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文档简介
高中生物教材实验常用试剂及作用1、酒精的作用实验名称浓度用途脂肪的鉴定50%绿叶中色素的提取观察根尖分生细胞的有丝分裂与盐酸1:1配制成解离液低温诱导植物染色体数目的变化95%.冲洗卡诺氏液.与盐酸1:1配制成解离液土壤中小动物类群丰富度的研究将采集的小动物放置其中2、盐酸的作用观察DNA和RNA在细胞中的分布8%观察根尖分生细胞的有丝分裂与酒精1:1配制成解离液低温诱导植物染色体数目的变化与酒精1:1配制成解离液影响酶活性的条件5%一、常用仪器、试剂或药品的用途1、NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH2、Ca(OH)2:鉴定CO23、CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性4、HCl:解离(15%)或改变溶液的pH5、NaHCO3:提供CO2、作为酸碱缓冲剂6、酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于调节溶液pH7、NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14M或2M)8、琼脂:激素或其他物质的载体或培养基,用于激素的转移或培养基9、酒精:用于消毒(75%)、提纯DNA(95%)、叶片脱色、配制解离液(95%的冷酒精)及洗去浮色(50%)10、蔗糖:配制蔗糖溶液,测定植物细胞液浓度或观察质壁分离和复原11、二苯胺:用于DNA的鉴定(沸水浴,蓝色)12、甲基绿:检测DNA,呈绿色13、吡罗红:检测RNA,呈红色15、斐林试剂(甲液0.1g/mLNaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:鉴定可溶性还原性糖(沸水浴,砖红色沉淀)16、双缩脲试剂:用于蛋白质的鉴定(紫色)17、苏丹m染液(橘黄色)和苏丹w染液(红色):用于脂肪鉴定18、碘液:用于鉴定淀粉(变蓝色)19、龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色20、改良苯酚品红染液:检测染色体,红色21、健那绿B:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色22、重铭酸钾溶液:检测酒精,呈灰绿色23、澳麝香酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄24、吲哚酚试剂:用于维生素C的鉴定25、伊红美蓝:鉴定有无大肠杆菌的存在26、亚甲基蓝:用于活体染色或检测污水中的耗氧性细菌(细菌的氧化可使之褪色)27、pH试纸:检验物质的酸碱性,如乳酸28、卡诺氏固定液:用于细胞有丝分裂根尖的固定29、解离液(5%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成):有丝分裂中根尖的分离与固定30、层析液:用于叶绿素的分离,主要类型:①由20份石油醚(在60〜90℃下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成;②95%的酒精;③93号汽油;④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。31、20%新鲜肝脏研磨液:含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O232、无土营养液:用于植物无土栽培33、柠檬酸钠:血液抗凝剂35、秋水仙素(C22H25O6N):用于单倍体育种,作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺缍体的形成,可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,有剧毒,使用时应特别注意。