临床检验标准化实验室完整SOP程序文件

PAGE精品文档精心整理精品文档可编辑的精品文档一、检验科检测项目标准操作规程（见附录）A、临检室A1、血常规检验标准操作规程A2、嗜酸性粒细胞直接计数标准操作规程A3、红细胞沉降率测定标准操作规程A4、血型鉴定标准操作规程A5、尿常规标准操作规程A6、一小时尿沉渣计数标准操作规程A7、尿乳糜定性检查标准操作规程A8、大便常规标准操作规程A9、虫卵及包囊浓缩检查标准操作规程A10、隐血试验标准操作规程A11、脑脊液检验标准操作规程A12、浆膜腔积液检查标准操作规程A13、精液检查标准操作规程A14、前列腺液检查标准操作规程A15、阴道分泌物检查标准操作规程A16、胃液检查标准操作规程B、生化室B1、血氨测定标准操作规程B2、17-KS测定标准操作规程B3、17-OH测定标准操作规程B4、VMA标准操作规程B5、InsulinAutoantibadies(IAA)胰岛素自身抗体标准操作规程B6、IsletCellAutoantibodies(ICA)胰岛细胞自身抗体标准操作规程B7、脯氨酸肽酶测定(ProlidaseTestKit)标准操作规程B8、I型糖尿病检测（诊断酶联试剂盒）标准操作规程B9、血清Ⅳ胶原蛋白（PANASSAYⅣ．C）标准操作规程B10、血清蛋白电泳标准操作规程B11、N-乙酰葡萄糖苷酶(NAG)标准操作规程B12、腺苷脱氨酶(ADA)标准操作规程B13、尿肌酸测定标准操作规程B14、肌钙蛋白(TNT)测定标准操作规程B15，肿瘤相关物质测定标准操作规程C、免疫室、发光、放免室C1、HAVAbIgM标准操作规程C2、PreS1标准操作规程C3、HBSAg标准操作规程C4、HBSAb标准操作规程C5、HBEAg标准操作规程C6、HBcAb标准操作规程C7、HBcAbIgM标准操作规程C8、HCVIgG标准操作规程C9、HCVIgM标准操作规程C10、HDVAg标准操作规程C11、HDVIgG标准操作规程C12、HDVIgM标准操作规程C13、HEVAbIgG标准操作规程C14、HEVAbIgM标准操作规程C15、HGVAb标准操作规程C16、TTV-IgG标准操作规程C17、寒冷凝集反应标准操作规程C18、ENA多肽抗体谱标准操作规程C19、ANA标准操作规程C20、ds-DNA标准操作规程C21、幽门螺杆菌抗体标准操作规程C22、嗜异性凝集试验标准操作规程C23、肥达氏反应标准操作规程C24、胰岛素测定标准操作规程标准操作规程C25、C肽测定标准操作规程标准操作规程C26、胰高血糖素测定标准操作规程标准操作规程C27、α1-微球蛋白测定标准操作规程C28、β2-微球蛋白测定标准操作规程C29、THP-蛋白测定标准操作规程C30、抗TG，TM抗体测定标准操作规程C31、抗INS-抗体测定标准操作规C32、人III型前胶原放射免疫测定标准操作规程C33、逶明质酸放免测定标准操作规程C34、Ⅳ型胶原放免测定标准操作规程C35、内皮素放免测定标准操作规程C36、肺肿瘤标记CY21-1放免测定标准操作规程C37、T3T4TSHFT3FT4测定标准操作程序（SOP）C38、AFP、CEA、Fer、BR、OV、GI、PSA、fPSA，Ca-125，Ca-199，Ca-153测定标准操作程序（SOP）C39、HCG、PRL、FSH、LH、E2、P(孕酮)、T(睾酮)测定标准操作程序（SOP）C40、铁蛋白、叶酸、VitB12测定标准操作程序（SOP）C41、CKMB、cTnI、MYO测定标准操作程序（SOP）C42、IgE测定标准操作程序（SOP）C43、地高辛、茶碱、皮质醇、卡马西平、苯巴比妥、苯妥英钠，丙戊酸，安定，环胞霉素标准操作程序C44、DPD测定标准操作程序（SOP）C45、过敏原测定标准操作程序D、血液、骨髓室、FCMD1、D-二聚体标准操作规程D2、3P试验标准操作规程D3、骨髓细胞学检查标准操作规程D4、过氧化物酶(POX)染色标准操作规程D5、苏丹黑B(SBB)染色标准操作规程D6、中性粒细胞碱性磷酸积分(NAP)染色改良GOmorI氏钙钴法标准操作规程D7、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)染色偶氮偶联法标准操作规程D8、糖原(PAS)染色标准操作规程D9、酯酶染色中性非特异性脂酶(α-NAE)染色标准操作规程D10、铁染色标准操作规程D11、酸性磷酸酶(ACP)染色标准操作规程D12、红细胞渗透脆性试验标准操作规程D13、自体溶血试验标准操作规程D14、血清酸化溶血试验(Ham试验)标准操作规程D15、热溶血试验(定性)标准操作规程D16、蔗糖溶血试验(糖水试验)标准操作规程D17、变性珠蛋白小体检查(Heinz小体染色)标准操作规程D18、血浆游离血红蛋白测定标准操作规程D19、淋巴细胞亚群测定标准操作规程D20、HLAB27/HLAB7测定标准操作规程D21、活化细胞亚群测定标准操作规程D22、活化血小板测定标准操作规程D23、APO2.7测定标准操作规程D24、CD25/CD3测定标准操作规程D25、MDR(P—gP)多药耐药基因）测定标准操作规程D26、TdT(MRD白血病残留病灶)测定标准操作规程D27、血小板糖蛋白测定标准操作规程D28、CD23(Ige低亲和力受体)测定标准操作规程D29、CD95/Fas测定标准操作规程D30、FCM试剂配制标准操作规程D31、Bcl-2测定标准操作规程D32、ANNEXIN

V

测定标准操作规程D33、P53测定标准操作规程D34、λ链测定标准操作规程D35、CD55测定标准操作规程D36、血小板抗体测定（PAIgG，PAIgM，PAIgA）标准操作规程D37、DNA测定标准操作规程D38、干细胞CD34测定标准操作规程D39、CD34+细胞绝对计数标准操作规程D40、纤溶酶原激活剂抑制物（PAI）活性测定(发色底物法)标准操作规程D41、组织型纤溶酶原激活剂（t-PA）活性测定（发色底物法）标准操作规程D42、血管性假血友病因子(vWF)含量测定（ELISA）标准操作规程E、细菌室E1、革兰氏阴性鉴定卡及药敏卡（GNI及GNS卡的操作步骤）标准操作规程E2、革兰氏阳性鉴定卡及药敏卡（GPI及GPS卡的操作步骤）标准操作规程E3、酵母菌鉴定卡(YBC卡)标准操作规程二、检验科工作流程图各实验室接收各类标本并核对各实验室接收各类标本并核对定期检验标本当天检验标本特殊结果或疑难结果，报各实验室组长签发报告实验室技术主管核准质控及分析结果记录仪器有关参数室内质控结果室内质量控制调整各类仪器运行状态检验分析按要求处理标本、存放贴条码编号，并处理标本

定期检验标本当天检验标本特殊结果或疑难结果，报各实验室组长签发报告实验室技术主管核准质控及分析结果记录仪器有关参数室内质控结果室内质量控制调整各类仪器运行状态检验分析按要求处理标本、存放贴条码编号，并处理标本住院病人就诊检验流程医生在电脑网络中申请检验项目医生在电脑网络中申请检验项目申请、填写检验申请输入电脑网络各类穿刺液等各类穿刺液等护士工作站打印条码粘贴护士工作站打印条码粘贴大小便血液大小便血液嘱病人按要求留取标本穿刺标本按要求处理嘱病人按要求留取标本穿刺标本按要求处理按有关要求抽取血液样本按有关要求抽取血液样本 送回各病房并签收各实验室检验后签发报告单具体实验室进行检验检验科各实验室签收

送回各病房并签收各实验室检验后签发报告单具体实验室进行检验检验科各实验室签收门诊病人就诊检验流程病人就诊卡病人就诊卡医生填写检验申请单输入电脑网络医生填写检验申请单输入电脑网络病人持就诊卡到收费处、记帐或交费病人持就诊卡到收费处、记帐或交费体液大小便血液标本检验体液大小便血液标本检验到相应科室取标本病人留取标本病人凭就诊卡到门诊抽血中心刷卡打印条码，按有关要求抽血，嘱到相应科室取标本病人留取标本病人凭就诊卡到门诊抽血中心刷卡打印条码，按有关要求抽血，嘱病人取报告时间体液实验室或相关部门体液实验室或相关部门取回报告各实验室检验后并签发报告各实验室检验后并签发到医生处诊疗取回报告

