公共卫生事件采样规范课件

公共卫生事件采样规范公共卫生事件采样规范

临淄区疾病预防控制中心201205传染病疫情采样传染病概念：传染病是指具有传染性的致病性微生物或生物，如细菌、病毒、立克次体、寄生虫等侵入人体，致使人体健康发生某些损害，并能危及其他不特定人群的生命和健康，甚至对整个社会造成严重影响的疾病。传染病分类：按人接触的传播途径不同分经呼吸道传播的传染病、经肠道传播的传染病、经虫媒传播的传染病、经血液传播的传染病（一）呼吸道传染病标本的采集和现场检测用品呼吸道传染病概述：呼吸道传染病是指病原体从人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等部位侵入后引起的有传染性的疾病。（所有呼吸道传染病都经空气，包括飞沫、尘埃、气溶胶等传播方式）经呼吸道传播的疾病主要有：肺鼠疫、传染性非典型肺炎、人感染高致病性禽流感、麻疹、肺炭疽、肺结核、流行性脑脊髓膜炎、百日咳、白喉、猩红热、流行性感冒、流行性腮腺炎、风疹等法定管理的传染病，以及军团病、普通感冒、腺病毒、呼吸道合胞病毒感染、水痘等等非法定管理的但较为常见的传染病，上述传染病在某种情况下均可引发突发公共卫生事件2003年1月，广东省首次报告SARS病例，截止2003年6月，中国、越南、加拿大等国出现了SARS病例或局部暴发，2003年12月—2004年1月广东省再次出现4例社区感染SARS病例，2003年9月—2004年4月间，新加坡、中国台湾、北京分别发生实验室SARS感染事件。现场检测用品准备a、SARS病例或密切接触者采样登记表b、采血用品：10ml外螺旋带密封垫圈螺口塑料管、医用5ml或10ml一次性注射器针管或5ml真空针管、2ml螺口血清管、带有冰排的冰壶或冰包、止血带、棉拭子、酒精；c、采集鼻咽拭子用物品：鼻咽拭子保存管（套装）或15ml螺口管、3—5ml样本运送液（常用pH7.4—7.6的Hank，s，Eagle，s或水解乳蛋白或MEM）或等渗盐溶液或磷酸盐缓冲液、15ml螺口管、棉拭子；d、粪便、痰液、尸检组织保存管：50ml外螺旋带密封垫圈螺塑料管；e、其他：油性记号笔、一次性纸杯、一次纸漏斗、冰壶；污物袋；样品编号标签或条码纸。（2）现场个人防护用品：手套、防护眼镜、符号“N95标准的防护口罩、鞋套、白大衣、隔离衣、洗手液、75%酒精等、消毒液等。（3）采集患者样本一式三份，其中两份分别送两家有SARS检测认定资格的实验室同时进行平行检测，一份样品备复核；（4）实验标本的采集：SARS预警病例、疑似病例、病例和密切接触者的标本包括血液、鼻咽拭子或含漱液、粪便。a、鼻咽拭子：将棉签平行于上颚插入鼻孔，保持几秒钟，吸收分泌物。b、口咽拭子：适度用力用棉签拭子拭抹咽后壁和扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入无菌、内装3—5ml样品运送液带垫圈的螺口塑料管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封。C、痰液：患者将痰液咳入无菌、内装4—5ml样品运送液、带垫圈的50ml螺口塑料管中，旋紧管盖并密封。d、下呼吸道样品（适用于气管插管病人）：收集气管吸取液或支气管灌洗液5—10ml放入无菌、带垫圈的50ml螺口塑料管中，立即密封。d、血清：采集5—10ml全血放入带垫圈的螺口管中，不加抗凝剂，待血液凝固后，分离血清，放置到-20℃以下冰箱冷冻保存，血凝块经灭菌处理后弃掉。采集时间：（5）标本运输：样本运输时须进行三层以上的包装。样本采集后加无菌外包装，置于专用密闭盒（金属或硬塑料材质）内，用具有吸水性和柔软的物质填充固定，置于保温箱内；由2人以上专人专车运送；短途（市内）运送加冰保冷即可；长途运送需加干冰保冷；空运需符合民航总局检疫部门有关传染性物质运输的规定。a、人感染高致病性禽流感病例或密切接触者采样登记表b、采血用品：10ml外螺旋带密封垫圈的螺口塑料管、医用5ml或10ml一次性注射器针管或5ml真空针管、2ml螺口血清管、带有冰排的冰壶或冰包、止血带、棉拭子、酒精；c、采集鼻咽拭子用物品：鼻咽拭子保存管（套装）或15ml螺口管、3—5ml样本运送液（常用pH7.4—7.6的Hank，s，Eagle，s或水解乳蛋白或MEM）或等渗盐溶液或磷酸盐缓冲液、15ml螺口管、棉拭子；d、粪便、痰液、尸检组织保管：50ml外螺旋带密封垫圈螺塑料管；e、其他：油性记号笔、一次性纸杯、一次纸漏斗、冰壶；污物袋；样品编号标签或条码纸。b、口咽拭子：适度用力用棉签拭子拭抹咽后壁和扁桃体部位，应避免触及舌部；迅速将棉签放入无菌、内装3—5ml样品运送液带垫圈的螺口塑料管中，在靠近顶端处折断棉签杆，旋紧管盖并密封。c、气管分泌物：收集气管吸取液或支气管灌洗液5—10ml放入无菌采集带垫圈的50ml螺口塑料管中，立即密封。