36、滤纸:过滤或纸层37、纱布、尼龙布:过滤,遮光38、云母片:阻止生长素传递39、微电流计:测量神经元受刺激时,神经元细胞内或细胞间的兴奋传递情况二、实验技术1、光学显微镜的使用:包括显微镜的取送、放置、旋转、对光(反光镜及光圈的使用)、低倍观察、高倍观察、镜头的擦拭;显微镜的放大倍数(是物体的长和宽,不是面积,也不是体积)、焦距问题、物镜离装片的远近、准焦螺旋的使用、显微镜使用时物象移动方向、显微镜使用时异物的判断(通常通过移动玻片、转动转换器或旋转目镜来判断)。2、临时装片、切片和涂片的制作:适用于显微镜观察,凡需在显微镜下观察的生物材料,必须先制成临时装片、切片和涂片,如“观察植物细胞的质壁分离和复原”中要制作洋葱表皮细胞的临时装片,在“生物组织中脂肪的鉴定”中要制作花生种子的切片,在“观察动物如人体血液中的细胞”中要制作血液的涂片等等。3、研磨,过滤:适用于从生物组织中提取物质如酶、色素等,要求学生熟练掌握研磨、过滤的方法,如研磨时要先将生物材料切碎,然后加入摩擦剂(常用二氧化硅)、提取液和其它必要物质,充分研磨之后,往往要进行过滤,以除去渣滓,所用过滤器具则根据需要或根据试题中提供的器材加以选用,如可用滤纸、纱布、脱脂棉、尼龙布等。4、解离技术:适用于破坏细胞壁,分散植物细胞,制作临时装片。
离等。恒温技术:适用于有酶参加的生化反应,一般用水浴或恒温箱,根据题目要求选用。离等。层析技术:适用于溶液中物质的分离。主要步骤包括制备滤纸条、划滤液细线、层析分植物叶片中淀粉的鉴定:适用于光合作用的有关实验,主要步骤包括饥饿处理、光照、酒精脱色、加碘等。8、根尖培养技术:有丝分裂实验的材料9、小动物饲养技术:饲养小白鼠等实验动物10、无土栽培技术:用于植物必需元素与非必需元素的鉴定11、微电流测量技术:用于刺激神经元细胞时,兴奋的传递情况。刺激神经元的某一点时,相对于该神经元的刺激点而言,其两侧均有电位变化(用两表则可在两侧任意位置,用一表测定则相对于受刺激点不等距位置有两次偏转)可证明在同一神经元内具有双向传递性;刺激突触前神经元时,突触后神经元可测得电位变化,刺激突触后神经元时,突触前神经元测不到电位变化,可证明突触传递具有单向传递性。12、pH控制技术:利用缓冲液调节pH,确保实验环境的pH相对稳定。三、实验方法1、显微观察法:如“观察细胞有丝分裂”“观察叶绿体和细胞质流动”“用显微镜观察多种多样的细胞”等。2、观色法:如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”“观察动物毛色和植物花色的遗传”“DNA和RNA的分布”等。3、同位素标记法(元素示踪法):如“噬菌体浸染细菌的实验”“恩格尔曼实验”等。4、补充法:如用饲喂法研究甲状腺激素,用注射法研究动物胰岛素和生长激素,用移植法研究性激素等。5、摘除法:如用“阉割法、摘除法研究性激素、甲状腺激素或生长激素的作用”“雌蕊受粉后除去正在发育着的种子”等。6、杂交法:如植物的杂交、测交实验等。7、化学分析法:如“番茄对Ca和Si的选择吸收”“叶绿体中色素的提取和分离”等。8、理论分析法:如“大、小两种草履虫的竞争实验”“植物向性动物的研究”等。9、模拟实验法:如“渗透作用的实验装置”“分离定律的模拟实验”等。10、引流法:临时装片中液体的更换,用吸水纸在一侧吸引,于另一侧滴加换进的液体。11、实验条件的控制方法⑴增加水中02:泵入空气或吹气或放入绿色植物;⑵减少水中O2:容器密封或油膜覆盖或用凉开水;⑶除去容器中CO2:NaOH溶液、Na2CO3溶液;⑷除去叶中原有淀粉:置于黑暗环境(饥饿);⑸除去叶中叶绿素:酒精水浴加热(酒精脱色);⑹除去植物光合作用对呼吸作用的干扰:给植株遮光;⑺单色光的获得:棱镜色散或透明薄膜滤光;⑻血液抗疑:加入柠檬酸钠(去掉血液中的Ca2+);⑼线粒体提取:细胞匀浆离心;⑩骨无机盐的除去:HCl溶液;⑪消除叶片中脱落酸的影响:去除成熟的叶片;⑫消除植株本身的生长素:去掉生长旺盛的器官或组织(芽、生长点);⑬补充植物激素的方法:涂抹、喷洒、用含植物激素的羊毛脂膏或琼脂作载体;⑭补充动物激素的方法:口服(饲喂)、注射;(15)阻断植物激素传递:插云母片法。