTION!THANKSFORYOURATTENTION!63口岸样品采集技术及生物平安根底口岸样品采集技术及生物平安根底64现场卫生检疫查验现场采样样品保存样品运输技术验证执法有效性安全防护安全操作不确定现场卫生现场采样样品保存样品运输技术验证执法有效性安全防护安65一、样品采集的目的、作用和原那么二、采样器具的配置三、样品采集的方法四、样品的保存和运送五、生物平安根底及样品采集的生物平安防护一、样品采集的目的、作用和原那么66一、样品采集的目的、作用和原那么1、目的:一是查明突发公共卫生事件或疾病爆发流行的原因；二是进展卫生质量监测和评价。2、作用:一是查明传染源，提供可靠技术支持；二是通过检测分析，积累技术资料；提高科研水平。一、样品采集的目的、作用和原那么1、目的:67一、样品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么▲Ⅰ制定详细样品采集方案：根据口岸卫生检疫疫情和可疑遭受生物袭击的现场情况，确定样品采集的范围和种类；按采样点的多少组成假设干采样小组，并准备好必要的采样器材和保存液；每个采样小组最少由两人组成，便于采样时互相协作。一、样品采集的目的、作用和原那么3、根本原那么68表1根据检测目的拟选择的样品种类检测目的样品选择检测抗体血液、呼吸道分泌物、唾液、脑脊液、可疑物等检测抗原血液、呼吸道分泌物、唾液、脑脊液、粪便、组织、可疑物等分离病原血液、各种拭子标本、含漱液、粪便、尿液、脑脊液、疱疹液、空气采样标本、各种卫生评价样品等检测核酸血液、粪便、尿液等各种分离病毒用标本表1根据检测目的拟选择的样品种类检测抗体血液、呼吸道分泌69表2根据临床症状拟选择的样品种类临床症状样品选择发热、呼吸道症状鼻咽拭子、含漱液、痰、双份血清等高热、周身疼痛鼻咽拭子、含漱液、痰、双份血清等神经症状脑脊液、脑组织、双份血清等出血性症状血液、胸水、尿、粪便、双份血清等黄胆血液、肝组织、尿、双份血清等出疹、痘脓疱液、痂、双份血清等表2根据临床症状拟选择的样品种类发热、呼吸道症状鼻咽拭子70▲Ⅱ样品采集和处置的生物平安：主要是通过个人防护和废弃物品的合理处置，到达在采样中防止造成人员感染、标本和环境的污染。样品采集前样品采集时样品采集后▲Ⅱ样品采集和处置的生物平安：样品采集前样品采集时样品采集后71样品采集前充分做好的个人生物平安防护准备。包括：个人的安康状况确认平安防护用品准备应急处置用品准备样品采集人员是否有皮肤破损，是否患有免疫力低下的疾病或其他高危状况。主要包括防护口罩、面罩或眼罩、帽子、乳胶手套、防护服、防护鞋套等。配置急救包，供意外暴露时应急使用。样品采集前充分做好的个人生物平安防护准备。包括：个人的安72样品采集时根据所估计的疫情级别，选择不同的防护服和相关防护用品，按生物平安防护要求佩戴和进展样品采集操作；如疑心有高度传染力的病原，需使用连体式隔离防护服、呼吸面罩、防护目镜、N95级防护口罩和双层乳胶手套等。对接触不同患者，在样品采集时不应重复使用一副手套，以免穿插感染，并注意检查手套的平安性。样品采集时根据所估计的疫情级别，选择不同的防护服和相关防护用73样品采集后及时消毒处理使用过的防护用品及时消毒污染区表面和溢出物污染的废弃物品必须进行无害化消毒后废弃样品采集后及时消毒处理使用过的防护用品及时消毒污染区表面和溢74▲Ⅲ样品采集的时效性