三、检验科各项规章制度取回报告各实验室检验后并签发报告各实验室检验后并签发到医生处诊疗取回报告生物安全制度1、医务人员1）每1—２年做体检一次，并接受乙肝疫苗接种。2）每1—2年检查乙肝病毒抗原抗体水平，发现乙型肝炎者应进行隔离治疗。3）检验人员进入实验室应穿好工作服，不允许在实验室进食和吸烟。4）检验人员在工作前后和被污染后，应用肥皂和流水清洗，必要时由消毒液浸泡双手，每季度抽查检验人员的手，并做细菌培养一次。2、环境消毒隔离1）实验室应分为清洁区和操作区，清洁区要注意保护不受污染。操作有气溶胶可能的标本应配置生物安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气扇等操作区的工作台及地面每日用消毒液擦拭一次，有污染时随时消毒，每周大扫除一次。2）采血室每日操作前用清水擦拭操作台一次，采血结束用消毒液擦拭操作台、桌子和地面一次，紫外线每日照射消毒一次，每月空气细菌培养一次，紫外线强度定期测定。并做记录。3、各种检验标本的收集，送检必须用相应指定的容器留取，不得外溢污染。4、静脉及末稍采血，应严格执行消毒隔离措施，静脉抽血做到一人一针一筒一巾一带一消毒，所用止血带及纸垫每日消毒，末稍采血一人一片一管，杜绝交叉污染。5、一次性医用器具包括采血针，注射器、尿杯、血红蛋白微量吸血吸管，应严格做好领发登记，注射器先浸泡消毒后由供应室一对一调换，统一处理，其余一次性器具浸泡消毒后装入污物袋送焚烧炉焚烧。6、检验人员在进行静脉抽血时应严格遵守无菌操作技术，操作前必须洗手必须戴好帽子与口罩，操作台和手被污染时应用肥皂和流水认真洗手，必要时用消毒液浸泡双手，酒精、碘酒瓶每周更换消毒两次。7、凡是肝炎病人和透析病人的血液标本及疑有黄疸的血标本，都视为肝炎的污染标本，应贴上红色危险标记，放在规定区域内，引起警惕和防止扩大污染面。8、溢出试管外的血液，应立即用碘酒棉签擦拭干净，注意防止玻璃碎片刺伤手，并注意试管有无破裂。9、当针头和碎玻璃刺伤手时,用流水冲洗,挤出血水,应立即用碘酒消毒局部。10、实验室操作时应戴上手套。吸取标本，离心振荡等应严格按操作规程，防止自身和实验室受污染。11、已检查标本与容器分别浸泡于施康1号消毒液(2000mg/L)中两小时后，标本倾弃，一次性容器送焚烧，重复使用的经清洗消毒和灭菌后再使用，均要有记录。有毒化学试剂和放射性试剂使用后要经无害化处理，防止污染环境。12、菌种、毒种按《传染病防治法》进行管理。13、三级医院必须设置清洁区，污染区，操作有气溶胶可能的标本应配置生物安全柜及其它防护设置，如紫外线灯，排气扇等。14、非科室工作人员不准进入实验室，外来人员参观需经科主任同意方可进入 质量管理制度1、各专业实验室根据省临检中心的有关规定，开展实验室内的质量控制，并制定有关措施。对室內质控应每日有记录，对失控情况有纠正方法，有预防性措施，对于目前尚无完整的室内质控体系的实验室，应积极创造条件，建立室内质量控制体系。2、各专业实验室必须参加部、省的各次室间质控活动，对每次质控评价应有记录。3、计量仪器（包括分析天平，天平、分光光度计等）应定期校正，每年一次。4、大型分析仪器必须专人负责，有使用维修记录。5、商品化的试剂盒的申购由各专业室的组长负责申报，每月一次报科主任审批，不得使用过期，无批准文号的劣质试剂，进货统一由科室管理，自配试剂须严格校正后方可使用。6、各专业实验室必须建立完整的操作程序，并应严格按程序执行。7、当日发出的全部检验报告单须经当日科室总值班人员严格审核后方可发出。8、科室在完成严格的室内、室间质量控制体系的同时，应逐步建立全面质量控制体系，对标本的采集，运送，保存等纳入严格的管理之中。每日送检的标本应签收。9、急诊检验应严格按照急诊制度执行。安全制度1、菌种、毒种、剧毒品及贵重仪器物品指定专人保管、有防盗措施，建立帐册，记录进出数量，定期检查制度。剧毒药品专人保管，由科室主任，主管试剂的同志负责，放保险柜，领用时须有主管同志在场，作好领用登记。2、易燃物品专柜存放，普通试剂按常规分类存放，并由科室主任和主管试剂同志负责，注意用电安全，特别是电炉子、大烤箱、火焰光度计，由各科使用同志负责安全，严防火灾。对工作中可能发生的触电、失火、玻璃割伤、针头刺伤、烧伤、不慎中毒、传染性标本的污染，各实验室应有应急处理的方法，有关人员均应熟悉。4、用电设备、电源线路、CO2气体、给排水系统的安全性符合使用要求，不能带电检修仪器。5、使用强酸碱腐蚀品时，应在适当的环境下正确操作，防止腐蚀、灼伤、中毒、火灾和爆炸等事件发生。注意安全，随手随时关门，下班时要做好水，电，门的安全保卫工作，防火防盗防水。7、科室安全保卫负责：郑军（四）试剂管理制度1、各专业实验室应根据各自的工作需要，按月向科主任申报所购试剂，并应做到及时盘存清点，入库做到心中有数。2、所有试剂的申请，进货一律由科室统一管理，严格按市卫生局招标要求执行，做到三证齐全。无三无产品。3、各专业实验室应对试剂库存定期检查，不使用过期变质的试剂。4、自配试剂须以严格校正后方可使用。5、试剂的保存应严格按照要求，以保证有效期内能有效地使用，杜绝浪费现象。6、试剂外借一律须经科主任同意方可执行。7、剧毒试剂必须由科主任和负责科室保卫的同志负责保存，放保险箱内，使用时应有两人在场，并做好登记。8、易燃，易爆试剂应分开存放远离火源和电源。9、供应商所送的试剂必须先经药库清点才能接受，检验科人员清点后必须在货单上签字，有出入者必须向科主任或试剂管理员、组长报告，再将货单交给试剂管理员，以便月底结帐。10、科室试剂管理员：钟梁。（五）实习生管理制度1、科室按实习大纲安排实习时间表，如遇特殊情况科室统一安排。2、实习生必须服从实习单位和科室的直接管理，遵守实习单位的规章制度，参加实习单位的政治、业务学习和有关活动、会议。3、实习生必须加强医德医风修养，文明行医，礼貌待人，主动热情为病人服务。4、实习生应在指导老师指导下进行实习和工作，一切实验结果均须指导老师签名后方能发出报告。不得擅自签名发出报告，指导老师应严格把关逐步培养学生独立工作能力。5、严格请假制度，学生一般情况下不得请事假，节假日按国家法定给与准假，请假一律写报告，一天内经指导老师同意，科主任批准，报告交俞北伟老师登记，三天内经医教科批准，三天以上经学校批准。6、实习生必须准时上班，不迟到早退，要有严格的实习作风，不得离岗，为了培养学生的应急处理能力，实习生必须每天晚上轮流跟班（6.00-9.00）7、实习生必须严格保护实验仪器和公物，科室贵重仪器必须在指导老师具体指导下进行操作。（六）标本管理制度一、标本采集按每个项目要求，告诉病人、病房护士或本室采血人员最佳采血时间、采血前空腹或饮食注意、用药情况、活动情况、体位等。2、明确抗凝剂种类、抗凝剂与血的比例、抽血时注意事项。3、体液、分泌物、细菌培养标本按要求留足量、及时送检。标本运送运送过程中，原则上带盖（不能用棉花等吸水物品），以防倒翻和溢出或雨淋。凡含传染源的标本必须带盖，外套尼龙袋，以防溢出而污染环境。不能剧烈振荡，以防标本溶血和有形成分破坏。必须及时送检。标本接收必须认真核对标本上病人姓名、病区、床号、联号与申请单符合。必须观察标本的量、标本类型、是否抗凝或有小凝块、细菌培养标本是否符合无菌要求。是否有明显溶血或脂浊。不符要求的标本，必须及时填写退回理由单，及时反馈临床。标本检测在检测每一过程中，都应复核标本接收过程中的每一步骤。在标本足够的情况下，不能浪费、随意丢弃或损坏标本。标本储存当天不能完成的标本，必须分离血清，按要求储存在2℃-8℃当天检测完成的标本，血常规储存在2℃-8℃3天以上，生化免疫储在2℃-8特殊标本按要求保存。标本处理检验标本先用含2-3g/L有效氯消毒灵浸泡半小时，再煮沸清洗试管，烘干备用。用双层专用黄色医用垃圾袋专人收集所有废弃医用垃圾。送专门存放医用垃圾处统一处理。并做好登记。.七．外单位标本外单位送检的样本,一律由服务台同志登记后,再转交各实验室检测。实验室保留原始申请单。八、多张检验单标本凡有两张以上的检验申请单(包括其他实验室或外送兄弟医院)原则上要分装各管,随检验申请单一起分别放置各样本盒,对采样困难者要主动跟踪样本,并作详细记录以免漏检,分清责任。附录：检验科检测项目标准操作规程A、检室A1、血常规检验（1）标本用EDTA-K20.2ul抗凝静脉血1ml,门诊病人在CD-1700仪器上做三分类测定,住院病人在COULTERHMX仪器上做五分类测定。（2）试剂及仪器COULTERHMX五分类血球分析仪及配套试剂，质控用COULTER4CPLUS全血质控品，COULTERHMX五分类血分析仪及配套试剂，质控用COULTER5C全血质控品。（血液细胞自动化分析仪介绍）（3）操作门诊：收到血常规标本后，查看核对检验项目，立即编号，放混匀器上混匀3分钟。如有血型立即用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。血标本在ABBOTCD-1700上检测，结果入库。对于中间细胞比较多的应当手工涂片染色分类，对于血小板等图形不好或结果异常较大的应手工复查。结果核对后，在半小时内报告。病房：采集血常规标本后，立即编号，试管加盖后放于专用试管架上放入HMX上自动混匀，如有血型用玻片法和试管法测定血型，输入电脑。血标本在COULTERHMX上机检测，结果入库。对于分类图形不好的结果应当手工涂片染色分类，对于血小板等结果图形不好或结果异常较大的应手工复查。（复查条件）结果核对后，签发报告单。如果急诊则电话报告，有血型的话，通知病房来拿报告单。（血液项目）（4）项目代号中文名单位WBC白细胞计数×109/LLY%(LY)淋巴细胞分类%MO%单核细胞分类%NE%(GR)中性细胞分类%LY#淋巴细胞计数×109/LMO#单核细胞计数×109/LNE#中性细胞计数×109/LRBC红细胞计数×1012/LHGB血红蛋白g/LHCT红细胞压积MCV平均红细胞体积flMCH平均红细胞血红蛋白含量pgMCHC平均红细胞血红蛋白浓度g/LRDW红细胞分布宽度PLT血小板计数×109/LMPV平均血小板体积flPCT血小板比积%PDW血小板分布宽度EO%嗜酸性细胞分类%BO%嗜碱性细胞分类%EO#嗜酸性细胞计数×109/LBO#嗜碱性细胞计数×109/L（5）特殊规定在检验血常规时,科室所有工作人员及同志如发现以下样本结果过高可过低,务必作登记,复查和及时报告,以备查询。1.血红蛋白低于100g/L.2.白细胞低于3000/ul.3.血小板低于8万/ul.4.发现白细胞分类异常图形时.5.发现其中一项过高时,或是临床指定要镜检时.（6）临床意义（6．1）WBC计数参考范围4-10×109/L1、增加(l)生理性：初生儿、妊娠末期、分娩期、经期、饭后、剧烈运动后、冷水浴后及极度恐惧与疼痛等。(2)病理性：大部分化脓性细菌所引起的炎症、尿毒症、严重烧伤、传染性单核细胞增多症、传染性淋巴细胞增多症、急性出血、组织损伤、手术创伤后、白血病等。2．减少病毒感染、伤寒、副伤寒、黑热病、疟疾、再生障碍性贫血、极度严重感染、X线及镭照射、肿瘤化疗后、非白血性白血病等。（6．2）白细胞分类计数(6.2.1)染色液1.瑞氏—姬姆萨复合染色液I液取瑞氏染粉lg、姬姆萨染粉1g，加入甲醇(分析纯)，充分振摇，第二天加甘油10ml,混匀Ⅱ液pH6．4—6．8磷酸盐缓冲液（或用H2O替代缓冲液）磷酸二氢钾(无水)6．648磷酸氢二钠(无水)2．56g加少量蒸馏水溶解，用磷酸盐调整pH，加水至1000ml。染色置玻片于染色架上，滴加染液3—5滴，使其迅速盖满血膜，约1min后，滴加缓冲液5一10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混和，5一10min后用水冲去染液，待干。或染色液盖满血片后半分钟即可水洗镜检。2．快速染色液I液:磷酸二氢钾6．648磷酸氢二钠2．56g水溶性伊红Y4g(或伊红B2．5g)蒸馏水1000ml石炭酸40ml煮沸，待冷备用。Ⅱ液亚甲蓝4g蒸馏水1000m1高锰酸钾2．48g煮沸，待冷备用。染色把干燥血片浸入快速染色液的I液中30s，水洗，再浸入Ⅱ液30s，水洗待干。注：本染色法除了能快速用于急症外，对玻片质量要求也不高。随着染液多次使用，可适当延长染色时间或更换新液。3．30s快速单一染色液贮存液瑞氏染粉2．0g姬姆萨染粉0．68天青E0．6g甘油10．0ml聚乙烯D比咯烷酮(PVP)20．0g甲醇1000mI磷酸盐缓冲液(pH6.2-6．8)磷酸二氢钾6．648磷酸氢二钠0．268石炭酸4．0ml蒸馏水加至1000mI应用液l液、2液按3：1比例混合放置14天后备用。染色将染液铺满血膜或将血片浸入染色缸内，30s后用自来水冲洗。注：加表面活性剂PVP可增加染料的溶解度并起稳定作用，加入天青E可缩短染色时间。(6.2.2)参考范围LY:18．7％-47％LY#：(1．0—3．3)×109／LMO:3．5％-7．9％MO#：(0．2—0．7)×109／LGR:46．0％一76．5％GR#：(1．8—6．4)×109／L1．增多(l)中性粒细胞：急性化脓感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后、尿毒症、酸中毒、急性汞中毒、急性铅中毒等。(2)嗜酸性粒细胞：变态反应、寄生虫病、某些皮肤病、某些血液病、手术后、烧伤等。(3)嗜碱性粒细胞：慢性粒细胞白血病、何杰金病、癌转移、铅及铋中毒等。(4)淋巴细胞：百日咳、传染性单核细胞增多症、慢性淋巴细胞白血病、麻疹、腮腺炎、结核、传染性肝炎等。(5)单核细胞：结核、伤寒、亚急性感染性心内膜炎、疟疾、黑热病、单核细胞白血病、急性传染病的恢复期等。2．减少(l)中性粒细胞：伤寒、副伤寒、疟疾、流感、化学药物中毒、X线和镭照射、抗癌药物化疗、极度严重感染、再障、粒细胞缺乏等。(2)嗜酸性粒细胞：伤寒、副伤寒以及应用肾上腺皮质激素后。(3)淋巴细胞：多见于传染病急性期、放射病、细胞免疫缺陷等。（6.3）常见的异常白细胞形态的变化在外周血象中，除了各类白血病幼稚细胞外，通常能见到一些细胞形态上的异常变化。(6.3.1)中性粒细胞1．核象变化：反映中性粒细胞的成熟程度。正常血象中有少量杆状核细胞出现，它与分叶核细胞之间的比值约占1：13。(1)核左移：是指杆状核细胞增多，常见于感染。如晚幼粒、中幼粒等细胞增多为核象极度左移，多见于类白血病反应或白血病。①伴白细胞总数增高的核左移：称再生性左移，常见于急性化脓性感染，如大叶性肺炎等。②白细胞总数不增加或减低的核左移：称退行性左移，常见于严重感染、机体抵抗力低下时，如伤寒、伴感染中毒性休克的败血症等。(2)核右移：是指不仅分叶核粒细胞增多，且分叶过多，常见4叶、5叶(正常时多分3叶)，这是造血功能衰退或造血物质缺乏的表现。常见于营养性巨幼细胞性贫血和使用抗代谢药物后。此外，在疾病进行期突然出现核象右移，表示预后不良。2.毒性变化：严重感染、恶性肿瘤、各种重金属或药物中毒、大面积烧伤等症时，中性粒细胞可出现形态变异。(l)细胞大小不均：为骨髓内幼稚粒细胞发生不规则的分裂增殖所致。(2)毒性颗粒：胞浆中部分或全部颗粒变粗，着色深，颗粒的分布及大小不等。可能为中性颗粒成熟过程中发生变性所致。(3)空泡：可在胞浆或核中出现，常为多个，被认为是细胞脂肪变性后未能着色所致。(4)Dohle体：脑浆内出现嗜碱性点、线、梨形或云雾状物质，可能为核浆发育不平衡所致，为细胞严重毒性变的表现。(5)核棘突：胞核有各种形态的芽状突出，临床意义尚不明确，可能与中毒、癌转移、严重放射损伤等有关。3.退行性变：表现为胞体肿大，结构模糊，边缘不清。胞核可呈固缩、肿胀、破碎、溶解等变化，退行变可以是细胞衰老死亡的表现。(6.3.2)淋巴细胞淋巴细胞形态变异在多种疾病如各种病毒感染、传染性单核细胞增多症最为常见。此外，疟疾、过敏性疾病、淋巴结炎等亦可见，统称为异型淋巴细胞。传染性单核细胞增多症患者血液中常可出现3种异型淋巴细胞，即空泡型、不规则型和幼稚型。（6.4）血红蛋白[参考值]男:120-160g/L女:110-150g/L（6.5）红细胞分布宽度RDW为反映红细胞体积异质性的参数，常以所测得红细胞体积大小的变异系数(CV％)来表示。它比血涂片上红细胞形态大小不均的观察更为客观、准确。RDW增大时有临床意义。(l)用于缺铁性贫血(IDA)的诊断与疗效观察：缺铁性贫血时RDW增大，尤其是MCV尚处于参考值范围时(缺铁性贫血时MCV应下降)RDW增大更是早期缺铁的指征；MCV减小时，RDW增大更为显著，当给予铁剂治疗有效时，RDW将比给药前更大，以后逐渐降至正常水平。产生这种现象的原因，主要是因补铁后产生网织红细胞，及正常红细胞生成并释放人血与给药前的小红细胞并存，故RDW先增大，随着正常红细胞的增多和小红细胞的减少，RDW便逐渐降至参考范围。(2)用于小细胞低色素性贫血的鉴别诊断：IDA和轻型地中海性贫血时，MCV均可减小。但IDA时RDW增大，而轻型地中海性贫血时RDW正常。(3)用于贫血的分类(Bessman分类法)：MCV只能反映红细胞平均体积的大小，不能代表红细胞体积大小的异质性，对红细胞体积大小的评价，过去靠血涂片上红细胞形态的观察，这种观察常受血涂片制作以及观察者的主观因素的影响较大，而且不能定量，RDW能较好地反映红细胞体积的异质性，把MCV和RDW结合用于对贫血的分类将更为完善(表l—l—2)。表l-1-2BessmanMCV／RDW贫血分类类别MCVRDW正常→→缺铁性贫血↓↑巨幼细胞性贫血↑↑溶血性贫血↑↑铁粒幼细胞贫血→↑再生障碍性贫血→→单纯小细胞性贫血↓→注：→无变化;↑增大;↓减少（6.6）平均血小板体积MPV的临床意义要结合PLT变化才有价值。(1)鉴别血小板减少的原因：①当骨髓造血功能损伤致血小板减少时，MPV减少；②当血小板在周围血液中破坏增多时，导致血小板减少，MPV增大；③血小板分布异常致血小板减少时，MPV正常。(2)MPV增大可作为骨髓造血功能恢复的较早期指征：骨髓造血功能衰竭时，MPV与PLT同时持续下降；造血功能抑制越严重，功能恢复时，MPV增大常先于PI。T升高。MPV越小；当造血(3)其他方面应用：①MPV增大：见于骨髓纤维化、原发性血小板减少性紫痰(ITP)、血栓性疾病及血栓前状态、脾切除、慢粒、巨大血小板综合征、镰刀细胞性贫血等。②MPV减小：见于脾亢、化疗后、再障、巨幼细胞性贫血等。（6.7）.血小板比积(plateletcrit，PCT)参考范围男0．108％-0．272％女0．114％一0．282％PCT与PLT和MPV正相关，所以PLT、MPV的增减均可使PCT发生变化。增高：见于骨髓纤维化、脾切除、慢粒等。减低：见于再障、化疗后、血小板减少症等。（6.8）血小板体积分布宽度(plateletvolumedistributionwidth，PDW)参考范围0．155-0．181(15．5％-18．1％)(以血小板体积变异系数CV％表示)PDW是反映血小板体积大小的异质性参数。增大：急非淋化疗后、巨幼细胞性贫血、慢粒、脾切除、巨大血小板综合征、血栓性疾病等。（6.9）血细胞体积分布直方图的应用(l)红细胞体积分布直方图：将MCV和RDW配合直方图分析，可直接观察红细胞体积的分布情况。①只现一个峰：见于正常人、缺铁性贫血(峰左移)、巨幼细胞性贫血(峰右移)。②可现两个峰：缺铁性贫血给予铁剂治疗有效时，可出现一个小红细胞峰和另一个正红细胞(或网织红细胞)峰。巨幼(红)细胞性贫血给予叶酸、维生素Bl2治疗有效时亦可见两个峰。(2)白细胞体积分布直方图：静脉血比毛细管血白细胞数量略低。中档的血细胞分析仪一般为三分群，它是根据加入溶血剂后，白细胞膜通透性改变而发生皱缩，不同类型的白细胞皱缩后体积有明显差别，每个皱缩白细胞通过血细胞分析仪的微孔时产生的脉冲信号经放大、甄别后，微机处理数据得到其体积分布直方图。淋巴细胞群为35—90fI大小中间细胞群为90一160fl大小粒细胞群为160—450fI大小三群细胞的百分比与白细胞数量的乘积为其绝对数正常人白细胞体积分布直方图，可见两个明显分离的峰，左峰为小细胞群(淋巴细胞)，右峰为大细胞群(粒细胞)，两峰之间为中间细胞群的分布。急性白血病时，由于异常的原始、幼稚细胞增多，可见中间细胞明显增高，这时直方图上见一个峰，峰值常在90一160fl之间。这时必须推片染色镜检。(3)血小板体积分布直方图：正常人血小板体积主要分布在2—20fl之间，21—30fI之间有少量大血小板，一般仪器以30fI为最大的分析界标。血小板体积增大时，直方图会出现明显拖尾现象。有小红细胞或红细胞碎片干扰时，直方图尾部会抬高。（6.10）三种红细胞参数平均值的计算1、原理根据红细胞、血红蛋白浓度和红细胞比积，计算红细胞平均容量、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度，用作贫血的形态学分类。2、计算方法（1）平均红细胞体积(meancorpuscularvolume，MCV)：是指每个红细胞的平均体积，以飞升(fI)为单位。每L血液中红细胞体积(L)×1015MCV＝──────────────＝××fl每L血液红细胞数(个)（2）平均红细胞血红蛋白含量(meanCorpuscularhemoglobin，MCH)：是指每个红细胞内所含血红蛋白的平均量，以皮克(pg)为单位。每L血液中血红蛋白浓度(g)×1012MCH＝──────────────＝××pg每L血液红细胞数(个)（3）平均红细胞血红蛋白浓度(meanCorpuscularhemoglobinconcentration，MCHC)：是指平均每L红细胞中所含血红蛋白浓度(g/L)。每L血液中血红蛋白g数(g/L)MCHC＝──────────────＝××g/L每L血液红细胞比积(L/L)3、临床意义正常人和各型贫血时红细胞平均参考值表平均值MCH(pg)MCV(fl)MCHC(g/L)正常27-3182-95320-360大细胞性贫血↑↑-正常细胞性贫血单纯小细胞性贫血↓↓-小细胞低色素性贫血↓↓↓注：-正常;↑增大;↓减少（6.11）红细胞参数1、红细胞(redbloodceII，RBC)男(4．0-5．5)×1012／L女(3．5-5．0)×1012／L2、血红蛋白(hemoglobin，HGB)男120一160g／L女l10-150g／L3、红细胞比积(hematocrit，HCT)男0．40—0．50(40％一50％)女0．35—0．45(35％一45％)