12、实验结果的显示方法一一实验现象的观测指标⑴光合作用:O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。例:水生植物可依气泡的产生量或产生速率;离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。⑵呼吸作用:O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量⑶原子或分子转移途径:同位素标记法或元素示踪法⑷细胞液浓度大小或植物细胞活性:质壁分离与复原⑸溶液浓度的大小:U型管+半透膜⑹甲状腺激素作用:动物耗氧量、发育速度等⑺生长激素作用:生长速度(体重、体长变化)⑻胰岛素作用:动物活动状态(是否出现低血糖症状一一昏迷)⑼胰高血糖素作用:尿糖的检测(在尿液中加班氏试剂进行沸水浴,看是否出现砖红色沉淀)⑩菌量的多少:菌落数、亚甲基蓝褪色程度⑪生长素作用及浓度高低的显示:可通过去除胚芽鞘后补充生长素后的胚芽生长情况来判断(弯曲、高度)⑫淀粉:碘液(变蓝色)⑬还原性糖:斐林试剂/班氏试剂(沸水浴后生成砖红色沉淀)(14)CO2:Ca(OH)2溶液(澄清石灰水变浑浊)5乳酸:pH试纸⑯O2:余烬复燃⑰蛋白质:双缩脲试剂(紫色)⑱脂肪:苏丹ni染液(橘黄色);苏丹W染液(红色)⑲DNA:二苯胺(沸水浴,蓝色)、甲基绿(染色后,呈绿色)⑳RNA:吡罗红(呈红色)、苔黑酚乙醇溶液四、实验原则1、对照原则阳性对照:给对照组施以已经被证明是一种有效的处理因素。空白对照:指不做任何实验实验的对照组或不给对照组以任何处理因素。值得注意的是,不给对照组任何处理因素是相对实验组而言的,实际上对照组还是要做一定的处理,只是不加实验组的处理因素,或者说相对于实验组而言,除实验变量外,别的处理与实验组完全相同。空白对照能明白地对比和衬托实验组的变化和结果,增加说服力。通常未经实验因素处理的对象组为对照组,经实验因素处理的对象组为实验组;或处于正常情况下的对象组为对照组,未处于正常情况下的对象组为实验组。自身对照:指对照组和实验组都在同一研究对象上进行,不另设对照。自身对照方法简便,关键是看清实验处理前后现象变化的差异。实验处理前的对象状况为对照组,实验处理后的对象变化则为实验组。相互对照:不另设对照组,而是几个实验组相互对比对照,其中每一组既是实验组也是其他级别的对照组。在等组实验法中,若不设空白对照,则大都是运用相互对照。相互对照较好地平衡和抵消了无关变量的影响,使实验结果具有说服力。条件对照:指虽然给对象施以某种实验处理,但是这种处理是作为对照意义的,给定的处理因素正是为了保证实验中对照组与实验组相比只是少了实验变量的影响,或者说这种处理不是实验假设所给定的实验变量意义的。通常施以条件因素的对象组为对照组,施以实验因素的对象组为实验组。标准对照:生物生理、生化的某些项目也都有相应的标准,将观察测定的实验数值与规定的标准值相比较,以确定其正常与否的对照方法。2、单一变量原则理解该原则,应弄清几组变量:即实验变量与反应变量,无关变量与额外变量。①实验变量与反应变量:a.实验变量是研究者主动操纵的条件和因子,是作用于实验对象的刺激变量(也称自变量),自变量须以实验目的和假设为依据,应具有可变性和可操作性。b.反应变量(又称因变量或应变量),是随自变量变化而产生反应或发生变化的变量,反应变量是研究是否成功的证据,应具可测性和客观性。c.二者关系:实验变量是原因,反应变量是结果,即具因果关系。②无关变量与额外变量:无关变量又称干扰变量、控制变量,是指与研究目标无关,但却影响研究结果的变量。额外变量,指实验中由于无关变量所引起的变化和结果。无关变量是原因,额外变量是结果,二者也具有因果关系。为确保实验结果的准确,实验者应严格控制无关变量,防止额外变量的出现,否则实验结果的真实性无法得到认定,如我们常在实验过程中强调“选取生长状况相同的幼苗”“数量大小相同的种子”“置于相同并适宜条件下培养”“力口入等量的清水”等均是为了控制无关变量对实验结果的干扰。