在现场卫生检疫工作中，及时到达现场，及时采集到有价值的样品，是及时检验、及时诊断、及时处置的重要前提；尤其是一些应急突发公共卫生事件更应注重其时效性。有时样品采集的迅速及时比完整还要重要，如对外界标本的采集，要在消毒或处理之前；疑似病人的样品采集，要在发病初期或使用抗生药物或治疗之前采集等。▲Ⅲ样品采集的时效性

在现场卫生检疫工作中，及时到达现场，及75▲Ⅳ样品采集的代表性或针对性以卫生质量评价为目的的样品采集，影响采样的主要因素是代表性，包括采样量、采样部位、采样时间、采样的随机性和均匀性，以及外部条件等。以查明突发公共卫生事件或疾病爆发流行的原因为目的的样品采集，不要求样品的代表性，强调要有针对性，应根据疾病表现和流行病学调查资料，正确采集病原微生物含量最多的部位和足够检测用的样本。昆虫和动物标本，除自毙鼠外，尽量采集活的，并保持原形，便于鉴定；啮〔nie)齿动物一般装在鼠袋内，盛放昆虫的容器要具有即及既可以透气，又要防止昆虫跑掉。▲Ⅳ样品采集的代表性或针对性76▲Ⅴ样品采集时间和种类根据不同疾病的特点和临床表现，确定采样时间和标本种类：以别离培养细菌为目的作病毒别离和病毒抗原检测的标本尽量在急性发病期和使用抗生素之前采集标本，如已使用抗生素，采样和分离培养最好加入相应的中和剂（中和样品中残存的抑菌物质）或进行其他处理，避免抗菌药物对细菌培养的干扰。在发病初期和急性期采样，最好在发病1～2天内采取，此时病毒在体内大量繁殖，检出率高。▲Ⅴ样品采集时间和种类根据不同疾病的特点和临床表现，确定采样77▲Ⅵ样品采集的防污染避免采样引入新的污染或者对微生物有杀灭作用或抑菌作用的物质采样用具、容器需严格灭菌，避免有消毒剂残留，并以无菌操作采样容器要选耐用材料制成，可防渗漏，并能承受空中或地面运送过程中可能发生的温度和压力变化。▲Ⅵ样品采集的防污染避免采样引入新的污染或者对微生物有杀灭作78▲Ⅶ样品采集的标记样品采集后，应及时标明相关信息样品名称编号采样时间采样量采样者检测工程其他可以识别或适用信息等▲Ⅶ样品采集的标记样品采集后，应及时标明相关信息79▲Ⅷ样品采集后的合理处置和及时送检样品采集后原那么上应及时送检；对病毒样品不能及时送检的，应合理保存：短期保存可以置4℃环境条件下；长期保存必须置-70℃或-70℃以下。▲Ⅷ样品采集后的合理处置和及时送检样品采集后原那么上应及时送80二、采样器具的配置口岸卫生检疫采样包〔箱〕的根本配置要求和内容包括：1、采样箱是采样工具的主体；其配置要易于携带、消毒和密封，有足够的空间可以容纳采集的样品和使用的采样工具，具有要防渗漏、耐受性性能好、环境温度保证功能。包括箱体、冰排、温控设备等。二、采样器具的配置口岸卫生检疫采样包〔箱〕的根本配置要求和内812、采样管、采样瓶、采样袋是盛放样品的主要容器；要易于封口，具有能防破碎、防渗漏功能的可密封容器，可容纳初始样品或样品容器。包括多种型号的样品保存管〔病毒采样管、真空采血管、运送培养基等〕、钢化或塑料瓶、优质包装袋等；接触样品的容器必须干净、无污染。对于卫生学评价可能会需要大容量的容器，可根据需要配置。2、采样管、采样瓶、采样袋是盛放样品的主要容器；要易于封口，823、样品采集的辅助工具：剪刀、镊子、止血带、试子、棉签、碘伏、酒精棉球、生理盐水、不干胶标签、记号笔、钢笔或圆珠笔、记录纸等。4、生物平安防护用品：包括一次性手套、一次性口罩、一次性帽子、一次性鞋套、工作服，隔离服，防护眼镜、免洗洗手液等。3、样品采集的辅助工具：剪刀、镊子、止血带、试子、棉签、碘伏83三、样品采集的方法样品种类很多，结合口岸卫生检疫工作需要，就以下样品的采集和要求进展介绍。1、用于微生物分离培养或抗原检测的样品：主要用于查明突发公共卫生事件或疾病暴发流行的原因。

