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文档简介

平板3菌落数[85[100应该选择其中稀释倍数为的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是 个/mL。不同种微生物的菌落在 等方约是 个/mL。不同种微生物的菌落在 等方面表现出的特点,可作为分类依据(写出2种。)14.分析如图,完成下列问题:(1)胡萝卜素可用来治疗因缺乏而引起的各种疾病,如夜盲症,干皮症等。在提取(3-胡萝卜素时,用的有机溶剂是。原因是(2)萃取的效率主要取决于 (3)因为2所以应避免明火加热,而采用水浴加热的方法。在加热瓶口安装回流冷凝装置,是为了通过加热处理,(3胡萝卜素溶解在萃取剂中,再经过,后得到纯净的B胡萝卜素。(4)上图乙是胡萝卜素粗品鉴定装置示意图。该鉴定方法的名称是 法。在图乙的胡萝卜素的结果示意图中,A、B、C、D四点中,属于萃取样品的样点是。(5)橘皮精油是食品、化妆品和香水配料的优质原料,一般采用压榨法从橘皮中提取。为了提高出油率,需要将新鲜的柑橘皮,并用石灰水浸泡。压榨橘皮时,一般加入相当于橘皮质量0.25%的小苏打和5%的Na2SO4,并调节pH至7—8,其目的是促进 .研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。请就如何从土壤中获得纤维素分解菌回答以下问题。⑴纤维素酶是一种复合酶,一般认为它至少包括三种组分,即(2)若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,此过程所用的接种工具是,操作时采用白^灭菌方法是。(3)刚果红可以与纤维素等多糖形成色复合物,但并不与水解后的口 发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应;第二种是在 时就加入刚果红。(第一种、第二种)方法会使菌落之间发生混杂。(4)如果观察到产生 的菌落,说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行 的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的 进行定量的测定。(5)为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落,某同学设计了甲、乙两

种培养基(成分见表)酵母膏无机盐淀粉纤维素粉琼脂CR溶液水培养基甲十十十十一十+培养基乙十十十一十十十注:“十”表示有,”表示无。据表判断,培养基甲(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是;培养基乙(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别纤维素分解菌,原因是 .请回答下列有关泡菜制作的问题。(1)制作泡菜的原理是 (2)如果做检测泡菜中亚硝酸含量的实验,紫卷心菜不适合用作实验材料的原因是泡菜的腌制方法、和食盐用量等条件对泡菜口味和亚硝酸盐含量均有影响。(3)如图表示在a、b、c三种食盐浓度中,泡菜的亚硝酸含量与发酵天数的关系。0 35791113时间①该实验是将实验材料分成在适宜的条件下,用图中不同浓度的食盐水制作泡菜。②从图中可知,用 浓度的食盐制作泡菜比较适合,但要在发酵时间达天以后才适宜食用,特别是不宜在第5天食用。食盐浓度为 的泡菜中亚硝酸盐含量变化最小。亚硝酸盐在特定条件下可转变成致癌物。17.某生物兴趣小组在学习完“蛋白质的提取和分离”后,联系相关实验,准备从猪肝脏研磨液中初步提取过氧化氢酶,设计的“过氧化氢酶提取、分离流程图”如下:实验准备(配制缓冲液及肝细胞悬液)试回答下列有关问题:(1)向肝细胞悬液中加入一定量的pH=7.0的缓冲液并充分搅拌,可以破碎肝细胞,破碎细胞的原理是与使用蒸储水相比,使用缓冲液的优点是 (2)蛋白质粗分离阶段透析的目的是 (3)电泳利用了待分离样品中各种分子的 等的差异,而产生不同迁移速度,实现各种分子的分离。(4)实验小组以3%过氧化氢溶液和获得的过氧化氢酶为材料进行温度对酶催化活性影响的探究,得到下图所示的结果,根据实验结果得出“过氧化氢酶能耐受100c高温”的结论。请问这一结论是否可靠?为什么?fi25 3075100瓶度日)答案、生物技术实践(1)细菌选择(2)碳源、无机盐蛋白质、核酸(3)碘液淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈 (4)乙同学的结果中,1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差解析:(1)M培养基若用于真菌的筛选,要求M培养基能满足真菌的生长,且能抑制其它微生物的生长,则培养基中应加入链霉素以抑制细菌的生长,加入了链霉素的培养基属于选择培养基。(2)微生物生长需要多种营养物质,除氮源外,还需要碳源、无机盐、水以及特殊营养物质等。