A2、嗜酸性粒细胞直接计数[标本]EDTA-K210ul抗凝静脉血1ml[原理]手工法血液中嗜酸性粒细胞在含有伊红的低渗溶液中被染成红色，而红细胞及其他白细胞破裂或溶解。仪器法（VCS原理）[试剂]手工法嗜酸性粒细胞直接计数的稀释液种类较多，各有一定的优缺点，尚待大家继续实验，找出最佳配方。下列3种稀释液供参考。1．Hinkelmann液伊红0．2g95％石炭酸0．5m140％甲醛0．5ml蒸馏水加到100m12．乙醇—伊红稀释液90％乙醇30ml甘油10ml碳酸钾lg枸橼酸钠0．5g20g几伊红液10ml蒸馏水加至100m1本配方背景清晰，嗜酸性粒细胞着色鲜明，缺点是含10％甘油，比较粘稠，细胞不易混匀，故计数前必须充分振摇。3．伊红—丙酮稀释液20g/L伊红液5mI丙酮5mI蒸馏水90ml新鲜配制效果好，每周配1次。仪器法COULTERHMX五分类血细胞仪及专用试剂[操作]手工法1．小试管中加稀释液0．38mI。2．常法取末梢血20μl，加入管内混匀，待红细胞溶解后两侧充池。3．静置3—5min，用低倍镜(必要时用高倍镜)镜下计数10个大方格内嗜酸性粒细胞数。仪器法操作同血常规[计算]10个大方格内嗜酸性粒细胞数×20×lO＝嗜酸性粒细胞/L[参考值](50-300)×106／L(50-300／μl)[附注]l.血液稀释后应于1h内计数完毕，否则嗜酸性粒细胞会逐渐被破坏，使结果偏低或不易辨认。2.充池前要充分混匀，但又不宜用力过猛，特别是使用含甘油的稀释液要适当延长混匀时间。3.注意与中性粒细胞区别,以免误认,中性粒细胞一般不着色,但也有着浅红色的,其颗粒较小。4．住院病人采标本时间力求统一，以免受日间生理变化的影响。5．用白细胞总数与分类百分率求得的绝对值不如直接计数结果准确。[临床意义]1．直接计数主要用于观察传染病预后、手术和烧伤病人的预后及测定肾上腺皮质功能。2．其他变化的临床意义同白细胞分类计数中嗜酸性粒细胞的增减。

