病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件

实验二流感病毒的收获及血凝效价测定实验二流感病毒的收获及1第一部分流感病毒的收获实验目的掌握从鸡胚尿囊腔收获流感病毒的方法,获得大量的病毒抗原。第一部分流感病毒的收获2实验原理BUDDING将流感病毒接种于鸡胚尿囊腔后,病毒就在尿囊的内胚层细胞繁殖,繁AtTACHMENTFUSION殖1~2天后,病毒颗粒释放至尿囊液中,NDOCYTOSIS从而使尿囊腔中含有大量病毒,通过收获尿囊液,可以得到较大量的流感病毒实验原理3实验材料及器械已接种流感病毒的十日龄鸡胚2.无菌镊子、眼科剪刀、玻璃吸管无菌EP管(1.5和10mL各一个3.75%酒精棉球实验材料及器械4实验方法与步骤收获时间根据不同的病毒而异,流感病毒一般培养36~48小时即可进行收获收获前一天晚上,将鸡胚于4℃冰箱过夜(如果急于收获亦可于-20℃放置1小时左右),将鸡胚冻死,使红血球凝固,这样可避免在收获时流出的血细胞,同尿液或羊水里的病毒发生凝集,造成病毒滴度的下降。实验方法与步骤54℃冷藏时间不宜过长,过长易造成散黄,影响收获。快速冷冻时间也不易过长,一旦鸡胚冻成冰块就无法收获2.经过冰冻的鸡胚用碘酒、75%酒精消毒鸡胚气室部卵壳4℃冷藏时间不宜过长,过长易造成散63.用无菌镊子将消毒过的壳打碎,轻轻揭去气室部位卵壳,撕去壳膜和绒毛尿囊膜并将鸡胚轻轻推向5DAYS,压住。用无菌吸管通过绒毛尿囊膜进入尿囊腔吸出尿囊液(无大血管处轻轻吸取清亮的s黄色液体)。收取的10口尿囊液可无菌小瓶3.用无菌镊子将消毒7第二部分血细胞凝集实验测定流感病毒效价实验目的掌握血凝试验的方法和原理,了解流感病毒具有凝集鸡红细胞的能力,掌握病毒类型的测定的一种方法第二部分血细胞凝集实验测定8InfluenzaavirusAmembranevirus(-)RNAS,8differentonesInfluenzaavirusAmembranev9汇管micrometers汇管10病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件11病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件12病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件13病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件14病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件15病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件16病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件17病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件18病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件19病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件20实验二流感病毒的收获及血凝效价测定实验二流感病毒的收获及21第一部分流感病毒的收获实验目的掌握从鸡胚尿囊腔收获流感病毒的方法,获得大量的病毒抗原。第一部分流感病毒的收获22实验原理BUDDING将流感病毒接种于鸡胚尿囊腔后,病毒就在尿囊的内胚层细胞繁殖,繁AtTACHMENTFUSION殖1~2天后,病毒颗粒释放至尿囊液中,NDOCYTOSIS从而使尿囊腔中含有大量病毒,通过收获尿囊液,可以得到较大量的流感病毒实验原理23实验材料及器械已接种流感病毒的十日龄鸡胚2.无菌镊子、眼科剪刀、玻璃吸管无菌EP管(1.5和10mL各一个3.75%酒精棉球实验材料及器械24实验方法与步骤收获时间根据不同的病毒而异,流感病毒一般培养36~48小时即可进行收获收获前一天晚上,将鸡胚于4℃冰箱过夜(如果急于收获亦可于-20℃放置1小时左右),将鸡胚冻死,使红血球凝固,这样可避免在收获时流出的血细胞,同尿液或羊水里的病毒发生凝集,造成病毒滴度的下降。实验方法与步骤254℃冷藏时间不宜过长,过长易造成散黄,影响收获。快速冷冻时间也不易过长,一旦鸡胚冻成冰块就无法收获2.经过冰冻的鸡胚用碘酒、75%酒精消毒鸡胚气室部卵壳4℃冷藏时间不宜过长,过长易造成散263.用无菌镊子将消毒过的壳打碎,轻轻揭去气室部位卵壳,撕去壳膜和绒毛尿囊膜并将鸡胚轻轻推向5DAYS,压住。用无菌吸管通过绒毛尿囊膜进入尿囊腔吸出尿囊液(无大血管处轻轻吸取清亮的s黄色液体)。收取的10口尿囊液可无菌小瓶3.用无菌镊子将消毒27第二部分血细胞凝集实验测定流感病毒效价实验目的掌握血凝试验的方法和原理,了解流感病毒具有凝集鸡红细胞的能力,掌握病毒类型的测定的一种方法第二部分血细胞凝集实验测定28InfluenzaavirusAmembranevirus(-)RNAS,8differentonesInfluenzaavirusAmembranev29汇管micrometers汇管30病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件31病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件32病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件33病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件34病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件35病毒学实验第三次课-流感病毒的收获及血凝效价测定-课件36病毒