所谓单一变量原则,就是要尽可能控制无关变量的作用,以确保实验变量的唯一性。【案例剖析】例如,生物课本内温度对酶活性影响的实验中:实验变量是低温(冰),适温(60℃),高温(沸水);酶的活性变化即反应变量;试管的洁净度,淀粉酶的稀释度,可溶性淀粉的浓度,碘液的量和浓度,温度处理时间,操作程序等是无关变量。实验中不论有几个实验变量,都应做到每个自变量对应一个因变量,此外还要做到操作规范。在实验设计、实施的全过程中,应严格操纵实验变量,严格控制无关变量,尽可能消除误差,获取较为精确的反应变量。3、等量原则实验中要做到“单一变量”(即实验变量)外,其它变量需注意等量原则,即:①生物材料要相同:即所用生物材料的数量、质量、长度、体积、来源和生理状况等方面要尽量相同或至少大致相同。②实验器具要相同:即试管、烧杯、水槽、广口瓶等器具的大小、型号、洁净度等相同。③实验试剂要相同:即试剂的成分、浓度、体积要相同。即使使用不同试剂也要注意体积相同。④处理方法要相同:保温或冷却、光照或黑暗、搅拌或振荡都要一致。有时尽管某种处理对对照实验来说,看起来似乎是毫无意义的,但还是要作同样的处理。4、科学原则:即实验方案的设计要科学,包括原理、操作、程序、方法等。5、安全原则:尽量避免危险性操作(如确需使用,应注明,防止环境污染和人身伤害)。如:在“叶绿体色素的提取和分离”实验中,使用丙酮时,强调指出:“用滤纸打孔盖住研钵进行研磨”以减少挥发。6、可行原则:实验设计应注意取材方便、药品便宜、装置简单、经济实用、步骤简洁、操作性强、花时经济,在现有实验条件下能够完成。五、操作设计注意事项1、应注意实验选材的合理性如:⑴所选材料应有利于实验现象的观察:如可溶性还原糖的鉴定中应选择“白色或近白色”的材料;⑵所选材料应容易获得:尽可能选择无明显季节性、地域性的材料;⑶所选材料应价格便宜2、应注意操作细节的合理性如:⑴溶液或培养基灭菌后是否要冷却后使用?冷却后⑵向淀粉糊中加了唾液后是否要振荡试管呢?要⑶酶促反应的试管如何加热?是直接加热,还是水浴加温?水浴加热⑷用酒精溶解叶中叶绿素时,酒精直接或隔水加热?隔水加热⑸使甲状腺激素、胰岛素、生长激素进入动物体内的方法应如何操作?是饲喂,还是注射?甲状腺激素饲喂,胰岛素、生长激素注射⑹不同的情况下要合理地选用不同的水。如:清水、池水、凉开水、蒸馏水、生理盐水。3、应注意操作顺序的合理性例:为“验证pH对唾液淀粉酶活性的影响”。在如下实验步骤中,最佳顺序应该是①在1-5号试管中分别加入0.5%的淀粉液2mL;②加完淀粉液后,向各试管中加入相应的缓冲液3mL,使各试管中反应液的pH依次稳定在5.00、6.20、6.80、7.40、8.00;③分别向1-5号试管中加入0.5%唾液1mL,然后进行37℃恒温水浴;④反应过程中,每隔1min从第3号试管中取出一滴反应液,滴在比色板上,加一滴碘液显色,待呈橙黄色时,立即取出5支试管,加碘液显色并比色,记录结果;A.①②③④ B.③①②④ C.③②①④ D.①③②④答案:C4、应注意实验方案的可操作性例:为“验证镁是植物生活的必需元素”。请写出你的设计思路。方案1:将幼苗中运载Mg2+的载体去掉方案2:用去掉镁的砂性土壤培养幼苗方案3:将植物体内的Mg2+分离出来方案4:取生长状况一致的大豆幼苗,用符合实验要求的容器,对照组盛有含植物必需的各种矿质元素的完全培养液,实验组盛有不含镁离子的完全培养液,两组置于相同的适宜条件下培养;观察比较两组植物的生长发育情况。方案1、2、3均缺乏可操作性,正确思路应该是方案4。六、实验类型的区分与实验结果的预测和分析1、验证性实验与探究性实验的判断实验目的不同:验证性实验旨在通过实验让学生熟悉固有的现象,增加对已有知识的掌握;探究性实验的目的是在假设的指引下获取支持假设或推翻假设的科学证明,并对实验所得现象进行分析以获得具有价值的结论。实验步骤有别:验证性实验往往是在已有的实验步骤设计框架下进行操作的过程,操作者的任务是严格按照设计步骤进行准确的操作,求得预想中的实验结果,实验者重在理解实验原理、掌握操作要领和实验的一些基本技能。探究性实验的步骤在实验者的设计中占有主要的地位,什么样的步骤取决于实验者对探究性实验目的理解程度,对实验结果的假想的细致程度。