A3、红细胞沉降率测定[标本]200ul枸橼酸钠抗凝静脉血1.1ml，颠倒混匀。[原理]离体抗凝血液置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内，垂直立于室温中，一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。[仪器及试剂]MONITORJI血沉仪、专用血沉管109mmoI／L(32g/L)枸橼酸钠溶液：取含二分子结晶水的枸橼酸钠(分子量294．12)3．28，用蒸馏水溶解，稀释至100ml。此液在室温保存不得超过2周。[操作]1．专用血沉管1支，加抗凝剂0．2ml。2．静脉采血后，取下针头，加血至刻度，颠倒混匀。3．用血沉管(300mm×2．5mm)吸取上述混匀血液至“0”刻度处，拭去管外附着的血液，将血沉管直立在血沉架上。（MONITORJI操作）4．记时，室温中静置lh，读出血沉仪上的读数即是血沉值。[参考值]男:＜15mm／60min女：＜20mm／60min[附注]1．红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。2．要求(l)标本采集时避免脂肪血。(2)血液和抗凝剂比例要准确。(3)血沉管内径要标准(2．5mm)，放置要垂直。(4)做血沉的标本要在采集后3h内测定，并充分混匀。3．室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。为此，血沉应尽量放在18—25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。[临床意义]增快：(l)生理性：年幼小儿、经期、妊娠3个月至产后1个月。(2)病理性：急性炎症、结缔组织病、活动性结核、风湿热活动期、组织严重破坏、贫血、恶性肿瘤、高球蛋白血症、重金属中毒等。

