《临床微生物学检验技术》课程实验教学大纲（2018版专升本）

《临床微生物学检验技术》课程实验教学大纲（2018版专升本）课程编号：32061081a 课程名称：临床微生物学检验技术适用专业：医学检验技术课程类别：必修开课学期：第五学期实验学时：36学分：4一、开课实验室医学影像与检验实验室二、课程性质与任务课程性质：《临床微生物学检验技术》是一门将实验室科学和临床医学相结合的学科，是研究病原微生物的生物学特性、致病性、微生物检验与防治原则的学科，是医学检验技术专业的一门主干课和专业课。课程任务：通过系统学习研究感染性疾病的病原体特征，寻找快速、准确的感染性疾病病原学诊断方法与策略，培养学生的临床思维能力及熟练的动手操作能力，使学生具有扎实的基础理论和临床实践技能，为以后从事科研工作及临床检验工作下坚实基础。三、教学目的和要求1.掌握常用微生物学技术和微生物学检验方法的原理、操作、结果判定、质量控制及方法学评价。2.熟悉应用临床思维分析能力对感染性疾病的诊断预防及治疗提出专业的见解。3.提高学生的动手能力，对微生物学检验技术常用的实验操作方法与常用仪器能熟练操作。四、考核形式要求实验成绩100分记，实验考核占总成绩20%。五、实验项目名称与学时分配序号实验项目名称实验类型实验学时每组人数实验要求(必做或选做)1抗菌药物敏感试验及细菌生化反应接种验证412必做2细菌常用生化反应验证412必做3血液标本的细菌学检验综合412必做4尿液标本的细菌学检验综合412必做5粪便标本的细菌学检验设计412必做6脓汁标本的细菌学检验综合412必做7下呼吸道标本的细菌学检验综合412必做8真菌试验验证412必做9实验考核综合412必做六、实验项目的具体内容实验一抗菌药物敏感试验（K-B扩散法）及细菌生化反应接种1、实验目的和要求掌握K-B纸片扩散法的原理、操作方法、结果判读及其临床意义2、实验原理将含有定量抗菌药物的纸片（药敏纸片）贴在已接种待测菌的琼脂平板表面特定部位，该点称为抗菌药源。药物借其分子的扩散力向周围琼脂中扩散，形成了随着与药源距离加大，琼脂中药物浓度逐渐减少的梯度浓度。其药源周围一定区域的琼脂内药物浓度高于抑制该待测菌所需浓度时，则该区域内细菌不能生长，形成透明抑菌圈。抑菌圈的大小可以反映待测菌对该测定物的敏感程度，并与该药对待测菌的最低抑菌浓度（MIC）呈负相关，即抑菌圈越大，MIC越小。3、材料试剂金黄色葡萄球菌菌液、大肠埃希菌菌液、无菌棉签、镊子、接种环、刻度尺、0.5麦氏单位比浊管、抗菌纸片、水解酪蛋白琼脂（MH琼脂）4、实验内容涂布接种贴药物纸片标记培养5、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导6、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。7、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验二细菌常用生化反应1、实验目的和要求（1）进一步掌握细菌接种技术；（2）熟悉鉴别细菌常用的生化反应的培养基、方法和意义。（3）学会观察糖发酵、靛基质、甲基红、VP、枸橼酸盐利用、尿素分解反应现象，正确作出结果判断；（4）掌握肠杆菌在复合生化反应培养基上的生化反应及结果解释。2、材料试剂生化培养基、大肠杆菌、伤寒杆菌、产气杆菌、痢疾志贺菌、变形杆菌等。3、实验内容生化反应接种：复合生化反应接种：记录细菌常用生化反应的结果现象：各实验结果分析：4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验三血液标本的微生物检验1、实验目的和要求（1）掌握血液标本的一般细菌学检验程序；（2）掌握金黄色葡萄球菌的鉴定方法。2、材料试剂病人血液、血琼脂平板(BA)、普通营养琼脂（NA）、无菌生理盐水、正常人血浆、3%H2O2，0.5麦氏比浊管、革兰染液、无菌棉签、无菌试管、接种环、半自动微生物鉴定仪等。3、实验内容标本采集：检验程序：检验方法：增菌培养；分离培养；菌落观察；染色镜检；生化鉴定、药物敏感试验4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验四尿液标本微生物检验1、实验目的和要求（1）掌握尿液标本的一般微生物学检验程序和细菌计数方法；（2）掌握大肠埃希菌的微生物学鉴定方法。2、材料试剂中段尿或模拟尿标本、培养基营养琼脂、血琼脂（BA）、MAC、M-H平板、革兰染色液、生理盐水、氧化酶试剂、无菌吸管、无菌石蜡油、半自动微生物鉴定仪等。3、实验内容标本采集：检验程序：检验方法：细菌计数和直接药敏试验；涂片检查；分离培养；生化鉴定；药敏试验4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验五粪便标本的微生物学检验1、实验目的和要求（1）掌握粪便标本微生物学检验程序；（2）掌握志贺菌、沙门菌及弯曲菌的微生物学检验方法。2、材料试剂粪便标本、培养基MAC、SS、半自动微生物鉴定仪等。3、实验内容标本采集：检验程序：检验方法：分离培养；涂片染色；分纯培养；生化鉴定；血清学鉴定；药敏试验4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验六脓汁标本的微生物学检验1、实验目的和要求（1）掌握脓汁标本的一般微生物学检验程序;（2）掌握铜绿假单胞菌的鉴定方法。2、材料试剂脓汁标本、普通琼脂平板（NA）、氧化酶试剂、0.5号麦氏比浊管、革兰染液等、无菌棉签、无菌试管及吸管、显微镜、半自动微生物鉴定仪等。3、实验内容标本采集：检验程序：检验方法：直接涂片镜检；分离培养；生化鉴定；药敏试验4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验七下呼吸道标本的微生物学检验1、实验目的和要求（1）掌握痰液标本中结核分枝杆菌的微生物学检验程序；（2）掌握抗酸染色法；（3）熟悉结核分枝杆菌营养要求及生长特点。2、材料试剂模拟痰标本、灭菌4%NaOH、1mol/LHCL、抗酸染色液、半自动微生物鉴定仪等。3、实验内容标本采集：检验程序：检验方法：直接涂片和厚膜涂片法；抗酸染色法；培养检查；常见病原体的观察4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。实验八真菌试验1、实验目的和要求（1）掌握真菌培养物菌落形态学特征；（2）掌握白色念珠菌、新型隐球菌形态学特征；（3）熟悉美兰染色法；（4）掌握新型隐球菌墨汁染色法；（5）熟悉皮肤丝状菌检查法。2、材料试剂玻片、镊子、显微镜、美兰染液、KOH溶液3、实验内容白色念珠菌、新型隐球菌、丝状菌在沙保培养基培养物观察白色念珠菌玻片标本观察（白带标本）白色念珠菌玉米培养基厚膜孢子观察白色念珠菌美蓝染色法新型隐球菌墨汁染色观察荚膜皮肤丝状菌检查法（不染色标本直接检查法）4、教学方式老师讲解、示教+学生互相操作，老师指导5、考核要求随机抽查二组学生，检查操作的准确性并纠正操作中的错误。6、实验报告要求要求书写实验目的、实验器材、实验内容、检查结果、实验结论。七、实验教材及参考书教材：吴爱武主编，《临床微生物学检验实验指导》，第一版次，人民卫生出版社，出