1.1呼吸道样品

1.2粪便

1.3血液

1.4尿液

1.5皮肤

1.6尸检组织三、样品采集的方法样品种类很多，结合口岸卫生检疫841.1呼吸道样品呼吸道样品种类有：咽拭子、鼻拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液、气管插管的病人的气管吸取物和痰液等。咽拭子的采集：让患者仰头张口〔适用时可用压舌板压舌〕，将采样拭子适度用力拭抹咽后壁和扁桃体部位，应防止触及舌部，取出后迅速将拭子浸入样品保存液中，在靠近顶端处折断拭子杆，旋紧管盖并密封。

推荐使用的采样拭子为头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），铝或塑料做柄，不推荐棉拭子和木柄。样品管中保存液应根据样品采集的目的配置（如病毒采样液一般为2～3毫升，含有蛋白质、稳定剂、阻止细菌和真菌生长的抗生素和缓冲液）。

1.1呼吸道样品851.1呼吸道样品鼻拭子：用推荐使用的无菌采样拭子〔适用时将生理盐水将拭子沾湿〕，轻轻插入鼻道内鼻腭处，停留片刻后缓慢转动退出。以同一拭子拭另侧鼻孔。将拭子头浸入样品保存液中，于尾部折断，旋紧管盖并密封。1.1呼吸道样品861.1呼吸道样品鼻腔吸取物/鼻腔冲洗液：适用时，用无菌采集器具收集鼻腔吸取物/鼻腔冲洗液5-10ml放入样品保存液中，旋紧管盖并密封。气管吸取物：必要时，对于气管插管的病人可以采集气管吸取物5-10ml放入样品保存液中，旋紧管盖并密封。痰液：对于肺部感染应采取痰标本，以清晨第一口痰为最正确。采取标本的时间一般在发病的第一日采集，最迟不得超过3日，最好选择体温在38℃以上时采集。洗漱液：必要时，用生理盐水或自配淡盐水约15ml作为洗漱液，让患者咳嗽后，倒入灭菌生理盐水或自配淡盐水约15ml，反复洗漱咽部1分钟；洗漱时让患者头部微后仰，发“噢〞声，让生理盐水在咽部转动。然后直接将洗漱液吐入灭菌容器内。1.1呼吸道样品871.2粪便▲方法对黏液脓血便应挑取黏液或脓血局部;液状粪便采集水样便或含絮状物的液状粪便2～5ml；成形粪便至少取蚕豆大小粪便1块〔约5g〕放于灭菌容器内，最好加有保存液或增菌液;假设无法获得粪便时，可用保存液或增菌液湿润过的棉拭子插入肛门4～5cm深处〔小儿2～3cm〕轻轻转动一圈，取直肠外表的黏液后取出，盛入运送培养基或保存液中送检。▲要求同一患者应至少采集2支肛拭；采样时注意勿将尿液或水混入粪便或容器内；采样后尽快塞紧或旋紧容器，所采取的粪便标本应尽快送检，运送时间不得超过2小时，否那么应保存在4～8℃条件下送检；集体腹泻或食源性疾病爆发患者粪便采集，应根据患者人数决定采取标本的数量；尽量在急性腹泻期及用药前采集。1.2粪便▲方法881.3血液血清样品一般使用一次性真空采血管，严格无菌操作，静脉采集全血4-5ml；全血样品一般使用一次性真空采血管，严格无菌操作，静脉采集全血2ml〔内含抗凝剂〕；作血液病原培养时，严格无菌操作采静脉血，一般成人采血10～15ml，儿童2～5ml，婴儿0.5～2ml，放入无菌的参加抗凝剂的有螺口容器或培养瓶中及时送检。1.3血液血清样品一般使用一次性真空采血管，严格无菌操作，静89静脉采血静脉采血901.4尿液主要采用中段尿采集法，先用肥皂水清洗外阴部，再以无菌水洗净，一般取首次晨尿的中段尿10～20ml于无菌容器内，最好在2～3小时内送到实验室检测，否那么应在4～8℃条件下保存运送样品。