A4、血型鉴定（1）ABO血型鉴定根据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或／和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或／和抗—B。[试剂和材料]1．抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清，制备方法见本节附注；2．5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3．受检者血清；4．受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。[方法]1．试管法(1)取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。(2)另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。(3)立即以1000r／min离心lmin。(4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。(5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。(6)凝集强度判断标准4十红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3十红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。2十红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。1十肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞土镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞MF混合凝集外观(mixedfield)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。一表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。2．玻片法(1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。(2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。(3)将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。如以玻片作试验时，也可用低倍镜观察结果。[结果判定]ABO血型正反定型结果分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞抗-A抗-B抗-A十BA细胞B细胞O细胞十─十A─十──十十B十一────O十十─十十十AB───注：十为凝集；一为─不凝集。[附注]1．分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。2．试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤1次，以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。3．试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。4．操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。5．按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20—24℃)内进行试验，37℃可使反应减弱。6．离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。7．观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。8．判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。[正反定型结果不一致的原因]有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种：1.分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高，可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。2．红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显，误判为阴性反应。3．受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性肿瘤：以及类B或cisAB等。4．受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症)，或实验时温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。5．受检者血清中缺乏应有的抗-A及或抗—B抗体，如丙种球蛋白缺乏症。6．各种原因引起的红细胞溶解，误判为不凝集。部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体.7．由细菌污染或遗传因素引起多凝集或全凝集往往是正反定型不符的原因。8．血清中有意外抗体，如自身抗—I，常引起干扰。9．老年人血清中抗体水平大幅度下降正反定型结果不一致的解决办法如发现ABO正反定型结果不一致，先要重复作试验1次。严格执行操作规程，使用质量合格的试剂以及细心观察和解释试验结果，就可解决明显的问题，对一些疑难问题月必须进一步研究。[检查步骤]1．另从受检者采取l份新鲜血液标本这样可以纠正因污染或搞错样本造成的不符合。2．将红细胞洗涤数次，配成5％盐水细胞悬液，用抗—A、抗—B、抗—Al，抗—A十B及抗H做试验可以得到其它有用的信息。3．对受检红细胞作直接抗球蛋白试验，如结果呈阳性，表示红细胞已被抗体致敏。4．用Al、Az、B、O红细胞及自身红细胞检查受检血清。如果怀疑是抗—I，用O型(或ABO相合的)脐血红细胞检查。5．如果试验结果未见凝集，应将细胞及血清试验至少在室温和4℃放置30min，用显微镜检查核实。6．如疑为A抗原或B抗原减弱，则可将受检红细胞与抗—A或抗—B血清作吸收及放散试验以及受检者唾液作A、B、H血型物质测定。后者只对80％HAB分泌型的人有用。7．如试验结果红细胞呈绢钱状排列，加等渗盐水l滴，混和，往往可使绢钱现象消失。应注意不应先加盐水l滴于受检者血清中而后和红细胞作试验，以免使血清中抗体被稀释。8．如受检者为A型血而疑为有类B抗原时，可用下列方法进行鉴别：(1)观察细胞与抗—A及抗—B的凝集强度，与抗—A的反应要比与抗—B的反应强。这种区别用玻片法作试验更为明显。(2)用受检者红细胞与自身血清作试验，血清中的抗—B不凝集自身红细胞上的类B抗原。(3)检查唾液中是否有A、B物质，如果是分泌型，可检出A物质而无B物质。(4)核对患者的诊断，类B抗原的形成与结肠癌、直肠癌、革兰阴性杆菌感染有关。9．如发现多凝集现象，应考虑由遗传产生的Cad抗原活性；被细菌酶激活的T或丁K受体；或产生机制不太明了的丁n受体所引起。多凝集红细胞具有以下特点：(1)能被人和许多家兔的血清凝集。(2)能与大多数成年人的血清凝集，不管有无相应的同种抗体。(3)不被脐带血清凝集。(4)通常不与自身的血清凝集。

