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文档简介
Evlution--300 紫外操作规程标题:Evolution300紫外分光光度计标准操作规程起草部1T颁发部门GM叨公室颁发日期制定人制定日期文件编号审核人审核日期批准人批准日期执行日期分发.目的规范Evolution300紫外分光光度计的操作,保证正确使用 Evolution300紫外分光光度计。.适用范围适用于赛默飞公司的Evolution300紫外分光光度计。.责任者仪器操作员:严格按SOP操作仪器,保持仪器的干净整洁;确保仪器能够正常运行,确认仪器是否在计量效期内。.质量总监:相关仪器文件的审批,仪器使用的管理。.相关定义无.工作程序准备开机前检查每次开机前应检查样品室应洁净、无异物。检查仪器是否在检定效期内。检查电源紫外分光光度计应有良好的接地,并配有220V(5%)电压,零地电压小于5V,每次开机前应检查插头与插座吻合是否正常。检查放置环境紫外分光光度计应放置在稳定、无振动的位置,周围环境温度应
在10C~30C、相对湿度不超过75%RH的范围内。仪器使用记录填写
检查上述项目,没有不符合项判定为正常状态,有不符合项判定为不正常状态。52操作5.2.1.点击电脑桌面上的VISIONpro快捷图标,根据不同的要求,可以选5.2.1.择不同的测量模式。ainmenubarToolbar■IiniJlUfVHb4「♦*.-UiMBBtam.muIW^anj§詈成■气%-riJI***■irOilft,.I.WjhICT**4gMe丁*..v=ainmenubarToolbar■IiniJlUfVHb4「♦*.-UiMBBtam.muIW^anj§詈成■气%-riJI***■irOilft,.I.WjhICT**4gMe丁*..v=5ui*lMdfJ■也ki力■LMk归加hl需百H亡FEY 239■版9lUtiwuth旦£邑正二」城1k.iTid1・1…—:♦tilhW4Lu-MuhJnCM4IFWMVZrg需hg|1aMQhMrUR*上MCUUOiS—(MFiC^dlfNiStatusbarDatastore自左向右:1.建立一个新的方法;2.从磁盘调用方法;3.使用当前文件名把采样方法保存到磁盘;4.从磁盘调用结果文件;5.使用当前文件名把选择的数据文件保存到磁盘。□lajEbisi-!自左向右选择:1.扫描扫描应用;2.固定波长Fixed应用;3.定量Quant应用;4.Rat应用;5.多成份分析MulticomponentAnalysis应用;6.DNA应用。
自左向右:1.开始运行批样品测量;2.暂停Rate应用中的数据采集;3.按照所选方法,采集样品基线或调零;4.停止当前的运行;5访问Help系统洸“江眄自左向右:1.扫描应用记忆当前的;2.恢复到记忆的窗口版面;3.按照不重叠方式的平铺窗口; 4层.叠式窗口;5.从磁盘调用窗口版面(窗口版面可以通过File菜单存储和调用)。自左向右:1.选到Method窗口;2选到Graph窗口;3.选到键,Results窗口;4.选到Calibration窗口;5.选到Kinetics窗口键,自左向右选择:1.取消跟踪光标;2.使用跟踪光标(使用箭头可沿逐个数据点移动。);3可沿逐个数据点移动。);3.消除所有数据的图谱;4.栅格形式的切换;5.设置图谱坐标范围;6.切换图注显示7.切换峰标显示;8.背景色的白/灰切换9.图谱线形的点/线切换。Z田|孑|蔻|七|喇区||[71|阕使用扫描启动VISION。点击扫描图标画进入扫描应用5.2.2.3.设置扫描方法5.2.2.3.设置扫描方法(ScanMethod)。a.从下拉菜单可选的内容中选择数据格式(DataMode)b.点击起始波长(选择数据格式)的数值框,将打开数值输入对话框。可以用鼠标点击数值输入对话框的虚拟键盘,或直接用计算机的键盘,输入起始波长值。