有时需要采集皮疹或皮肤病变标本帮助诊断。如怀疑皮肤炭疽或淋巴腺鼠疫时可从病变皮肤（焦痂和腹股沟淋巴结）取样做细菌学培养。出现囊疱疹或脓疱疹时可直接从囊疱或脓疱采集液体用于镜检或培养。采集疱疹标本时要注意无菌操作，刺破疱囊后用无菌拭子尽量拭抹足够量的疱疹内液体。

1.5皮肤1.4尿液1.5皮肤911.6尸检组织主要采集肺、气管、心脏、脾、肝、脑、肾和淋巴结等重要器官样品；每种组织应多部位采集，每份样品应采集20-50g，淋巴结2个，分别置于50ml，放入装有相应液体或培养基的无菌容器中，立即送检。如需要采血那么需进展心脏穿刺。1.6尸检组织主要采集肺、气管、心脏、脾、肝、脑、肾和淋巴结922、用于病原体抗体检测的标本2.1血液样品：一般采集急性期和恢复期的血清来检测抗体滴度的变化情况。适用于住院病人；采集时间：第一份血清于入院后24小时内采集；第二份血清于发病后10-14天采集；第三份血清于发病后22-28天或出院当日采集。对于口岸传染病抗体检测的血液样品采集没有特殊要求，按常规要求采集，采集方法如前所述。2.2脑脊液：一般用于临床诊断，要求在无菌条件下，由有经验的医生按腰椎穿刺技术，穿刺抽取3～5ml，放于无菌试管或厌氧瓶内（需厌氧培养时），立即送检；用于病毒培养时在4～8℃最多可维持48小时，否则需在-70℃保存。2、用于病原体抗体检测的标本2.1血液样品：932.1血液样品一般采集急性期和恢复期的血清来检测抗体滴度的变化情况。适用于住院病人；采集时间：第一份血清于入院后24小时内采集；第二份血清于发病后10-14天采集；第三份血清于发病后22-28天或出院当日采集。对于口岸传染病抗体检测的血液样品采集没有特殊要求，按常规要求采集，采集方法如前所述。

一般用于临床诊断，要求在无菌条件下，由有经验的医生按腰椎穿刺技术，穿刺抽取3～5ml，放于无菌试管或厌氧瓶内（需厌氧培养时），立即送检；用于病毒培养时在4～8℃最多可维持48小时，否则需在-70℃保存。

2.2脑脊液2、用于病原体抗体检测的标本2.1血液样品2.2脑脊液2、用于病原体抗体检测的标本943.1空气样品空气采样器有不同的分类方法，种类繁多：→如按流量的不同，采样器可分为大、中、小三类；→根据采样器所用介质性质可分为固体采样器和液体采样器；→根据采样器的工作原理可分为撞击式、沉降式、过滤式、静电吸附式、旋风式和离心撞击式六种。用于检测微生物或化学因子，一般使用空气采样器采集；空气中细菌和真菌可使用平板沉降法。▲平板沉降法由于方法简单，不需要特殊设备，虽然准确性低于仪器法，但仍被广泛应用，采样方法是将琼脂平板置于各采样点，翻开平皿盖，扣放于平皿旁，暴皿于规定时间后立即盖好盖送检；采样布点，室内面积＜30平米时，设内、中、外对角线3点，距墙壁1m，距地面高1.5ml；＞30平米，设4角及中央5点，距墙壁1m，采样高度距地面高1.5m处。3、环境样品：