A5、尿常规（1）尿液标本处理[收集]1．应留取新鲜尿，以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件恒定，便于对照。急诊患者可随时留取。2．使用清洁有盖容器(一次性容器为好)。3．容器上应贴上检验条码。4．尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入。此外，还应注意避免烟灰、糖纸等异物混入。5．标本留取后，应及时送验，以免细菌繁殖、细胞溶解等。6．尿胆原等化学物质可因光分解或氧化而减弱。[防腐与保存]1．冷藏：防腐剂随检验目的而定，一般放4℃冰箱可保存6h。2．甲醛：用于管型、细胞的防腐，按400g儿甲醛0．5ml／100ml尿加入。由于甲醛具有还原性，不适于尿糖等化学成分检查。3．甲苯(或二甲苯)：用于尿糖、尿蛋白的防腐，按甲苯0．5ml／100m1尿加入。4．麝香草酚：用于检查尿中化学成分及细菌的防腐剂，每100ml加入＜0．18。[标本处理]收到门诊标本后，核对检验项目后，倒入普通长试管内。液面距管中约1cm收到病房标本后，核对检验项目后，倒入普通长试管内约10ml。液面距管中约1cm，放于UF-100专用试管架上。[检验后处理]标本检验后，必须经过消毒处理后才能排放入下水道内。所用盛尿容器及试管等须经30—50g儿漂白粉澄清液或10g/L次氯酸钠液中浸泡2h，也可用5g／L过氧乙酸浸泡30—60min，再用清水冲洗干净。（2）常规检查(一)、尿量随气候、出汗量、饮水量等不同而异，一般健康成人约为1．0—1．5L／24h，即1m1／(h/kg体重)；小儿按k8体重计算尿量较成人多3—4倍。(二)、颜色根据尿的颜色进行报告：淡黄色、深黄色、褐黄色、红色、乳白色、深红如浓茶、红茶色、乳白色(三）、透明度分为透明、微浑、浑浊、明显浑浊、乳糜状等。（3）生化检查[仪器及试剂]仪器盈东URISCAN试剂盈东尿十一联试纸[操作]把试纸条全部浸没于尿液中约3-5秒后，取出放于盈东URISCAN的试纸条架上测定。（4）尿沉渣检查1）非染色尿沉渣镜检（门诊）1．取刻度离心管，倒入混合后的新鲜尿液10ml，1500r／min离心5min。2．待离心停止后，取出离心管，弃去上层清液，留下0.2m1沉渣，轻摇离心管，使尿沉渣有形成分充分混匀。3．取尿沉渣0．02m1，滴在载玻片上，用18mm×18mm的盖玻片覆盖。4、结果判断尿沉渣镜检观察，用10×10镜头，观察其中有形成分的全貌及管型。用10×40镜头观察鉴定细胞成分和计算数量，应观察10个视野所见最低和最高值，记录结果。管型用低倍镜鉴定，但计数数量应低倍镜观察20个视野，算出一个视野的平均值，记录结果。2）UF-100尿沉渣分析（病房）在尿生化检查完成后，立即把试管架放于UF-100的进架仪上，进行尿沉渣分析。如果结果发现以下情况者应手工镜检。（镜检条件）3）特殊规定在检验尿常规时,所有工作人员及进修实习同志,如发现以下情况者,当用显微镜进行复检,登记备查.1.未用UF-100尿沉渣分析时所有样本必须做镜检.2.尿常规如发现尿干化学和尿沉渣结果发生偏差.3.尿UF-100正常,但尿蛋白为阳性或尿NIT为阳性时.4.尿干化学和尿UF-100均正常,但病人是肾科或泌尿科时.5.其他临床指定必须镜检的.（5）临床意义1）、颜色正常尿液因含尿色素可呈淡黄色，尿液浓缩时，颜色可呈深黄色，并受某些食物及药物的影响。病理性尿色可呈褐黄色、红色、乳白色等，均应报告。尿色深红如浓茶样见于胆红素尿；红茶色见于血尿、血红蛋白尿；乳白色可能为乳糜尿、脓尿。2）、尿量增多见于：1．生理性：饮水过多，饮浓茶、咖啡及酒精类或精神紧张等。2．病理性：常见于糖尿病、尿崩症、慢性肾炎及神经性多尿等。减少见于：1．生理性：饮水少、出汗多等。2．病理性：常见于休克、脱水、严重烧伤、急慢性肾炎、心功能不全、肝硬变腹水等。流行性出血热少尿期、尿毒症、急慢性肾功能衰竭等。3）、非染色尿沉渣镜检(1)．尿内白细胞增加，表示泌尿系统有化脓性炎症。红细胞增加，常见于肾小球肾炎、泌尿系结石、结核或恶性肿瘤。(2)．透明管型可偶见于正常人清晨浓缩尿中；当有轻度或暂时性肾或循环功能改变时，尿内可有少量透明管型；在肾实质性病变如肾小球肾炎时，可见较多的颗粒管型。(3)．红细胞管型的出现常见于急性肾小球肾炎等。颗粒管型的出现，提示肾单位有淤滞的现象。脂肪管型的出现，见于慢性肾炎肾病型及类脂性肾病。(4)．在慢性肾功能不全时，尿内出现肾衰竭管型，提示预后不良。(5)．蜡样管型的出现提示肾脏有长期而严重的病变，见于慢性肾小球肾炎的晚期和肾淀粉样变时。

A6、一小时尿沉渣计数[标本收集]患者先排尿弃去，准确收集3h尿液于清洁干燥容器内送检(标本留取时间5：30-8：30)。[操作]手工法准确测量3h尿量，充分混合。取混匀尿液10m1，置刻度离心管中，1500r／min离心5min，用吸管吸弃上层尿液9m1，留下lm1，充分混匀。吸取混匀尿液1滴，注于血细胞计数板内。细胞共数10个大方格，管型计数20个大方格。仪器法（UF-100操作）准确测量3h尿量，充分混合。取混匀尿液10m1，倒入UF-100专用的试管内，直接上机测定，读出定量的尿液细胞数。乘以1000除以3即得1小时细胞数。[计算]10003小时尿总量ml数1小时细胞数＝10大方格细胞总数×──×─────────10320大方格管型总数10003小时尿总量ml数1小时管型数＝─────────×──×────────2103式中：1000为μl换算成m1数；10为尿液浓缩倍数。[参考值]红细胞:男性＜3万／h;女性＜4万／h白细胞:男性＜7万／h;女性＜14万／h管型:＜3400／h[附注]1．尿液应新鲜检查，pH应在6以下，若为碱性尿，则血细胞和管型易溶解。2．被检尿液比重最好在1．026以上，如小于1．016为低渗尿，细胞易破坏。3．如尿中含多量磷酸盐时，应加入少量稀醋酸液，使其溶解；但切勿加酸过多，以免红细胞及管型溶解；含大量尿酸盐时，应加温使其溶解，以便观察。[临床意义]1．急性肾炎患者红细胞增加。2．肾盂肾炎患者白细胞可明显增加。

A7、尿乳糜定性检查脂肪尿是指混有脂肪的尿液。而乳糜尿是指乳糜微粒与蛋白质混合，致使呈乳化状态的浑浊的尿液。[原理]脂肪可溶解于乙醚中，而脂肪小滴可通过染色识别。[试剂]1．乙醚(AR)；2．苏丹m醋酸乙醇染色液：5％乙醇10m1，冰醋酸90m1，苏丹m粉末一药匙，先将乙醇与冰醋酸混合，再倾入苏丹m粉末，使之充分溶解；3．猩红染色液：先配70％乙醇和丙酮1：1溶液，后将猩红加入至饱和为止。[操作]1．取尿5一10m1，加乙醚2—3m1，混合振摇后，使脂肪溶于乙醚。静置数分钟后，2000r／min离心5min。2．吸取乙醚与尿液的界面层涂片，加苏丹m醋酸乙醇染色液或猩红染色液1滴。3．镜检观察是否有红色脂肪小滴。[结果判断]1．浑浊尿液因加乙醚而澄清，则为脂肪或乳糜尿。2．镜检下可见红色脂肪滴。[附注]1．尿液中加少量饱和氢氧化钠，再加乙醚，有助于澄清。2．将分离的乙醚层隔水蒸干，若留有油状沉淀，也可加苏丹m，镜检证实有无脂肪小滴。[临床意义]1．正常人为阴性。2．因丝虫或其他原因阻塞淋巴管，使尿路淋巴管破裂而形成乳糜尿。丝虫病患者的乳糜尿的沉渣中常见红细胞，并可找到微丝蝴。