d、血清：5—10ml全血放入带垫圈的螺口管中，不加抗凝剂，待血液凝固后，分离血清，放置到-20℃以下冰箱冷冻保存，血凝块经灭菌处理后弃掉；采集时间：第一份血清应在入院后24小时内采集；第二份血清应在发病后14—28天或出院当天采集。e、尸检组织样本：病人死亡后应尽早进行解剖，采集肺、气管、心脏、脾、肝、脑、肾和淋巴结等重要器官样本，采集每一部位时都应更换消毒器械，每种组织应多部位采集，每份样本应采集20—50g，淋巴结2个，分别置于50ml螺口塑料管中＄立即置于%70℃以下或冷藏送至有关实验室。样本运输时须进行三层以上的包装。样本采集后加无菌外包装，置于专用密闭盒（金属或硬塑料材质）内，用具有吸水性和柔软的物质填充固定，置于保温箱内；由2人以上专人专车运送；短途（市内）运送加冰保冷即可；长途运送需加干冰保冷；空运需符合民航总局检疫部门有关传染性物质运输的规定。采集的标本若不能在24小时内送达实验室，则应尽快在-70℃以下保存。食物中毒及肠道传染病采样食物中毒和肠道传染病是最常见的卫生事件,在食物中毒和肠道传染病诊断与技术处理过程中,实验室检查是非常重要的,检验结果直接关系到食物中毒和肠道传染病事件的控制和病人的救治,在食物中毒和肠道传染病流行病学调查中对可疑标本的采集与送检,是保证检验质量的前提,同时也是一项涉及面较广的基本技能,每个卫生工作者都应掌握。肠道传染病肠道传染病概述：肠道传染病是病原体经口侵入肠道并引起腹泻/或其他脏器及全身性感染的一类疾病，包括《中华人民共和国传染病防治法》规定的甲类传染病中的霍乱，乙类传染病中的伤寒和副伤寒、细菌性痢疾和阿米巴痢疾、脊髓灰质炎、甲、戊型病毒性肝炎，丙类传染病中的除霍乱、痢疾、伤寒和副伤寒以外的感染性腹泻病，以及其他通过肠道传播的传染病。引起这些感染的病原体中，细菌性病原体包括霍乱弧菌、痢疾杆菌、致病性大肠杆菌、伤寒杆菌和副伤寒杆菌、空肠弯曲菌、非伤寒沙门氏菌、副溶血弧菌等，病毒性病原体包括脊髓灰质炎病毒、甲型和戊型肝炎病毒、轮状病毒等，寄生虫性病原体包括阿米巴、蓝氏贾第鞭毛虫等。肠道传染病通常表现的症状有呕吐、腹痛、腹泻等，有时引起脱水、毒血症等并发症，严重会造成死亡。一些肠道传染病病原体会导致系统性感染，如伤寒和副伤寒杆菌引起发热及肝脾肿大、甲肝病毒引起肝炎、脊髓灰质炎病毒引起弛缓性肌肉麻痹等。霍乱的现场采样和现场检测用品准备霍乱概述：霍乱是由霍乱弧菌引起的一种急性肠道传染病，以发病急、传播快、波及范围广为特征，是《中华人民共和国传染病防治法》规定的甲类传染病之一，也是《国际卫生条例》规定的国际检疫传染病之一，《国内交通卫生检疫条例》也将其列为检疫传染病。目前引起霍乱暴发流行的菌株为O1、O139群。霍乱弧菌经水和食物传播，引起大流行的规律目前尚不十分明确，在我国引起霍乱流行的自然因素和社会因素依然存在。（1）现场检测用品准备：标本采样记录表、标本采样用拭子（注意用于PCR检测标本采集的拭子，应使用灭菌人造纤维拭子和塑料棒）、吸管、带盖可密闭的塑料管、自封式塑料袋、标签纸、油墨耐水的记录笔、装有运送培养基密闭试管、空培养皿和装好选择性（包括强性和弱性）培养基的培养皿、增菌培养基和装有增菌液的培养瓶（当现场有实验室和培养条件但不具备培养基时）、标准诊断血清和鉴别诊断用试剂、其他实验室需要的试剂与耗材。b、呕吐物标本：以吸管吸取1—3ml，置可密闭样品管立即送检。沾染粪便的衣物、物品、地面，以及尸体肠内容物等也可作为检材。c、食品标本：采集50—100g置可密闭灭菌广口瓶、塑料瓶或厚的自封式塑料袋内，常温下迅速送实验室。d、水产品标本：通常选取活的或新鲜水生动物为采集对象，冰冻水生动物也可作采集标本。采集水生动物鳃部和／或肠内容物等，置于采样瓶（管）或食品采样袋中密封，常温下送检；同时，以无菌棉签涂抹五只（条）以上的某类水生动物体表和／或水生动物肛门，置于碱性蛋白胨水中送检，每管碱性蛋白胨水作一份样品看待。ｅ、水体标本：用灭菌的500ml玻璃瓶采集相对静止的表层水（深度30cm以内）500ml，加盖密封后以牢固自封塑料袋包裹密封，常温下送实验室。f、物体表面标本：以灭菌拭子蘸碱性蛋白胨水涂抹可疑物体表面，置于装有碱性蛋白胨水中的可密闭玻璃或塑料试管中，常温送检。标本的运输：采集的标本宜立即接种培养基进行增菌和/或培养。不能立即检测的标本，需置于保存培养基中保存。所有标本应按照可能有霍乱弧菌对待，注意相应的生物安全要求，置于坚固、防水、密闭、耐压的转运箱中，专人送往实验室。鼠疫鼠疫概述：是由鼠疫杆菌引起的自然疫源性疾病，其在自然界的存在依靠一定种类的动物、媒介和适合这类生物生存的自然条件，因此具有地方性。鼠疫临床上可分为腺型、肺型、败血型和轻型等四型。疫鼠传播途径主要是由啮齿动物及其身上的蚤类将细菌传播给人。采样：当医师考虑到鼠疫诊断时，应在开始抗生素治疗前采集标本。如已开始治疗也同时需要采取标本，并注意采取恢复期标本。发生在1910年10月—1911年4月东北鼠疫，被称作20世纪上最严重的一次鼠疫大流行1910年10月25日首发于满洲里，死亡6万多人