一般用于检测环境被污染的状况，并对其进行卫生学评价，也可作为食源性疾病、突发公共卫生事件的原因样本。主要是空气、水、土壤样品。3.1空气样品3、环境样品：

一般用于检测环境被污染953.2水样水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水，在疫区还包括稻田、塘水、井水和邻近畜舍、厕所的积水点。采样器具主要有手工采样的采样瓶和自动采样器。▲手工采样：水样瓶用铁架固定，塞住瓶口，待瓶沉入到一定深度时拉开瓶塞，让水样进入。▲自动采样：是用自动采样器在一定间隔时间中或连续采集样品，分别放入样品瓶或合并于一个样品瓶中成为混合样。疫区传染病病原污染的上述水体，采集时最好采非日光直射处的表层水。采集自来水样品时，先用酒精灯将水龙头烧灼消毒，然后将龙头翻开，放水5～10分钟，再采集水样。采样量可根据工作条件和样品处理方法以及检测要求进展采集，用于化学因子检测的水样盛装容器可以不灭菌，但应彻底清洗干净。3.2水样水样来源主要是河水、湖水、地下水和自来水，在疫区还963.3土壤根据检测目的，选择有代表性的土壤，确定采样地点。按对角穿插〔五点法〕取样；要求：除去地表污物，再铲除1cm左右表层土，用烧灼过的勺或铲取土样约200～300g，装于灭菌容器内，并注意保存适当空间;标明采样地点、深度、日期后送检。3.3土壤974、产品样本：口岸传染病检测涉及到的主要是血液制品，检查是否带有传染性因子；对于食品、化妆品、涉水产品、消毒及卫生用品等，主要用于卫生理化和卫生微生物指标检测，对其进行卫生学评价及产品效果评价。样品采集要求：注意包装的完整性和抽样的随机性。4、产品样本：985、昆虫、动物样品：蚊、蝇等，可用捕虫网和吸蚊器捕捉；蚤类、蜱类可用布旗或毛巾在草丛、灌木、地面上拖动，使它们攀附在布旗或毛巾上；蜱类可用镊子夹入试管内；蚤类可用棉签或毛笔蘸上水粘住，迅速放入试管内；鼠类可用捕鼠器捕捉，死鼠可装入塑料袋内送检。一般蚊、蚤应收集50只以上，蜱不少于20只。6、可疑物品：可在可疑物品表面使用拭子擦拭后，保存于样品保存液中/无菌容器,适用时，也可直接截取适量污染物，保存于样品保存液中/无菌容器。5、昆虫、动物样品：99四、样品的保存和运送1、样品保存1.1检测病原体样品的保存：▲原则：尽量保护待检微生物的属性和注意生物安全。▲微生物属性保护基本要素：→温度：一般低温可增加微生物的存活和抑制杂菌的过度生长，特殊除外。→湿度：→营养：→pH：→抑制杂菌：▲对于口岸卫生检疫样品原则上要求样品采集后立即置4℃环境保存送检，如果不能立即送检，短时间（24小时内）保存应置于4℃冰箱，若在24小时后检测，保存于-70℃冰箱保存。四、样品的保存和运送1、样品保存1001.2进行卫生学评价样品的保存:▲原则：样本采集后要根据对温度、湿度的要求分类处理,及时送检。但大多数样本都可以常温下保存，保持原有属性。▲要求：避免污染！主要是环节控制;1.3.化学因子或毒物样品的保存：各类样本要分别盛▲原则：装于密闭容器中，包装固定、安全,冷藏保存，及时送检。多数毒物检验样本对保存的条件不是特别严格，如果需要特殊条件保存的样本要按要求保存，▲要求：防止外泄！1.2进行卫生学评价样品的保存:1012、样品运送2.1总体要求：必须应符合生物安全要求，遵循WH0对传染性物质和诊断性标本的安全运送指南（WH0，1997）和《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或标本运输管理规定》（卫生部第45号令）。达到标准的包装方法和材料应能确保即使在运送中包装意外受损时也能保护人员的安全及标本的完整。2.2样品运送的包装要求：使用WHO三级包装系统第一层：装样品，要防渗漏。样品容器应置于带盖的容器（试管）内，容器（试管）上应有明显标记样品的编号或受检者信息。第二层：耐受性好，防渗漏，可以容纳第一层若干个容器。第一层容器与第二层包装之间放置足以吸附可能漏液的吸附材料，能防止第一层容器互相碰撞，对容器启到缓冲作用。第三层：可以容纳若干个第二层包装，防渗漏，保温、防污染，便于运输和消毒的密封容器，在外包装必须有明确的生物危害标识。