波长终点(stopwavelength)的设置也是一样的c.选择带宽(bandwidth),扫描速度(Scanspeed和数据点间隔(datainterval),也可能还有换灯波长(LampChangewavelength)。d.输入样品个数。e.设置循环(Cycles)和循环时间(CycleTime)。f.在数据采集过程中,或采集完成后,可使用Math菜单中的功能,选择操作所需的显示特性、平滑(Smooth)和结果表。g.设置自动坐标(AutoScale)。h.要使用自动保存(AutoSave),点击其On/Off方框使其on,并输入子文件名和序号。i.要将方法锁定,点击锁定(Lock)按键,输入自己的口令。j.如要将方法锁定,点击锁定(Lock)按键,输入自己的口令。5.2.2.4.若使用了池控制器,参考 样品池控制器方法设置”。5.2.2.5.点击基线校正(BaselineCorrection)按钮,建立相关应用的基线1kmIm-t-tII"匕*+■尸■ymmi-iItn尸■rFnrm icdal:»哄圆诃「CiWT白Correotkjpn1r一Sii4ririi8ii<iFl Canfidiizmwith 国IOK
5.2.2.6,按照需要的运行,选择相关的基线校正匚100%Tfeaseline为标准的用户基线。如果仪器装有漫反射附件(DRA),其他两个)即0%TBaselineCorrection和StandardReferenceCorrectionwith0%TBSynchroniza+innStart5.2.2.7.5.2.2.8.5.2.2.9.5.2.2.10.点击点击点击0%TBSynchroniza+innStart5.2.2.7.5.2.2.8.5.2.2.9.5.2.2.10.点击点击点击Zero-Base(调零-基线)图标rURMirh”ThisLeft1..min.10品cProceedg仃)按他。PressQKtoSfart在时间或动把n动)选址j疝力寸Tools>可以选择SynchronizationStart(同步启Resfet C_ncel]Options>SystemSettings)而便该项可选。将仪器设置为同步启动后,数据的采集将在点击 OK按键或倒计时结束时立即开始。下面即为运行中同步/倒计时启动对话框实例:如果需要,在第一样品池中加入反应试剂,关闭样品仓仓盖,点击Proceed按键。将测量Cell控制器的第一个样品,后将下一个样品移动到位将得到下一个样品反应的提示。采集过程中的任何时候,按Pause晤停)图标或选择Command菜单中的Pause,将中断采集。
要是采集时间未结束,仪器将继续采集,只是不显示出来,直到再次按动Pause图标,数据采集将按照方法参数继续进行。继续此过程,直至全部样品测试完成。5.2.3.1.5.2.3. 扫描数据处理5.2.3.1.中的一Math.以菜单或子菜单中诜取运菖榻生…携作UHJ5.2.3.2.键,书:区中,指到要IIII.IIJbatch,sample胃1峡据拖到运算谢口的5.2.3.2.键,书:区中,指到要IIII.IIJbatch,sample胃1峡据拖到运算谢口的Batch,Samp依据被拖动时,它的影像在库区中将伴随光Ul-Mresult,按住鼠标orResult位」除之后随光标同起精为带有斜杠的黑色圆环;到达数据可放置'区域时,光标为代法batch,_sampieHjOresUw嗓就把数据放到该处。AuI-DPeakPickEaffijrrkRm加Fird|Peaks高。冷P曾依*UH知雷□LUU ।AuI-DPeakPickEaffijrrkRm加Fird|Peaks高。冷P曾依*UH知雷□LUU ।»15.2.3.3.皆需理,设置Math窗口中的Marual'/叫LowLeftMeaurrHgh血Hi此二(W4I.gMirCh§aofi」占「」.