1910年10月25日，满洲里首发鼠疫，11月8日即传至哈尔滨。之后疫情如江河决堤般蔓延开来，不仅横扫东北平原，而且波及河北、山东等地。鼠疫出现后，清政府下令各处严防。1910年12月，指派天津北洋陆军医学院副监督伍连德为全权总医官赶赴哈尔滨，开始了大规模的鼠疫防疫工作。随后又抽调所能调动的陆军军医学堂、北洋医学堂和协和医学院的医护人员以及直隶、山东等地方的一些医生，陆续前往东北。在伍连德等专家的建议下，清政府及各地方当局对疫情采取了科学而有效的防疫措施，比如组建各级防疫组织、颁布各种防疫法规，以及采取了隔断交通、对病人及疑似病人实施隔离、焚化尸体、对疫区严格消毒等具体防疫措施。

奉天（今沈阳）：正在进行消毒的防疫医院解剖室运尸队搬运鼠疫死者的尸体门前堆积的死者棺材集中焚烧的死者棺木情景俄国方面也积极配合，在阻止鼠疫在俄人居住区流行的同时，控制鼠疫经西伯利亚铁路的传播。在华的外国医生和学生，更是义无反顾志愿去疫区参与防疫工作，多人殉职。当地的中医也勇敢地主动医治鼠疫病人，伍连德组建的防疫队伍也付出巨大牺牲，直接接触病人的护理和救护人员将近一半人员殉职。但由于各种防疫措施处理得当，在当时疫情严重的局势下，不到4个月就成功扑灭了这场死亡人数达６万之多、震惊世界的烈性传染病，指挥这次防疫的伍连德也因此名扬世界。

