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实验十一细菌常用生理生化反应实验接种一实验目的１学习各种生理生化反应实验的原理２学习巩固各种生理生化反应实验的接种方式并熟练掌握各种接种方法二实验原理１葡萄糖发酵实验原理：能分解某种糖产生有机酸（如乳酸、醋酸、丙酸等）和气体（产酸后溴甲酚紫指示剂可由紫色pH(6.8变为黄色pH5.，产气的细菌可使半固体培养基中存有气泡．２V.P.反应和甲基红试验原理：P.羧后转变成乙酰甲基甲醇（亦称三羟基丁酮，然后被还原为－丁二醇，乙酰甲基甲醇在V．P．正反应（若培养基中胍基太少，可加少量肌酸等胍基化合物萘酚时，可促进反应进行。范围为红黄。细菌分解葡萄糖产酸，将培养液由原来的橘黄色变为红色，此为M．R．正反应。３吲哚实验原理：合。形成玫瑰吲哚，为红色化合物，其反应如下：４硝酸盐还原实验原理：某些细菌能将培养基中的硝酸盐还原为亚硝酸盐、氨和氮气等。如果细菌能把培养基中的为正反应。如果在培养液中加入格利斯亚硝酸试剂后溶液不出现红色，则有两种可能性：细菌不能还原硝酸盐，故培养后的培养液中仍有硝酸盐存在，此为负反应。没有硝酸盐存在，此反应为正反应。５柠檬酸盐实验原理：某些菌分解柠檬酸形成CO2、由于培养基中钠离子的存在而形成碳酸钠，使培养基碱性增加1％的溴麝香草酚蓝酒精溶液，变色范围为pH6.（黄）．6（蓝．６明胶水解实验：某些细菌能分泌明胶酶分解明胶，产生小分子物质。如果细菌具有分解明胶的能力，则平板养基呈现透明的状态，可以使菌落周围出现透明圈。淀粉水解实验原理,,淀粉被分解部分的培养基呈现透明的状态，可以使菌落周围出现透明圈。硫化氢产生实验原理铅或硫化铁沉淀，从而可确定硫化氢的产生。在培养基中加入柠檬酸铁铵,培养后观察是否有黑色沉淀产生。培养基中加入硫代硫酸钠是为了保持低的氧化还原电位,防止产生的硫化,.三实验器材,斜面.针),3菌种:,,,.四实验操作(一)接种:标记按下表接种实验名称实验名称培养基接种方式菌种淀粉水解实验淀粉培养基平板平板点种大肠杆菌,枯草杆菌明胶分解富氏明胶培养基平板点种大肠杆菌,枯草杆菌葡萄糖发酵葡萄糖发酵培养基半固体穿刺大肠杆菌,恶臭假单胞菌柠檬酸盐利用柠檬酸盐培养基斜面接种大肠杆菌,产气杆菌硫化氢产生实验硫化氢产生实验培养基蛋白胨水培养基固体穿刺大肠杆菌,变形杆菌吲哚产生实验液体接种大肠杆菌,产气杆菌甲基红和伏普实验葡萄糖蛋白胨水培养基硝酸盐还原实验培养基液体接种大肠杆菌,产气杆菌硝酸盐还原实验液体接种大肠杆菌,恶臭假单胞菌(二) 培养将接种好的培养基放在37℃培养箱中培养,两天后观察.两天后(时间待定)观察.五思考题?答：1）获得该微生物的纯培养物2)测定一系列必要的鉴定指标查找权威性的菌种鉴定手册 答：培养特征细胞形态(大小形状排列)其染色特性特殊的细胞结构（鞭毛

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