甲硝唑栓微生物限度检查方法验证课件

甲硝唑栓微生物限度检查方法验证薄膜过滤法甲硝唑栓介绍规格： 0.5g剂型： 栓剂批准日期： 2010-5-21批准文号： 国药准字H20058324药品类型： 化学药品英文名称： Metronidazole+Suppositories甲硝唑栓介绍化学名称：2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇化学成分：甲硝唑药品类别：抗阿米巴病药及抗滴虫病药适应症：本品用于治疗阴道毛滴虫病。性状：本品为乳白色至淡黄色鱼雷形栓剂。贮藏：遮光，密闭，在30℃以下阴凉处存放。2022/12/28阴道、尿道给药制剂

细菌数每1g、1ml或10cm2不得过100cfu。霉菌和酵母菌数每1g、1ml或10cm2应小于10cfu。金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、梭菌、白色念珠菌每1g、1ml或10cm2不得检出。培养基pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液营养琼脂培养基玫瑰红钠琼脂培养基沙氏葡萄糖液体培养基沙氏葡萄糖琼脂培养基菌液制备(1)接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至10ml营养肉汤中，35～37℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml菌液制备(2)接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml改良马丁培养基中，23～28℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml。供试液的制备取样品10g,加至含无菌十四烷酸异丙酯20mL和无菌玻璃珠的适宜容器内,置45℃水浴保温，充分振荡使溶解，加入预热45℃的pH7.0无菌氯化钠蛋白胨缓冲液至100mL,萃取5~10min，静置，取水层作为1:10的供试品.取1：10供试液10mL，置无菌条件下500转/min离心3min,留上清液菌液组50~100cfu/ml的菌液1ml过滤取滤膜菌面向上贴于凝固的培养基上（30~35℃72h)供试品对照组：上清液1ml加至100ml稀释液过滤冲洗2次(每次100ml)菌面向上贴于凝固的培养基上（30~35℃72h)平均回收率结果结果判定

从表1可以看出，5株试验菌的试验组菌回收率与稀释剂对照组的菌回收率均＞70%，因此，可采用该法测定样品的细菌真菌及酵母菌数。控制菌检查方法的验证

验证试验用菌种：a.梭菌b.金黄色葡萄球菌c.白色念珠菌d.铜绿假单胞菌菌液制备接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml改良马丁培养基中，23～28℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml。验证方法试验组：上清液1ml

加至100ml稀释液中混匀过滤冲洗2次1ml菌液（白念）取滤膜于沙氏葡萄糖肉汤培养基中30～35℃培养18～24h。过滤过滤结果低速离心-薄膜过滤法,真菌及酵母菌计数采用薄膜过滤法,控制菌检查采用薄膜过滤法与低速离心-薄膜过滤法.结果细菌、真菌及酵母菌的回收率均＞70.0