氮源进入细胞后,可参与合成的生物大分子有蛋白质和核酸。(3)淀粉与碘液会变成蓝色,筛选产淀粉酶的微生物,依据淀粉遇碘液显蓝色,产淀粉酶的菌落周围淀粉被水解,形成透明圈,再根据透明圈,来筛选产淀粉酶的微生物。(4)乙同学结果不合理,因为1个平板的计数结果与另2个相差悬殊,结果的重复性差,不能简单地用其平均数作为最终结果。(1)可以(2)在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少(3)破坏DNA结构消毒液(4)氯气(5)未将锅内冷空气排尽解析:(1)在实验室中,玻璃和金属材质的实验器具可以放入干热灭菌箱中进行干热灭菌。(2)牛奶的消毒常采用巴氏消毒法或高温瞬时消毒法,与煮沸消毒法相比,巴氏消毒法或高温瞬时消毒法在达到消毒目的的同时,营养物质损失较少。 (3)因为紫外线能破坏生物细胞的DNA结构,所以密闭空间内的空气可采用紫外线照射消毒, 在照射前,适量喷洒消毒液,可强化消毒效果。 (4)水厂供应的自来水通常是经过氯气消毒的。(5)采用高压蒸汽灭菌时,如果未将锅内冷空气排尽,则会出现压力达到设定要求,而锅内并没有达到相应温度的现象。(1)麦芽汁琼脂高压蒸汽 由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体(2)菌体快速增殖乙醇产生(3)酵母菌分解葡萄糖会产生CO2,CO2使面包松软解析:(1)麦芽汁琼脂培养基的碳氮比较高,而且含糖量高,更适合酵母菌;该培养基应采用高压蒸汽灭菌法灭菌;若将酵母菌划线接种在平板上,培养一段时间后可观察到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体,这就是菌落。 (2)酵母菌液体培养时,若通入氧气,进行有氧呼吸可促进菌体快速增殖;若进行无氧培养,进行无氧呼吸,产生酒精和CO2。(3)制作面包时,在面粉中添加一定量的酵母菌,因为酵母菌可以分解面粉中的葡萄糖产生二氧化碳,所以面包松软多孔。(1)pH高压蒸汽(湿热)(2)50C(3)a、b、d解析:(1)配制培养基的操作步骤为称量-溶化一定容-调pH-培养基的分装一包扎一灭菌;培养基适宜用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。 (2)在步骤③中,待培养基冷却至50c左右时进行倒平板操作。(3)在划线过程中,为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌,a正确;划线时应避免划破培养基表面,否则将不能形成正常菌落,b正确;该实验的目的是获得利用工业废甲醇作为碳源的酵母菌, 不需要测定酵母菌中的甲醇含量,c错误;培养基中的甲醇浓度越高,此种培养基中得以生存的酵母菌利用甲醇的能力越强,因此可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株, d正确。(1)ABC(2)醋酸菌乳酸菌是厌氧型细菌,醋酸菌是好氧型细菌(3)减少增加(4)青霉素杀死了乳酸菌 (5)维生素避免(或防止)引燃烧杯中的酒精解析:(1)酵母菌发酵需要控制条件:温度18〜25C;溶氧控制,即要先通气后密封;pH控制,偏酸性;利用酵母菌自身的酶进行发酵,不需要对酶进行控制。 (2)苹果醋制备需要醋酸菌,乳酸菌是厌氧型细菌,醋酸菌是好氧型细菌。 (3)制作泡菜的过程中,由于乳酸菌呼吸作用的消耗,有机物的干重将减少,但坛内有机物的种类将增加。(4)青霉素可以抑制几乎一切含有细胞壁的微生物的生长繁殖,杀死乳酸菌,因此制作泡菜时加入了青霉素,会造成发酵失败。(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,乳酸菌仍然不能正常生长,还需要在培养基中添加维生素;涂布平板操作过程中一定要注意防火,不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。(1)橘黄石油醍沸点高且与水不相溶(2)萃取萃取、过滤、浓缩(3)温度时间温度过高和时间过长都会导致胡萝卜素分解 (4)纸层析标准样品(5)反(6)灭菌解析:(1)胡萝卜素是橘黄色的结晶,属于脂溶性物质,具化学性质比较稳定,沸点高且不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醍等有机溶剂。常用石油醍作为溶剂。 (2)提取胡萝卜素最常用的方法是有机溶剂萃取法,操作的一般流程是:胡萝卜一粉碎一干燥一萃取一过滤—浓缩一胡萝卜素。(3)胡萝卜素萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量,同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量、萃取的温度和时间等条件的影响。因温度过高和时间过长都会导致胡萝卜素分解,在加热干燥过程中,应该控制好温度和时间。(4)提取的胡萝卜素可通过纸层析法进行鉴定,在鉴定过程中需要用标准样品对照。