琼脂糖凝胶电泳法鉴别肝素钠中重硫化硫酸软骨素掺假研究课件_第1页
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文档简介

专业动物医学

年级2005级

学号2229姓名郑海燕指导教师张耕廖江波琼脂糖凝胶电泳法鉴别

肝素钠中重硫化硫酸软骨素掺假研究主要内容研究背景材料与方法结果与分析结论致谢研究背景

肝素是一种含有硫酸基的粘多糖，常以钠盐存在，因此称之肝素钠（Heparinsodiumsalt）。它除了作为临床上最重要的抗凝剂外，随着生化和药理作用的深入研究，其潜在的作用不断被发掘，如抗炎、抗癌、抗过敏、抗张冠脉、抑制单纯疱疹病毒活性等等。在临床上也显示出了许多新的用途及功效。应用日益广泛，范围扩大到了美容、化妆等。肝素结构复杂，天然不可替代性，至今不可用人工方法合成，有其较高的价值。

去年2月美国报道，造成四名患者死亡，300多人出现过敏反应的美国百特医疗公司所产肝素钠中，检出多硫酸软骨素，中国食品药品监管局针对此事件于去年4月要求国内肝素钠药品生产企业，必须在现行的肝素钠药品质量检测标准的基础上，增加多硫酸软骨素检测项目，以确保产品质量安全。目前美国FDA推荐检检重硫化硫酸软骨素的方法是核磁共振和毛细管电泳法，两种方法的检测费用很高，仪器也很昂贵，一般厂家难于完成。我们希望利用肝素和重硫化硫酸软骨素的分子量和带电荷不同，其电泳图谱上的差异，寻找一种肝素掺假的初步鉴定方法，对肝素钠生产具有重要的实际意义。材料与方法材料

猪肝素（重庆东华生物制品公司，效价157，药用级）重硫化硫酸软骨素(某生化制品公司提供，含量>99%)试验主要仪器：电子天平（上海恒平科学仪器有限公司）电泳仪（北京君意东方电泳设备有限公司）试验主要药物琼脂糖粉（成都市科龙化工试剂厂）四硼酸钠、硼酸、甲苯胺蓝染料均为分析纯。方法1缓冲液的制备2鉴别样品的准备3琼脂糖平板电泳胶灌注4电泳5染色6观察结果照像

结果与分析试验结果

1分析讨论

2

2.猪肝素和重硫化硫酸软骨素标准品电泳图谱

12345671（标准肝素）、2（0.5%）、3（1%）、4（5%）、5（10%）、6（15%）、7（重硫化硫酸软骨素）结论通过对掺入不同浓度重硫化硫酸软骨素的肝素进行琼脂糖电泳，电泳最佳的时间为45分钟、凝胶浓度为2.5％,电压300V，能检测出重硫化硫酸软骨素掺假高于1%的肝素样品，可以作为初步检测的方法在生产中使用。

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