1911年4月3日至28日，清政府在奉天组织召开了“万国鼠疫研究会”，这是近代在中国本土举办的第一次真正意义上的世界学术会议。出席会议的有来自英、美、法等11个国家的34位医学代表，伍连德当选为会长。各国专家对东北抗鼠疫行动给予了极高的评价。会上，伍连德被冠以“鼠疫斗士”称号。所有怀疑鼠疫的病人，都必须采取静脉血3—5ml，特别注意应在疾病急性期内采样如果因治疗原因在疾病急性期内未作出诊断，则需要采取恢复期血清，以起病后第14日，或退热后7日左右采样为宜。其他标本则根据病人的症状决定：疑似肠鼠疫，采取粪便标本；疑似肺鼠疫，采取咽拭子或咳痰标本；疑似眼鼠疫，采取眼分泌物；疑似皮肤鼠疫，采取脓泡穿刺液或溃疡创面的涂拭子；淋巴结肿大者采取淋巴结穿刺液；出现脑膜刺激征时应采取脑脊液。采取标本时应严格按有关规定进行个人防护。以无菌手续采取标本，置标本于无菌容器内；尽快送检，运送时4℃保存。炭疽炭疽概述：炭疽是由炭疽杆菌引起的人畜共患的急性传染病，炭疽为自然疫源性疾病，广泛存在于食草动物和牲畜群落当中，可以广泛污染境，人主要是通过接触被感染的牲畜，食入感染的牲畜肉，吸入含有炭疽芽胞杆菌的气溶胶、尘埃，接触污染的皮毛等畜产品而罹患此病。主要可分为皮肤炭疽（体表感染型）、肺炭（吸入感染型）、肠炭疽（经口感染型）及脑膜炎型炭疽等类型，主要表现为局部皮肤坏死及特异的黑痂，或表现为肺部、肠道及脑膜的急性感染。病程中常并发败血症，最终可因毒素引起机体功能衰竭而死亡，除皮肤炭疽外，病死率极高。怀疑炭疽诊断时，所有病人均采取血液标本；有肺部受累表现者取痰或咳痰标本；腹泻者取粪便标本，注意取其中血性部分；其他胀器受累者取相应标本，如脑膜刺激征者取脑脊液标本；如发现腔道或皮肤表面出血，也应采取血液标本。新发传染病概述：新发传染病是指在一个国家或地区新出现的或已经存在的，但发病率或发病地域迅速增加的传染病。新发传染病的病原体大致可分三类：一是在早已知道的疾病中发现了新的病原体，如消化溃疡的幽门螺旋杆菌；二是人间可能早已存在的传病，但近年来才被发现和认识，并发现了相应的病原体，如莱姆病的伯氏疏螺旋体、戊型和庚型肝炎病毒等；三是既往人类中不存在的、新出现的传染病病原体，如艾滋病病毒、O139霍乱弧菌等。采样原则为查找病原学病因，应采集病人急性期和恢复期的标本(粪便、尿液、血液、呕吐物、咽拭子、毛发、组织等)，并分析判定是否需采集对照人群、动物宿主、生物媒介及实施控制措施前后周围环境(水、食物、空气等)的相关标本，进行实验室检测。在疫情初期，采集标本时一般应对操作人员按强致病性微生物防护级别要求实施个人防护，对所采集的可能具有传染性的标本应按国家相应管理规范进行分装、保存、运输和检测。食物中毒现场采样及实验用品准备食物中毒:食物中毒是指食用了被生物性、化学性有害物质污染的食品，或者食用了含有有毒物质的食品后，出现的急性、亚急性食源性疾病。把有毒有害物质当作食品摄入后出现的急性、亚急性疾病也属于食物中毒。病原学分类食物中毒：化学性生物性生物性：细菌、病毒、真菌毒素肠道传染病：生物性生物性：细菌、病毒采样：细菌性食物中毒的样品采集最具代表性常见细菌性食物中毒有关症状与病原学检验项目的关系1.呕吐、腹泻发病急骤无发热。（可能病原菌：霍乱、副溶血及其他致病性弧菌、蜡样芽胞杆菌）2.腹泻、中低度发热<39℃。（沙门菌排除伤寒、甲乙丙副伤寒沙门菌）变形杆菌、致泻性大肠埃希氏菌（除肠出血性大肠埃希氏菌O157)3.高热腹泻>39℃，便血。（伤寒、甲乙丙副伤寒沙门菌，志贺氏菌、肠出血性大肠埃希氏菌O157。标本的采集原则1典型性原则食物中毒标本的采集不同于卫生评价采样,应根据中毒病人的临床表现和现场流行病学调查,初步判断中毒类型,根据可疑食物的性质采集可能含毒最多的标本。如细菌性食物中毒以病人用药前的排泄物、可疑残留食物,尤其是动物性食物为主;真菌及真菌毒素性食物中毒以食物原料为主;化学性与植物性食物中毒以可疑残留食物、食物原料、病人排泻物及体液为主。2适时性原则为了防止可疑食物丢失和被检物质组分发生变化,保证得到正确结论必须尽快采样送检。流调人员到达现场后应及时采样送检,临床有时需要实验室结果采用针对性的药物进行抢救,故采样送检的时间性在食物中毒处理中尤其重要。3适量性原则