A8、大便常规（1）标本采集1．采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别，如一般检验留取新鲜指头大小(约5g)即可，放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检，标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒，便于检查后焚毁。血吸虫毛蝴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内，勿混入消毒剂及其它化学药品。2．检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子，在清晨排便前由肛门四周拭取标本，也可用棉拭子拭取，但均须立即镜检。3．检查阿米巴滋养体，应于排便后立即检查。冬季需采取保温措施，迅速送检。4．不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可使柔弱的原虫致死。用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时，可因尿液中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果错误的增高。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等，因腐生性原虫、真菌抱子、植物种子、花粉易混淆实验结果。5．盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分，若无病理成分，可多部位取材。采取标本后，应在一小时内完成检查，否则可因9H及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。6．检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数，应收集24h粪便送验。7．隐血试验，应嘱患者收集标本前3日禁食动物性食物。连续检查3天，并选取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检查，以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。8．粪胆原定量检查应收集二天的粪便，混合称量，从其中取出约20g送验。查胆汁成分的粪便标本不应在室温中长时间放置，以免阳性率减低。9．脂肪定量检查时，应先食定量脂肪食，每天进食脂肪50—1508，连续6天。从第三天起，收集72h粪便，也可定时口服色素(刚果红)，作为留取粪便的指示剂，将收集的粪便混合称量，从中取出608左右送检。简易法为在正常膳食情况下，收集24h的全部粪便，混合称量，从其中取出约60g送检，测脂肪含量。10．细菌检验用标本应全部用无菌操作收集。（2）常规检验1）颜色可根据观察所见报告，如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。正常粪便因粪胆素而呈棕黄色，但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色。灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疽、胆汁减少或缺乏。绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。米泔水样见于霍乱。2）性状可报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。1．球形硬便：便秘时可见。2．粘液稀便：见于肠壁受刺激或发炎时，如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。3．粘液脓性血便：多见于细菌痢疾。4．酱色粘液(可带脓)便：多见于阿米巴痢疾。5．稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。6．米泔样便并有大量肠粘膜脱落，见于霍乱、副霍乱等。7．扁平带状便：可能因直肠或肛门狭窄所致。3）寄生虫虫体蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体，肉眼即可分辨。钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。4）直接涂片镜检1．洁净玻片上加等渗盐水1—2滴，选择粪便的不正常部分，或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。2．最好取大玻片，制成涂片后，应覆以盖片。涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。3．在涂片中如发现疑似包囊，则在该涂片上加1滴碘液，在高倍下仔细鉴别，如仍不能决定时，可取全量粪便浓缩法检查。4．虫卵的报告方式：未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找到几种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。5．应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别，并应注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现，则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。6．细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。7．夏科—雷登(Charcot—Leyden)结晶：为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶，大小不一。常见于肠道溃疡，尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。8．细菌：占粪便净重的l／3(4000亿／g干粪)，正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌，占80％；而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10％；芽胞茵(如梭状菌)和酵母菌为常住菌，但总量不超过10％。正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致，除涂片染色找细菌外，应采用不同培养基培养鉴定。

A9、虫卵及包囊浓缩检查（1）漂浮法本法适用于钩虫卵等线虫类虫卵。操作取拇指(蚕豆)大小粪便1块，放于大号青霉素瓶或小酒杯内，先加入少量饱和盐水(粗食盐400g加水1000m1，应成饱和液，煮沸、冷却后，取上清液)，用玻棒将粪便充分混合，再加入饱和盐水至瓶口。也可用硫酸镁浮聚液，即硫酸镁1858、食盐2908溶于1L水中，比重为1，230，用洁净载玻片覆盖瓶口，静置30一40min后，平执载玻片向上提拿，翻转后镜检。（2）清水沉淀法1．取粪便208左右，置小搪瓷杯中，加水少许，并用竹签捣碎使成糊状。2．用16孔／cm或40孔／寸之铁筛或纱布过滤，除去粗糙粪质，滤入三角烧瓶内。再加清水约500m1，静置20、30min，小心倾去上面3／4的液体。3．再加清水500m1，混匀后静置30min，小心倾去上面4／5液体。4．再加清水500m1，静置30min，倾去上面的水，留下底部沉淀，混合后用吸管取沉淀镜检。（3）原虫及包囊碘液染色法染剂D’Antoni氏碘液：取碘化钾1．Og，溶于100m1蒸馏水中，再加入碘1．58溶解。操作1．用生理盐水涂布粪便于载玻片上，再滴加碘液1—2滴混匀，覆以盖片。2．病理粪便查滋养体时，应尽可能在15min内检查完毕。3．包裹染色后，包囊壁、包涵体、细胞核均清楚可见。（4）血吸虫卵沉淀孵化法操作1．取新鲜标本约308，放入广口容器内，加入少量清水，用长柄搅拌器将粪调匀成糊状。2．通过金属纱网(40孔／寸)或两层纱布滤去粪渣，将滤液放入500m1尖底量杯或三角烧瓶内。3．加清水至容器口，静置20一30min，倾去上层清液，将沉渣移入三角烧瓶内，加清水至接近瓶口，静置15min。4．如此操作共3次，待上层液体澄清即可，勿超过2h。5．也可用自动换水装置小心地洗至上液澄清，不冲去沉淀。6．放入25—30℃温箱或温室中，孵化4—6h，观察有无作一定方向运动的毛蚴。7．次晨复查，出具报告。8．孵化阴性应吸取沉渣涂片，注意有无寄生虫卵。报告方式“毛蚴沉孵阳性”或“毛蚴沉孵阴性”。附注1．自来水中如含氯含氨浓度较高者应将水预先煮沸，或用大缸预先将水储存以去氯。也可在水中加硫代硫酸钠(120kg水中加50g／L硫代硫酸钠6m1)以除去水中的氯或氨。2．农村如使用河水者，应防止水中杂虫混入，对所换的水应先煮沸，冷却后使用。3．如水质浑浊，可先用明矾澄清(100k8水约用明矾38)。4．毛蚴孵出时间与温度有密切关系，高于30℃仅需1—3h，25—30℃4—6h，而小于25℃应过夜观察。如室温过高，为防止毛蚴逸出过早，可用108／I，盐水换洗，但最后换水孵化时，必须用淡水，不可含盐。A10、隐血试验上消化道有少量出血时，红细胞被消化而分解破坏，由于显微镜下不能发现，故称为隐血。（1）免疫学检测法[原理]大便隐血的免疫一步检验法是一个高灵敏度的夹心式酶联免疫测定法。该法采用抗人血红蛋白的单克隆抗体和多克隆抗体，特异地针对粪便样品中的人血红蛋白。因此，本试验不受动物血红蛋白的干扰，试验前不须禁食肉类。[操作]取一片洁净干燥的载玻片，滴加2—3滴蒸馏水，取粪便小许，调成均匀混悬液。取便隐血试纸条，按说明书操作，将试纸条的反应端浸湿。在5min内观察结果。若反应线(T)和质控线(C)同时呈蓝色色带即为阳性；若只有C线呈色为阴性；若丁线与C线均不显色，说明试验无效。[附注]1．敏感性和特异性(1)敏感性：样品中血红蛋白浓度超过0．2μg／m1，就可得到阳性结果。(2)特异性：便潜血免疫一步检验法是特异对人体血红蛋白的检验，样品中若含有如下干扰物，实验结果不会受影响：鸡血红蛋白500μg／ml牛血红蛋白500μg／m1马血红蛋白500μg／ml猪血红蛋白500μg／m1羊血红蛋白500μg／m1兔血红蛋白500μg／m1辣根过氧化酶200μg／m12．试验局限性(1)本法可以帮助医生早期发现胃肠道病变，然而，由于家族性息肉或直肠癌可能不出血，或间断性出血，或出血在粪便中分布不均匀，都可造成阴性结果。(2)本法对正常人检验有时也会得到阳性结果，这是由于某种刺激胃肠道的药物造成便潜血所至。(3)本检验法只能作为筛选或辅助诊断用，不能替代胃镜、直肠镜、内窥镜和X光检查。[临床意义]1．消化道出血时(如溃疡病、恶性肿瘤、肠结核、伤寒、钩虫病等)本试验可阳性。2．消化道恶性肿瘤时，粪便隐血可持续阳性，溃疡病时呈间断性阳性。3．本法可作为消化道恶性肿瘤普查初筛试验。（2）试带法国内外生产以四甲基联苯胺为显色基质的隐血试验试带，使用方便，患者也可自留标本检测。（3）邻甲联苯胺法[原理]