实验者在自己的假设中通过创新思维活动设计出实验步骤并完成操作,既有对步骤的期望也有对操作精确度的自我要求,目标是获得假设的成功。实验结果不同:验证性实验的实验结果是已知的,探究性实验的结果是未知的。2、区别不同实验,全面预测结果:可能的结果都要预测到。对探究性实验的结果的预测和分析要从“是”“不是”和“中间”三个方面进行;而验证性实验结果的预测和分析则一般从“是”“否”两个方面进行。3、正确分析实验现象,找出实验原理、实验现象的内在联系,给出实验结论。七、实验语言组织1、应注意实验组别的编号如:凡实验中涉及到两组或两组以上,所用器材需用1、2、3……或A、B、C……或甲、乙、丙……等加以编号便于区分。2、应注意分步描述实验步骤如:“第一步……;第二步……;……””1、……;2、……;……”3、对在量上难以准确描述的,应尽可能用“定性”的语言表达如:“一段时间”“适宜温度”“适量的”“一定量的”“用相同型号的……”“选取生长状况相同的……”“大小数量相同的……””等体积的”“置于相同且适宜条件下”“加入等量的……”等。4、叙说中注意语言规范、表达准确,不用含糊的口语如:“盖玻片”不说成“薄的玻璃片”“等量的”不说成“一样多的”“振荡”不说成“晃动”“摇动”;加碘后,“不变蓝”不说成“无色”或“没有颜色变化”“不变”不说成“无现象”等。5、注意避免“词不达意”如:如图二,有些学生描述为“分别在甲、乙两试管中加入八、B物质”,如此表达则成了图三的含义,显然与图二不符。准确的描述应为“在甲乙两支试管中分别加入\、B物质”或“在甲试管中加入A物质,乙试管中加入B物质。”6、选用表格、曲线等形式进行具体、准确表达若需使用表格、曲线时,应注意表格设计合理、曲线描绘准确,做到具体、实用、直观,易理解。高中生物教材实验归纳.高中教材观察类实验比较实验名称细胞的状态染色剂生物材料观察DNA和RNA在细胞中的分布死细胞甲基绿、吡罗红人的口腔上皮细胞观察线粒体活细胞健那绿观察细胞的减数分裂死细胞无(为固定装片)蝗虫精母细胞低温诱导植物染色体数目的变化死细胞改良苯酚品红染液洋葱根尖分生区细胞观察细胞的有丝分裂死细胞龙胆紫(或醋酸洋红)观察多种多样的细胞活或死细胞无需染色酵母菌细胞、水绵细胞、叶的保卫细胞、鱼的红细胞等观察叶绿体活细胞藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶)观察植物细胞的质壁分离与复原活细胞紫色洋葱鳞片叶表皮细胞.高中教材鉴定类实验比较实验名称鉴定对象试剂颜色生物材料备注淀粉的鉴定淀粉碘液蓝色脱色的叶片无还原糖的鉴定还原糖斐林试剂砖红色沉淀苹果或梨的匀浆等甲乙液现配现用、水浴加热脂肪的鉴定脂肪苏丹m(或W)染液橘黄(或红)色花生种子切片需用高倍镜观察蛋白质的鉴定蛋白质双缩脲试剂紫色豆浆、稀蛋清等先加A液,后加B液,摇匀使用尿糖的检测葡萄糖葡萄糖试纸有色水、葡萄糖溶液、三份模拟“尿样”无绿叶中色素的提取和分离四种色素提取液:无水乙醇;分离液:层析液胡萝卜素:橙黄色;叶黄素:黄色;叶绿素a:蓝绿色;叶绿素b:黄绿色新鲜的绿叶(如菠菜叶)加入二氧化硅是为了研磨得更充分;碳酸钙可防止研磨中色素被破坏.高中教材调查类实验比较学习、研究性课题调查对象统计方法计算公式调查人群中的遗传病人类某种遗传病汇总法发病率=X100%种群密度的取样调查动物标志重捕法植物样方法所取各样方的种群密度和所取样方数土壤中小动物类群丰富度的研究土壤中的小动物取样器取样进行采集、调查的方法记名计算法、目测估计法.高中教材实验方法汇总⑴制作DNA分子双螺旋结构模型一一构建物理模型法。(2)种群数量增长模型一一构建数学模型法。(3)分离各种细胞器一一差速离心法。(4)证明DNA进行半保留复制一一密度梯度离心法。(5)分离叶绿体中的色素一一纸层析法。(6)观察根尖分生组织细胞的有丝分裂一一死体染色法。(7)观察线粒体一一活体染色法。(8)探究酵母菌的呼吸方式一一对比实验法和产物检测法。(9)赫尔希和蔡斯的噬菌体侵染细菌的实验一一同位素标记法。(10)摩尔根证明基因在染色体上一一假说一演绎法。