2、样品运送102口岸样品采集技术及生物安全基础课件103口岸样品采集技术及生物安全基础课件1042.3样品运送具体要求：▲Ⅰ地面运送样品：→运送过程必须专人专车；→送样的人必须具有防护及消毒基础知识；→车上应备有能处理突发事件的防护用品（吸水材料、消毒剂、手套、口罩、护目镜、密封防水的废弃物容器等）；→使用专用送样工具；→样品存放环境必须满足要求（短途运送加冰保冷即可；长途运送需加干冰保冷，保持2-8℃的恒温条件）；→样品运送过程中不得将样品转托他人；→在确定样品运送时，将样品运送的时间和运输方式告知接收实验室等；→对于血液样品为避免路途颠簸引起溶血，可在运送前分离血清。2.3样品运送具体要求：105▲Ⅱ空运样品：→完整的包装其整个外部最小尺寸不能小于10cm；→每个包装中标本量不超过4kg或4L（每个原始容器最大500m1）；→每个包装标本中所含的感染物不应超过50g或50ml；→运输标本的外包装必须有明确的标签，标明寄送人和接收人的详细联系方式、包装日期和运输日期等。▲Ⅱ空运样品：106▲Ⅲ样品运送附带的文件：样品的编号、种类、性质、数量、采样日期等详细资料。▲Ⅳ化学因子或毒物样品的运送：→密封包装；→送检的样本要根据对温度、湿度的要求分类处理；特殊条件运送的样本要特殊处理；→运送过程中，要保证条件能够持续保障；→要严防泄漏；→严格按照化学品管理的有关规定及时到公安部门备案；→为防止在运输过程中的意外情况，要制定应急预案；，→专人押运。▲Ⅲ样品运送附带的文件：107五、生物平安根底及样品采集的生物平安防护实验室生物平安和生物平安实验室的生物平安要求，有相关标准标准，如?实验室生物平安通用要求?〔GB19489-2021〕、?病原微生物实验室生物平安管理条例?〔国务院令第424号〕等；针对职业人员在传染病处理过程中的防护，卫生部也有相关的指导原那么，如SARS、禽流感、甲型H1N1期间制定的职业暴露人员防护指导原那么等，其目的都是加强人员的生物平安防护，防止人员暴露和感染。五、生物平安根底及样品采集的生物平安防护实验室生1081、根本概念1.1生物平安防护：防止危险生物因子造成人员暴露，向外扩散并导致危害的综合措施。1.2个人防护装备：用防止人员受到化学和生物等有害因子伤害的的器材和用品。1.3危害程度分级：根据生物因子对个体和群体的危害程度将其分为4级.危害等级Ⅰ〔低个体危害，低群体危害〕：不会导致安康工作者和动物致病的细菌、真菌、病毒和寄生虫等生物因子。危害等级Ⅱ〔中等个体危害，有限群体危害〕：能引起人或动物发病，但一般情况下对安康工作者、群体、家畜或环境不会引起严重危害的病原体。实验室感染不导致严重疾病，具备有效治疗和预防措施，并且传播风险有限。危害等级Ⅲ(高个体危害，低群体危害)：能引起人或动物严重疾病，或造成严重经济损失，但通常不能因偶然接触而在个体间传播，或能用抗生素抗寄生虫药治疗的病原体。危害等级Ⅳ〔高个体危害，高群体危害〕：能引起人或动物非常严重的疾病，一般不能治愈，容易直接、间接或因偶然接触在人与人，或动物与人，或人与动物，或动物与动物之间传播的病原体。1、根本概念1091.4消毒：杀灭或去除传播媒介上病原微生物，使其到达无害化的处理。1.5消毒剂：用于杀灭传播媒介上的微生物使其达消毒或灭菌要求的制剂。1.6灭菌：杀灭或去除传播媒介上一切微生物的处理。1.7灭菌剂：可杀灭一切微生物(包括细菌芽孢)使其到达灭菌要求的制剂。1.8有效氯：有效氯是衡量含氯消毒剂氧化能力的标志，是指与含氯消毒剂氧化能力相当的氯量(非指消毒剂所含氯量)，其含量用mg/L或%浓度表示。1.4消毒：杀灭或去除传播媒介上病原微生物，使其到达无害化的1102、个人防护用品防护服面部及身体保护装备手套鞋/鞋套呼吸防护装备2、个人防护用品防护服1113、防护用品的使用方法3.1穿防护用品顺序第一步：戴口罩，一只手托着口罩，扣于面部适当的部位，另一只手将口罩带戴在适宜的部位，压紧鼻夹，紧贴于鼻梁处。在此过程中，双手不接触面部任何部位。第二步：戴帽子，戴帽子时注意双手不接触面部。第三步：穿防护服。第四步：戴上防护眼镜，注意双手不接触面部。第五步：穿上鞋套或胶鞋。第六步：戴上手套〔必要时戴两副手套〕，将手套套在防护服袖口外面。3、防护用品的使用方法3.1穿防护用品顺序1123、防护用品的使用方法