血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧化物酶的活性，能催化过氧化氢，放出新生态氧，将受体邻甲苯胺氧化成邻甲偶氮苯而显蓝色。[试剂]1．10g／L邻甲联苯胺(o-tolidine)溶液：取邻甲联苯胺18，溶于冰醋酸及无水乙醇各50m1的混合液中，置棕色瓶中，保存于4℃冰箱中，可用8—12周，若变为暗色，应重新配制；2．3％过氧化氢液[操作]1．用竹签挑取少量粪便，涂在消毒棉签上或白瓷板上。2．墒加0．15L/L邻甲苯胺冰乙酸溶液2—3滴于粪便上。3．滴加3％过氧化氢2—3滴。4．立即观察结果，在2min内显蓝色为阳性。[结果判断]阴性：加入试剂2min后仍不显色。十，加入试剂10s后，由浅蓝色渐变蓝色。2十：加入试剂后初显浅蓝褐色，逐渐呈明显蓝褐色。3十：加入试剂后立即呈现蓝褐色。4十：加入试剂后立即呈现蓝黑褐色。[附注]1．O—tolidine[3，3’-Dimethyl-(1，1’-biphenyl)—4，4’-Diamine，Cl4Hl6N2,MW212．3]，中文名称邻甲联苯胺，亦称邻联甲苯胺。另有，O—toluidine(2-Aminot01uene，C7H9N，MWl07。2)，中文名称邻甲苯胺，可用于血糖测定，两者应予区别。2．粪便标本必须及时检查，以免灵敏度降低。3．3％过氧化氢必须有效，应进行阳性对照试验，将过氧化氢滴血片上，产生泡沫，或滴加于重铬酸钾硫酸液，显褐色示有效。4．强调实验前三天内禁食动物血、肉、肝脏及富含叶绿素食物、铁剂、中药，以免假阳性反应。齿龈出血、鼻出血、月经血等均可导致阳性反应。5．用具应加热处理(如试管、玻片、滴管等)，以破坏污染的过氧化物酶。

A11、脑脊液检验（1）标本处理1．标本送验必须及时，收到标本后应立即检验。久置可致细胞破坏，影响细胞计数及分类检查；葡萄糖分解使含量降低；病原菌破坏或溶解。2．细胞计数管应避免标本凝固，遇高蛋白标本时，可用EDTA盐抗凝。（2）一般性状检查主要观察颜色与透明度，可记录为水样透明、白雾状浑浊、微黄浑浊、绿黄浑浊、灰白浑浊等。脓性标本应立即直接涂片进行革兰染色检查细菌，并应及时接种培养基。1）红色：如标本为血性，为区别蛛网膜下腔出血或穿刺性损伤，应注意：(1)将血性脑脊液试管离心沉淀(1500r／min)，如上层液体呈黄色，隐血试验阳性，多为蛛网膜下腔出血，且出血的时间已超过4h。如上层液体澄清无色，红细胞均沉管底，多为穿刺损伤或因病变所致的新鲜出血。(2)红细胞皱缩，不仅见于陈旧性出血，在穿刺外伤引起出血时也可见到。因脑脊液渗透压较血浆高所致。2）黄色：除陈旧性出血外，在脑脊髓肿瘤所致脑脊液滞留时，也可呈黄色。黄疸患者的脑脊液也可呈黄色。但前者呈黄色透明的胶冻状。3）米汤样：由于白(脓)细胞增多，可见于各种化脓性细菌引起的脑膜炎。4）绿色：可见于绿脓杆菌、肺炎链球菌、甲型链球菌引起的脑膜炎。5）褐或黑色：见于侵犯脑膜的中枢神经系统黑色素肉瘤。（3）潘氏(Pandy)球蛋白定性试验[原理]脑脊液中球蛋白与苯酚结合，可形成不溶性蛋白盐而下沉，产生白色浑浊或沉淀。[试剂]5％苯酚溶液：取纯苯酚25m1，加蒸馏水至500m1，用力振摇，置37℃温箱内1—2天，待完全溶解后，置棕色瓶内保存。[操作]取试剂2—3m1，置于小试管内，用毛细滴管滴入脑脊液l一2滴，衬以黑背景，立即观察结果。[结果判断]阴性：清晰透明，不显雾状。极弱阳性(土)：微呈白雾状，在黑色背景下，才能看到。弱阳性(十)：灰白色云雾状。阳性(2十)：白色浑浊。强阳性(3十)：白色浓絮状沉淀。最强阳性(4十)：白色凝块。[临床意义]正常时多为阴性。有脑组织和脑膜疾患时常呈阳性反应，如化脓性脑膜炎、结核性脑膜炎、梅毒性中枢神经系统疾病、脊髓灰白质炎、流行性脑炎等。脑出血时多呈强阳性反应，如外伤性血液混入脑脊液中，亦可呈阳性反应。（4）细胞计数1）细胞总数[器材及试剂]1．细胞计数板；2．红细胞稀释液(配法同血液红细胞稀释液)。[操作]1．对澄清的脑脊液可混匀后用滴管直接滴入计数池，计数10个大方格内红、白细胞数，其总和即为每μl的细胞数。再换算成每升脑脊液中的细胞数。如细胞较多，可计数一大格内的细胞×10，即得每μl脑脊液中细

胞总数。如用升表示，则再乘以10。2．浑浊或带血的脑脊液可用血红蛋白吸管吸取混匀的脑脊液20μl，加入含红细胞稀释液0．38m1的小试管内，混匀后滴入计数池内，用低倍镜计数4个大方格中的细胞总数，乘以50，即为每μl脑脊液的细胞总数。2）白细胞数1．非血性标本：小试管内放入冰乙酸1—2滴，转动试管，使内壁沾有冰乙酸后倾去之，然后滴加混匀的脑脊液3—4滴，数分钟后，混匀充入计数池，按细胞总数操作中的红、白细胞计数法计数。2．血性标本：将混匀的脑脊液用1％冰乙酸溶液稀释后进行计数。为剔除因出血而来的白细胞数，用下式进行校正。每μl脑脊液内白细胞校正数＝每μl脑脊液内白细胞未校正数每μl脑脊液内内红细胞数×每μl血液内白细胞-──────────────────────每μl血液内红细胞[参考值]正常人脑脊液中无红细胞，仅有少量白细胞。成人：(0—8)×106/L儿童：(0一15)×106/L多为淋巴细胞及大单核细胞，两者之比约为7：3，偶见内皮细胞。[附注]1．计数应及时进行，以免脑脊液凝固，使结果不准确。2．细胞计数时，应注意新型隐球菌与白细胞的区别。前者不溶于乙酸，加优质墨汁后可见不着色的荚膜。3．计数池用后，应用75％乙醇消毒60min。忌用苯酚消毒，因有损计数池的刻度。3）细胞分类<1>．直接分类法：白细胞计数后，将低倍镜换为高倍镜，直接在高倍镜下根据细胞核的形态分别计数单个核细胞(包括淋巴细胞及单核细胞)和多核细胞，应数100个白细胞，并以百分率表示。若白细胞少于100个，应直接写出单核、多核细胞的具体数字。<2>．染色分类法：如直接分类不易区分细胞时，可将脑脊液离心沉淀，取沉淀物2滴，加正常血清l滴，推片制成均匀薄膜，置室温或37℃温箱内待干，进行瑞氏染色后用油镜分类。如见有不能分类的细胞，应另行描述报告，如脑膜白血病或肿瘤时。4)、临床意义1．中枢神经系统病变的脑脊液，细胞数可增多，其增多的程度及细胞的种类与病变的性质有关。2．中枢神经系统病毒感染、结核性或霉菌性脑膜炎时，细胞数可中度增加，常以淋巴细胞为主。3．细菌感染时(化脓性脑膜炎)，细胞数显著增加，以中性粒细胞为主。4．脑寄生虫病时，可见较多的嗜酸性粒细胞。5．脑室或蛛网膜下腔出血时，脑脊液内可见多数红细胞。(5)细菌直接涂片检查临床怀疑流行性脑脊髓膜炎或化脓性脑脊髓膜炎时，应作细菌学涂片检查。操作如下：1．将脑脊液立即离心沉淀，取沉淀物涂片2张。2．涂片应在室温中，或置37℃温箱中干燥，切勿以火焰烘烤。3．经火焰固定后，一张涂片用亚甲蓝染色30s，另一张作革兰染色。4．注意细胞内外的细菌形态，报告时应予以描述。(6)真菌检查-新形隐球菌检查[操作]1．取脑脊液，以2000r／