(11)萨顿提出“基因位于染色体上”的假说一一类比推理法。(12)调查土壤中小动物类群的丰富度一一取样器取样法。(13)估算种群密度(运动能力强的生物)一一标志重捕法。(14)估算种群密度(运动能力弱的生物)一一样方法。.高中教材实验基本技术(1)玻片标本的制作技术①应用:凡需在显微镜下观察的生物材料,都必须制作成临时装片、切片或涂片。②举例:如质壁分离与复原实验中要制作洋葱外表皮细胞的临时装片,脂肪鉴定中要制作切片。③步骤:如“观察洋葱根尖分生组织细胞的有丝分裂”:取材一解离一漂洗一染色一制片一观察。(2)解离技术和用胰蛋白酶处理动物组织技术前者用于植物,后者用于动物,目的都是使细胞分散开。(3)纸层析技术①方法:制样液一制备滤纸条一点样液一层析一观察实验结果。②举例:如绿叶中色素的提取和分离。(4)比色法①举例:如生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定;DNA鉴定;淀粉、尿糖鉴定等。②原理:生物组织中的有机物与某些化学试剂相互作用,能产生颜色反应,可以根据颜色反应鉴定生物组织中某些有机物的存在。(5)恒温技术①举例:如探究酶的高效性、专一性和受温度影响的实验以及细胞培养实验。②实验室常用的恒温技术:a.水浴;b.恒温箱。(6)研磨、过滤技术①举例:如绿叶中色素的提取。②材料作用:研磨过程中加入SiO2是为了研磨得充分,色素提取时加CaCO3是为了防止研磨中色素被破坏。.高中生物实验中常用的化学药品名称作用实验应用酒精溶液50%的酒精洗去浮色检测生物组织中的脂肪75%的酒精杀菌、消毒微生物的培养技术95%的酒精迅速杀死细胞观察植物细胞的有丝分裂15%的盐酸细胞分离无水乙醇溶解色素绿叶中色素的提取和分离.(1)经典实验的选材①体验制备细胞膜的方法a.选材要求:无核膜和各种细胞器膜;b.常用材料:哺乳动物成熟的红细胞。②观察DNA和RNA在细胞中的分布常用材料:人的口腔上皮细胞。③用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体实验常用材料:新鲜的藓类的叶或者菠菜叶、黑藻叶。④观察植物细胞的质壁分离与复原实验a.选材要求:活细胞、大液泡、液泡中含有色素;b.常用材料:洋葱鳞片叶外表皮细胞。⑤绿叶中色素的提取和分离a.选材要求:选用新鲜的含叶绿素丰富的嫩叶;b.常用材料:新鲜的绿叶,如菠菜的绿叶。⑥观察根尖分生组织细胞的有丝分裂a.选材要求:选用的材料应具有很强的分裂增生能力;b.常用材料:洋葱的根尖细胞。⑦低温诱导染色体数目的变化a.选材要求:能够进行有丝分裂;b.常用材料:洋葱根尖细胞。(2)经典实验选材的分析说明①观察DNA和RNA在细胞中的分布不能选用哺乳动物成熟的红细胞。原因:哺乳动物成熟的红细胞无细胞核,也就几乎不含DNA、RNA。②不能用观察叶绿体的材料来观察线粒体。原因:叶绿体中的色素颜色会掩盖健那绿染色后的颜色变化。③观察细胞的有丝分裂或低温诱导植物染色体数目的变化时,应注意观察呈正方形的根尖分生区细胞。原因:正方形的根尖分生区细胞处于分裂状态,长方形的细胞可能是根尖的伸长区或成熟区的细胞,没有分裂能力。④观察细胞的减数分裂所选的材料可以是动物的精巢和植物的雄蕊,而不宜选用动物的卵巢和植物的雌蕊。原因:雄配子的产生数量远远多于雌配子,更容易观察到减数分裂的细胞。⑤观察叶绿体时,若选用菠菜叶则取稍带些叶肉的下表皮。原因:靠近下表皮的叶肉细胞中的叶绿体较大而数目较少。⑥观察植物细胞的质壁分离与复原应选取成熟的植物细胞。原因:成熟的植物细胞含有大的液泡。高中生物教材的实验涉及的试剂(化学药品)很多,分散在各章节中,很是零碎。现我把它们整理归纳在一起,便于大家进行比较复习,并精选部分相关试题,以巩固这方面的知识。