3.2．脱掉防护用品顺序第一步：脱去外层手套，一次性手套应将反面朝外，放入黄色塑料袋中，橡胶手套放入消毒液中。第二步：摘下防护镜，放入消毒液中。第三步：脱掉防护服，将反面朝外，放入黄色塑料袋中。第四步：摘下防护帽子，将手指反掏进帽子，将帽子轻轻摘，反面朝外，放入黄色塑料袋中。第五步：摘下防护口罩，一手按住口罩，另一只手将口罩带摘下，放入黄色塑料袋中，注意双手不接触面部。第六步：脱下鞋套或胶鞋，将鞋套反面朝外，放入黄色塑料袋中，将胶鞋放入消毒液中。第七步：脱内层手套，一次性手套应将反面朝外，放入黄色塑料袋中，橡胶手套放入消毒液中。注意：如在脱卸个人防护装备时发现个人防护装备受到潜在污染或受到明显污染时，必须再戴上一副干净的手套后，再脱卸其余装备。3、防护用品的使用方法1134、洗手和手消毒方法4.1根本要求是接触确诊病人和疑似病人前后要消毒洗手是接触血液、体液、排泄物、分泌物和被污染的物品后要消毒洗手；是进入和离开隔离病房穿戴防护用品前、脱掉防护用品后要消毒洗手；是在同一病人身上，从污染操作转为清洁操作之间要消毒洗手；是戴手套之前，摘手套之后要消毒洗手。4、洗手和手消毒方法1144.2标准洗手方法手消毒后的洗手方法可遵循六步十五秒洗手法。即掌心对掌心搓擦；手指交织掌心对手背搓擦；手指交织掌心对掌心搓；两手互握互搓指背；拇指在长中转动搓擦；指尖在掌心中搓擦。A掌心对掌心搓擦B手指交织掌心对手背搓擦C手指交织掌心对掌心搓擦D两手互握互搓指背E拇指在长中转动搓擦F指尖在掌心中搓擦4.2标准洗手方法1154、洗手和手消毒方法4.3手消毒的方法可用0.3—0.5%碘伏消毒液或快速手消毒剂〔异丙醇类、洗必泰-醇、新洁尔灭-醇、70-75%酒精等消毒剂〕按洗手方法，揉搓作用1—3分钟。4、洗手和手消毒方法1165、物品消毒处理5.1常用消毒方法▲物理消毒燃烧：高温消毒，终末处理。干烤：140℃，作用时间2-3