色或片七》r%-T口咕n.@ijrifliDdMfl.uIJprmaiz9---1coi■set..与占,肥工£学生d小?...匚口什$5 1hiRatauth£rid口dHETljY日^JbSerb>3-7=9-..交d匚fMsl:时叫由方方1七♦.一上*iler%&-看 界c©・一5.2.3.4.将打开输济SO:Scangraph中可以数就变输入数值。的数字小键盘,3个灵敏度5.2.3.4.将打开输济SO:Scangraph中可以数就变输入数值。的数字小键盘,3个灵敏度下拉菜单中途择Manual的话,结果。430435 40 446460456 460465 470Wavekngtli(nm)IiL加国He从库区拖放到ScanGraph窗口b.点c.加国He从库区拖放到ScanGraph窗口b.点c.从pie在膻於gcieutSamPick后的cycle结果。1IsmDO3[口匕卜5|口汴 7Graph口做单选摇的要白勺标谜疔式,在oGraph9:ljfF歪胡兰g谱工具栏5.2.3.5.「MelihodPdrameteiv n厂AutoSavidPar已5.2.3.5.「MelihodPdrameteiv n厂AutoSavidPar已m》旧闻一点击上ToggleLabels(标记切搅j)按键开法标记心®匚 一卧始也力.,|No^nJ .』F1cL~「一,1r55rL与珈带植飞的,国磊特目hiM5m:二ResultsTable里更||夺格% 下结果。片多LorripOhmg[京GgETMath出施口的k苗r1m可以选择将结果以波长或吸光度的顺序匕旨*工 r F比为色IeTinne 卜l止0 h1^:mm:asG/mpl.g 口或白ils~Ftwfwisue«V/av«lw4it|lh匚口iTR;门F3A^nlnng^h 二二口.口仃HWResultsTable_2nmWCAbemnReswlts.sre国回因5.2.4. 固定波长(Fixed)应用5.2.4.1.5.2.4.2.5.2.4.1.5.2.4.2.a.依照所选的Fixed方法,可同时测量10a.依照所选的Fixed方法,可同时测量10个不同波长。点击方然后用打开的屏幕数值小键盘或PC的键盘输入波长数值,没顺序要求。b.DataMode(数据方式)在Absorbance与%丁之间选择。c.FixedMode的设置在Normal(普通),wavelengths(双波长相关的计算)和PeakHeight(峰高)之间择。PeakhHeigh^上式H要输入峰值和峰两侧起点的波长值
口司昌MnrlelAtwoibonce -1[Hormal 工WwetlenQiihl+W^vRlengih2Wavdcinglihl-Wo*匕IcngthWWavelengthlK[Hormal 工WwetlenQiihl+W^vRlengih2Wavdcinglihl-Wo*匕IcngthWWavelengthlKWav&l&ngth2WavelengthI/Waveleniath2FuokHuighlBdndwbddiCyvle:*CycleTime p..--- hKmwst£mmpl- 1Hefefsnee 匚口vetmrtI-Rt?f.WdVtsItsnglhd.设置方法余下的参数。e.设置样品的个数,若需要,可以点击Details(详细资料)按键,编辑样品名称和详情描述,作为方法的组成部分。通过双击样品名称来编辑它f.要使用AutoSave(自动保存),点击On/Off方框到On,输入文件名的词根和号码。g.点击Lock(锁定)按键,并按提示输入密码,即将方法锁定,之后解锁需重输密他。使用样品池控制器时,referto样品池控制器方法设置a.点击 二Zero-Base(调零-基线)图标。b.当PresentReference(s)提供参比)对话框出现时,将参比放置到光路或对应的附件样品位置上,盖好样品仓盖,点击Proceed(运行)按键。c.运行样品采集,点击 <Run(运行)图标。将打开PresentSample(提供样品)对话框,如果样品名及其描述还未输入,此时也可以输入。将样品放置到光路或对应的附件样品位置上,盖好样品仓盖。d.点击Proceed(运行)按键。5.2.5. 运行定量方法校正(在样品浓度能够测量之前,必须用已知浓度溶液进行校正)。点击应用工具栏的 0Quant(定量)图标,开始Quant应用。5.2.5.2.在Quant方法窗口点击CalibrationMethod(方法校正)标签。5.2.5.3.在CalibrationMethod页参数中输入所需的数值。从下拉菜单中选择所需的 Quantmode若需要,输入所需的波长和系数。