由于引起食物中毒的毒物种类繁多,有时需实验室检索的项目很多,这要求有一定的样本量,在可能的情况下尽量多采。通过初步调查结果和对中毒事故的初步判断，根据需要进行采样，样品一般情况下有以下几种：食品原料及剩余食品；患者的呕吐物、粪便、血液、尿液；食品容器及加工工具表面涂抹；食品生产经营者的手试、肛试，必要时可做全面的身体健康检查；其他与中毒食品有关的物品或病人的标本等。采样用品准备所有采样的用具包括标本容器要符合微生物检验的无菌及无抑菌物质采样用具包括酒精灯、镊子、剪刀、勺子、试管架、灭菌棉拭子、灭菌肛拭管、灭菌生理盐水管、灭菌１％ＮaCl营养肉汤管、Ｃ-Ｂ运送培养基、分离平板、pH7.6甘油缓冲液、灭菌容器(玻璃瓶、塑料袋、纸袋等)、饮盒；止血带、采样垫巾、无菌棉签、复合碘伏消毒液、真空采血管（生化项目用生化管；免疫项目用生化管或肝素抗凝管；血常规项目用2mlEDTA-K2抗凝管）、持针器、一次性静脉采血针。采样人要求采样必须由2名以上专业人员执行,出示证件说明来意及采样依据,告知被采样人所享有的权利和义务,在被采样者的陪同下进行样品的采集;应避免样品受到污染,并注意被采样人及采样人员的卫生和安全，采样人员采样时应着工作服，戴口罩和一次性手套;详细填写采样单,被采样单位或个人签字确认;对标本进行编号,同时在标本容器上作标识;填写送检单。采样方法（1）残存食物、原料的采集

采取可疑食物时，最好采取餐桌上剩余食物。若做细菌检验，必须注意无菌操作，可用灭菌镊子夹取后，放入灭菌的容器内，取200～500克。如无剩余食物时，可用灭菌盐水，冲洗盛装过可疑食物的容器或食具，并将洗涤水装入灭菌容器内采样；亦可用沾有灭菌生理盐水的消毒棉拭子在盛过可疑中毒食物的容器内涂擦，然后将其放入装有灭菌盐水的试管内。体积较大的肉食及鱼类等，可将其表面消后，去内部样品，放入灭菌容器内。必要时也可采取半成品及原料送检。食物制售环节的采样炊具、容器、锅、盆、桶、刀、菜板、抹布等样品的采取，可用棉拭沾灭菌生理盐水反复涂擦，然后置于灭菌容器内。菜板可用刀刮取其表面，将刮下的木屑放入灭菌容器内。抹布可用灭菌剪刀剪下一块，置于盛有灭菌生理盐水的容器内。患者吐泻物及粪便的采集

患者呕吐物、排泄物及洗胃液样品，应取新鲜的，并避免混入其他杂质和细菌。若怀疑为细菌性食物中毒，采粪便时应用肛拭子采样，已用抗生素治疗后采取粪便样品，可能影响检验效果。若病人正在洗胃或呕吐，则应直接采取洗胃液或呕吐物装入灭菌的容器内。中毒者的粪便、呕吐物样品，每份取5-10克，洗胃液100～200ml。肛拭采样A、采样人员采样前检查肛拭管表面是否光滑、有无破损及裂痕以防意外；肛拭管放于pH7.6的甘油缓冲液中。B、采样者采样时嘱被检者放松，充分暴露其肛门，避开内外痔，将肛拭管轻轻插入肛门约5cm，儿童约２-3cm,轻轻转动几圈，擦取直肠表面的粘液后取出，放入增菌液或C-B运送培养基中。C、为防止污染，采集标本时应将装有增菌液的试管口在酒精灯火焰上灭菌。血、尿样采集

怀疑是感染型细菌性食物中毒时，可在发病初期采血直接培养病原体。观察从患者血液、排泄物中分离出的菌株，是否与食物