1整理归纳实验试剂 鉴定物质、试剂的作用 颜色反应教材说明斐林试剂还原糖砖红色必修1P18水浴加热班氏糖定性试剂用于尿糖的测定砖红色双缩脲试剂蛋白质紫色必修1P18苏丹m染液脂肪橘黄色必修1P18显微镜苏丹W染液脂肪红色必修1P18显微镜碘液淀粉蓝色必修1P19本尼迪特试剂麦芽糖红色二苯胺试剂DNA蓝色选修1P55水浴加热甲基绿染色剂DNA绿色必修1P26显微镜吡罗红染色剂RNA红色必修1P26显微镜0.1g/mL柠檬酸钠与鸡血混合,防凝血选修1P56血液抗凝剂澳麝香草酚蓝水溶液CO2黄色必修1P92重铭酸钾溶液酒精灰绿色必修1P92酸性环境15%盐酸和95%酒精使根尖细胞相互分散开必修1P115解离液5%盐酸pH对酶活性的影响必修1P84使酶失活8%盐酸改变细胞膜的通透性必修1P26显微镜50%的酒精溶液用于洗去浮色70%的酒精溶液采集小动物的保存必修3P7675%的酒精溶液用于杀菌消毒95%的酒精溶液用于凝集DNA选修1P56冷却95%的酒精溶液等提取叶绿体中色素必修1P9895%的酒精溶液叶片脱色隔水加热丙酮用于叶绿素的分离必修1P98层析液秋水仙素诱导染色体数目加倍必修2P88抑制纺锤体形成20%新鲜肝脏研磨液促进H2O2分解产生O2必修1P78含有H2O2酶3.5%FeCl3溶液促进H2O2分解产生O2必修1P78无机催化剂碘液温度对酶活性的影响必修1P84斐林试剂pH对酶活性的影响必修1P84龙胆紫溶液染色体紫色必修1P115显微镜醋酸洋红液染色体红色必修1P115显微镜改良苯酚品红染液染色体红色必修2P88显微镜卡诺氏液固定细胞的形态必修2P88固定液健那绿染液线粒体蓝绿色必修1P47活体染色剂中性红液泡红色活体染色剂二氧化硅有助于研磨得充分必修1P98碳酸钙防止研磨中色素被破坏必修1P98中和有机酸氯化钙增加细菌细胞壁的通透性选修3P130.3g/mL的蔗糖溶液可用于质壁分离实验必修1P62显微镜0.9%氯化钠溶液可作为生理盐水相当于细胞内液的渗透压5%NaOH溶液pH对酶活性的影响必修1P84使酶失活10%NaOH溶液用于吸收CO2必修1P92澄清石灰水检测CO2变混浊必修1P920.14mol/LNaCl溶液析出DNA选修1P550.015mol/LNaCl溶液溶解DNA选修1P552mol/LNaCl溶液溶解DNA选修1P55N—1一萘基乙二胺盐酸盐亚硝酸盐玫瑰红色选修1P10估算在泡菜中亚硝酸盐的含量刚果红染料纤维素红色复合物选修1P28筛选纤维素分解菌伊红美蓝鉴别是否存在大肠杆菌等细菌菌落呈深紫色大肠杆菌代谢产物(有机酸)与伊红美蓝结合结晶紫用于自生固氮菌的分离紫色给细菌着色亚甲基蓝监测水污染情况蓝色褪去活体染色剂注:表中“教材”是指人教版(经全国中小学教材审定委员会2004年初审通过)普通高中课程标准实验教科书。高中生物常用仪器、试剂或药品的用途.NaOH:用于吸收CO2或改变溶液的pH.Ca(OH)2(澄清石灰水):鉴定CO2.CaCl2:提高细菌细胞壁的通透性.HCl:解离(15%)或改变溶液的pH.NaHCO3:提供CO2、作为酸碱缓冲剂.酸碱缓冲剂(Na2CO3/NaHCO3,Na2HPO4/NaH2PO4):用于调节溶液pH.NaCl:配制生理盐水(0.9%)或用于提取DNA(0.14mol/L或2mol/L).琼脂:激素或其他物质的载体或培养基,用于激素的转移或培养基.酒精:用于消毒(75%)、洗去浮色(50%)、提纯DNA(95%的冷酒精)及叶片脱色、配制解离液(95%).蔗糖:配制蔗糖溶液(0.3g/mL),测定植物细胞液浓度或观察植物细胞质壁分离和复原.二苯胺试剂:用于DNA的鉴定(沸水浴,蓝色).甲基绿试剂:检测DNA,呈绿色.吡罗红试剂:检测RNA,呈红色.苔黑酚乙醇溶液:用于RNA的鉴定.斐林试剂(甲液0.1g/mLNaOH、乙液0.05g/mLCuSO4)/班氏试剂:鉴定可溶性还原性糖(50〜60℃温水浴加热,砖红色沉淀).双缩脲试剂:用于蛋白质的鉴定(紫色).苏丹m染液(橘黄色)和苏丹W染液(红色):用于脂肪鉴定.碘液:用于鉴定淀粉(变蓝色).龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈紫色,后者呈红色.改良苯酚品红染液:检测染色体,红色.健那绿B染液:检测线粒体,专一性使线粒体染色呈蓝绿色.重铭酸钾溶液:检测酒精,呈灰绿色.澳麝香酚蓝水溶液:检测CO2,由蓝变绿再变黄.卡诺氏固定液(3份95%酒精与1份冰醋酸混合均匀):用于细胞有丝分裂根尖的固定.