5.2.5.6.设置自动坐标(AutoScale):选用扫描方法中的自动坐标按钮(5.2.5.6.何与图形相干的应用方法都有此按钮),将在数据获取过程结束后,自动改变坐标以显示完整的采集到的数据。如果不选这个项目,在数据获取过程结束后的吸光度坐标的范围,将保持在所指定的数值。5.2.5.7.俣盍[I羽曲&t?百mhr5.2.5.7.俣盍[I羽曲&t?百mhr先JInitialCurveFit参数三]5.2.5.8.输器杷"Standards)个数(1到5。)和每个标样的重复(replicates)Fli«i tnH:次款(1to3)。@一厂FiefercncijThfdsrioW5.2.5.9.点击m湖ore驾g5.2.5.9.点击m湖ore驾g键,打井第二个方法参数窗口「CoefficlAht&Ceitrelati&rii巨叁月以总择初始曲线睇T(InitialCurveFi/J浓度单在这个窗口里育自选立,小数点后位数,在“validUntil后府对方法有效(使用)期,FlierDetection在On/Off间切换,也可能有参比阈值(ReferenceThreshold最大吸收值(MaximumAbsorbance),还能选择相关系数的高低限。
5.2.5.10.5.2.5.11.怏:酬s5按嘘|严TFilibrattonMethod恒n_如iFtiO含 O15.2.5.10.5.2.5.11.点蓝曹^Description按键,以输入校正方法的描述。点击Lock卸曰「11;幅,>0各 onori定)按键,并按提示输入密码,即将方法锁定,之后解锁需呜输」±_|上/II,-| | ►i宓同ml仁川Winn号hav«t>!?enp<?iF^irn«dl口)JuliL>Iumfccisiohi-alddiric-dtjyANl/ELEL51Ll比i^阳5/5h.w®hn^n(ruwilledIrrdinpl.i^pMip■:;»>■5.2.5.12.在Standards(标样)表格中,输入各标样的浓度5.2.5.13.]5.2.5.14.15.2.5.15.5.2.5.13.]5.2.5.14.15.2.5.15.5.2.5.16.Graph窗口画出拟合的定量曲线MethodDescruptionXMethodDescruptionD1P$€riptiQini 2□K£-1 ]5.2.5.18.在StandardsTable中将显示测到的吸光度值、所选拟合曲线的等式、相关系数和残留总和。5.2.5.19.5.2.5.20.5.2.6.样5.2.6.1.5.2.6.2.5.2.6.3.若需要,拟合曲线可以从Quant菜单或用Graph工具栏的拟合图标进行更换!播】寸占上File>SaveCalihsticcNewi_al'MIWl司•从右傩占击目标时出现的5.2.6.4.上谎策单中直接点击:Sa^€»占匚 *口E-Lhutlc或bration.力立,经过阜通的windowsWilppwrM^Llrdd对话框V保存较正好的定量方法,^reituE 皿EriniB:三■@rMe.thod测试1fttZRKPr^intSetup...Redmonforcbiange ►方法浪置在QuantMeth图标启动Quant应用。od窗口中,其中含有采样(Sample)方法页和校正(Calibration)方法页。在样品测量开始前,要先提供有效的校正方法,要调用校正方lO.QrOU-TyT 主文C□030hfcirie要建立新的采苗曲法口曲卷皿Method窗口隔开Qua1卜it法,GuodraticgZoroiooootRessdu@ls:(-0.0001)仁制|匕「shoe /itSampleAllealeulauortohavoboonpoitormod2doubleproeisionasdonnodb^ANSi/IEEtSTD754-1985bLithavebeenroundedfordi^plavpurpo?e^.5265调用已存的方法,点击File并从中选择Open>SampleMethod,或在sampleMethod窗口点击右键。5266需要的话,调用或设置样品池控制器和Sipper方法,温度控制「Results•aole-Quant5.2.6.7.5.2・6.8.5・2・6.9・5.2.6.10.点击Zero-Base(调零•基线)图标。争"res皿屁在《网叫s)5.2.6.7.5.2・6.8.5・2・6.9・5.2.6.10.点
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