《实验瑶山树鼩第2部分：微生物学等级及监测》编制说明

Q/LB.□XXXXX-XXXXDBXX/TXXXX—XXXX前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。本文件是DB45/Txxxx《实验动物瑶山树鼩》的第2部分。DB45/Txxxx已经发布了以下部分:——第1部分：饲养管理；本文件由广西壮族自治区科学技术厅提出、归口并宣贯。本文件起草单位：广西中医药大学。本文件主要起草人：唐海波、冷静、梁亮、运晨霞、黄正团、张丽峰、肖健、曹颖颖、杨庆利。实验动物瑶山树鼩第2部分:微生物学等级及监测范围本文件规定了实验动物瑶山树鼩微生物学等级分类、检测要求、检测程序、检测方法、结果判定、判定结论。本文件适用于实验动物瑶山树鼩微生物学等级监测。规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB19489实验室生物安全通用要求GB/T14926.1实验动物沙门菌的检测方法GB/T14926.4实验动物皮肤病原真菌检测方法GB/T14926.11实验动物大肠埃希菌O115a,c:K(B)检测方法GB/T14926.13实验动物肺炎克雷伯杆菌检测方法GB/T14926.14实验动物金黄色葡萄球菌检测方法GB/T14926.15实验动物肺炎链球菌检测方法GB/T14926.16实验动物乙型溶血性链球菌检测方法GB/T14926.17实验动物绿脓杆菌检测方法GB/T14926.30实验动物兔轮状病毒检测方法GB/T14926.47实验动物志贺菌检测方法T/CALAS8-2017实验动物 树鼩微生物学等级及监测术语和定义下列术语和定义适用于本文件。普通级实验瑶山树鼩Conventionalexperimentaltupaiabelangeriyaoshanensis经人工培育，遗传背景明确或者来源清楚，对其携带的病原实行控制，不携带所规定的人兽共患病病原和烈性传染病病原，用于科学研究、教学、生产和检定以及其他科学实验的瑶山树鼩。简称普通实验瑶山树鼩。无特定病原体级实验瑶山树鼩Specificpathogenfree（SPF）tupaiabelangeriyaoshanensis除普通级实验瑶山树鼩应排除的病原外，不携带所规定的潜在感染或条件致病和对科学研究干扰大的病原的实验瑶山树鼩。简称无特定病原体实验瑶山树鼩或SPF实验瑶山树鼩。实验瑶山树鼩等级分类按微生物学等级实验瑶山树鼩分为普通级和无特定病原体级。检测要求外观指标外观检查应外观健康、无异常。病原微生物检测项目各等级实验瑶山树鼩病原微生物检测项目见表1。各等级树鼩病原微生物检测项目动物等级检测的病原微生物检测要求无特定病原生物级普通级沙门菌Salmonellaspp.●志贺菌Shigellaspp●皮肤病原真菌Pathogenicdermalfungi●轮状病毒rotavirus●呼肠孤病毒Reovirus●腺病毒Adenovirus○肺炎链球菌Streptococcuspnemoniae●变形杆菌Proteusspp.●大肠埃希菌O115a,c:K(B)Escherichia.coli○乙型溶血性链球菌β-hemoliticstreptococcus○绿脓杆菌Pseudomonasaeruginosa○金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus○肺炎克雷伯杆菌Klebsiellapneumonia○●必须检测项目：要求阴性；○必要时检测项目：指引进实验瑶山树鼩时或怀疑本病流行等必要时要求检测的项目检测项目分类必须检测项目在进行实验动物瑶山树鼩质量评价时必须检测的项目，要求阴性。必须检测项目用“●”表示。必要时检测项目在引进实验瑶山树鼩时；怀疑有本病流行时，申请实验动物生产许可证时必须检测的项目。必要时检测项目用“○”表示。检测流程检测流程检测规则检测频率普通级实验动物瑶山树鼩每六个月检测一次，无特定病原体级实验动物瑶山树鼩每三个月检测一次。采样方式选择成年实验瑶山树鼩用于检测，随机取样。方法检查的动物按细菌、真菌、病毒要求联合取样。数量根据瑶山树鼩群体大小，采样数量见表2。采样数量群体大小(只)采样数量a<100不少于5只100~500不少于10只>500不少于20只a每个隔离器检查2只；血液不少于1ml/只。地点应在每一个生产繁殖单元的不同方位选取动物，无特殊要求时，可在生产繁殖单元进行活体取样。送检要求样本要求有明显标识，安全送达实验室，送检单应写明检品名称、品系、等级、数量及检测项目等内容。样品的处理应符合GB19489的规定。检测方法沙门菌按GB/T14926.1的规定检测。志贺菌按GB/T14926.47的规定进行。皮肤病原真菌按GB/T14926.4的规定检测。轮状病毒检查按轮GB/T14926.30的规定进行。肺炎链球菌按GB/T14926.15的规定检测。大肠埃希菌O115a,c:K(B)按GB/T14926.11的规定检测。乙型溶血性链球菌按GB/T14926.16的规定检测。绿脓杆菌按GB/T14926.17的规定检测。金黄色葡萄球菌按GB/T14926.14的规定检测。肺炎克雷伯杆菌按GB/T14926.13的规定检测。呼肠孤病毒、腺病毒、变形杆菌按T/CALAS8-2017的规定进行。结果判定抗体检查轮状病毒经ELISA或免疫荧光检测，血清抗体阴性判为合格。病原体核酸PCR检查 呼肠孤病毒和腺病毒经核酸PCR检测，无扩增目的条带判为合格。待检样品扩增出特异性目的条带即可判为疑似阳性；对疑似阳性样品，再用同一PCR或ELISA方法重试