解离液(15%盐酸和95%酒精按1:1的比例配成):溶解细胞间质,使组织中的细胞相互分离开来.层析液:用于叶绿素的分离,主要类型:①由20份石油醚(在60〜90℃下分馏出来的)、2份丙酮和1份苯混合而成;②95%的酒精;③93号汽油;④9份体积分数为95%的酒精和1份苯混合;⑤汽油或四氯化碳加少许无水硫酸钠。.20%新鲜肝脏研磨液:含有H2O2酶,可促进H2O2分解产生O2.秋水仙素(C22H25O6N):用于多倍体育种、单倍体育种。其作用机理是可抑制植物细胞有丝分裂中纺锤体的形成,可导致细胞内染色体数目加倍。是1937年发现的,从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,有剧毒,使用时应特别注意。.滤纸:过滤或纸层.纱布、尼龙布:过滤,遮光.云母片:阻止生长素传递高中生物实验方法.显微观察法:如“用显微镜观察多种多样的细胞”、“生物组织中脂肪的鉴定”、“观察DNA和RNA在细胞中分布”、“用高倍镜观察线粒体和叶绿体”、“观察植物细胞的质壁分离和复原”、“观察植物细胞的有丝分裂”等。.观色法:如“生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定”、“观察DNA和RNA在细胞中的分布”等。3.同位素标记法(元素示踪法):是指利用放射性元素作为示踪剂对研究对象进行标记的微量分析方法,研究细胞内的元素或化合物的来源、组成、分布和去向等,进而了解细胞的结构和功能、化学物质的变化、反应机理等。用于示踪技术的放射性同位素一般是用于构成细胞化合物的重要元素。如3H、14C、15N、18O、32P、35S等。如“研究分泌蛋白的合成与分泌”、“鲁宾和卡门实验”(用同位素标记法证明了光合作用释放的氧气全部来自水)、“卡尔文实验”(用同位素标记法探明了光合作用中碳原子的转移途径)、“噬菌体侵染细菌的实验”、“DNA分子的半保留复制”等。①利用放射性同位素3H、14C、18O作为示踪原子来研究光合作用过程中某些物质的变化过程,从而揭示光合作用的机理。②利用放射性同位素3H等标记胸腺嘧啶脱氧核甘酸以研究有丝分裂。③利用放射性同位素15N探究DNA分子半保留复制的特点。④利用18O作为示踪原子来研究细胞呼吸过程中某些物质的变化过程,从而揭示呼吸作用的机理。⑤用放射性同位素35S标记蛋白质或32P标记DNA,来进行噬菌体侵染细菌的实验。.杂交法:如植物的杂交、测交实验等。【鉴定杂合子和纯合子的方法】若后代无性状分离,则待测个体为纯合子测交法若后代有性状分离,则待测个体为杂合子若后代无性状分离,则待测个体为纯合子自交法若后代有性状分离,则待测个体为杂合子动物一一测交法测交法(最有效的方法)植物 自交法(最简单的方法)花粉鉴定法(比较繁琐但可靠)花粉鉴定法:非糯性与糯性水稻的花粉遇碘呈现不同颜色,杂交非糯性水稻的花粉是配子,遇碘液呈现两种不同颜色,且比例为1:1,从而直接证明了杂种非糯性水稻在产生花粉的过程中,两个遗传因子分别发生分离,分别进入不同的配子中。.化学分析法:如“番茄对Ca和Si的选择吸收”、“叶绿体中色素的提取和分离”等。.理论分析法:如“大、小两种草履虫的竞争实验”、“植物向性运动的研究”等。.模拟实验法:如“渗透作用的实验装置”、“分离定律的模拟实验”等。.实验结果的显示方法一一实验现象的观测指标。(1)光合作用:O2释放量或CO2吸收量或有机物生成量。例:水生植物可依气泡的产生量或产生速率;离体叶片若事先沉入水底可依单位时间内上浮的叶片数目;植物体上的叶片可依指示剂(如碘液)处理后叶片颜色深浅。(2)呼吸作用:O2吸收量或CO2释放量或有机物消耗量,有色液滴的移动情况等。(3))细胞液浓度大小或植物细胞活性:质壁分离与复原(4)溶液浓度的大小:U型管+半透膜(5)甲状腺激素作用:动物耗氧量、发育速度等(6)生长激素作用:生长速度(体重、体长变化)(7)胰岛素作用:动物活动状态(是否出现低血糖症状一一昏迷)
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