(5)萃取胡萝卜素的有机溶剂应该具有很高的沸点,能够充分溶解胡萝卜素,并且不与水相溶。原料颗粒的含水量也会影响提取的效率,由于有水存在会降低有机溶剂的萃取程度,因此,一般情况下,提取胡萝卜素时,提取效率与原料颗粒的含水量成反比。(6)若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。(1)70%酒精气泡(2)减少增加(3)A(4)B(5)醋酸菌有氧解析:(1)在葡萄浆装瓶前,需将发酵瓶清洗干净,并用 70%酒精进行消毒。酵母菌进行细胞呼吸时会产生二氧化碳,因此制作酵母悬液时,在干酵母中加入少量温水和极少量蔗糖,待酵母悬液中出现气泡即可。 (2)装瓶后开始一段时间,酵母菌进行有氧呼吸,导致发酵瓶中溶解氧的含量下降。发酵过程中,酵母菌进行无氧呼吸,使发酵瓶中酒精的含量增加。(3)果酒发酵时需要无氧环境,该装置弯管中的水可以阻止空气进入,减少杂菌污染,创造了无氧环境,也可以将产生的 CO2排出。(4)实验中,发酵完毕后酵母菌不再进行无氧呼吸,由于无氧呼吸能够产生二氧化碳,因此可以根据发酵瓶中停止出现气泡即可判断发酵是否完成。 (5)利用葡萄酒制作果醋,发酵瓶中应加入的菌种是醋酸菌,该菌种在有氧条件下能将乙醇氧化为醋酸。(1)稀释涂布法平板划线法淀粉(2)较高浓度的乙醇对细胞有毒害作用 (3)温度、pH、氧气含量(4)C2H5OH+O2-CH3COOH+H2O醋化醋杆菌是需氧型微生物解析:(1)红曲主要含有红曲霉菌和酵母菌等微生物, 具有糖化和发酵的双重作用,为了获得优良的酿酒红曲,将红曲制成较稀浓度的悬液后,可通过稀释涂布法或平板划线法分离出单菌落,通过以淀粉为碳源的培养基筛选出糖化能力最强的红曲霉菌菌种。(2)大米经蒸煮、红曲霉菌糖化后,用食用酵母进行发酵,发酵完毕后得到新鲜红曲酒,酒中乙醇浓度不超过15%。其主要原因是当发酵液中的乙醇浓度接近 50%时,较高浓度的乙醇对细胞有毒害作用。(3)温度、pH、氧气含量等环境因素都会影响红曲酒风味。(4)在红曲醋生产工艺中,可将适量的红曲酒、水、醋化醋杆菌等混合,醋酸生产过程的反应式是: C2H5OH+O2-CH3COOH+H2。。因为醋化醋杆菌是需氧型生物,所以醋酸发酵时要始终保持有氧状态。(1)无成形的细胞核灰绿(2)蛋白酶和脂肪酶 (3)重氮化玫瑰红色(4)梯度稀释(5)水蒸气蒸储氯化钠解析:(1)制作果醋和葡萄酒使用的微生物分别是醋酸杆菌和酵母菌,它们在结构上有所不同,主要表现在前者为原核细胞,无成形的细胞核。果酒发酵后是否有酒精产生,可以用重铭酸钾溶液进行检验,酒精与重铭酸钾在酸性条件下反应呈灰绿色。(2)腐乳制作过程中,豆腐发酵主要利用微生物产生的蛋白酶和脂肪酶等,将豆腐中的营养物质分解成易于消化和吸收的小分子物质。 (3)测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与 N-1-蔡基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。(4)从土壤中分离及筛选高效分解尿素的细菌时,首先要将选取的一定量的土壤溶解在无菌水中进行梯度稀释后,才能够接种到培养基表面。 (5)生姜精油是传统的保健良方,调和在洗发露中,可去头风、止头痛。提取生姜精油的流程如下:植物体一生姜一油水混合物-初级精油-除水、过滤一生姜精油。提取生姜精油时,采用水蒸气蒸储法获得油水混合物,然后在其中加入氯化钠试剂,分层后可获得初级精油。(1)酵母菌20(18〜25)兼性厌氧型(2)重铭酸钾灰绿(3)压榨水中蒸储会导致原料焦糊和有效成分水解 干燥去水(干燥、粉碎)(4)易溶于有机溶剂萃取剂的性质和使用量解析:(1)酒精发酵使用的是酵母菌,酵母菌繁殖的最适温度为 20c左右,其新陈代谢类型为兼性厌氧型。(2)酒精可用酸性重铭酸钾溶液鉴定,溶液的颜色由橙色变成灰绿色。(3)水中蒸储会导致原料焦糊和有效成分水解,因此提取橘皮精油时,常采用压榨法而不用蒸储法;为提高出油率,需要将橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡。 (4)胡萝卜素易溶于有机溶剂,因此可以用萃取的方法提取胡萝卜素;萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。(1)聚乙烯获得数目较多的聚乙烯降解菌 液体(2)将聚集的微生物逐步稀释,以便获得单个菌落需要隆起程度颜色解析:(1)筛选能降解聚乙烯塑料的微生物,需要使用以聚乙烯为唯一碳源的选择培养基;在获取肠道微生物后筛选的目的是获得数目较多的聚乙烯降解菌,使用的是液体培养基。(2)采用平板划线法接种微生物时,为了将聚集的微生物逐步稀释,以便获得单个菌落,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线; 采用稀释涂布平板法分离微生物时,需要进行梯度稀释。菌落特征包括菌落形状、大小、隆起程度和颜色等方面。(1)兼性厌氧型(2)有氧呼吸无氧呼吸(或发酵)酸性重铭酸钾(3)清洗干净体积分数为70%的酒精(4)使酵母菌与发酵液充分接触并增加溶氧 二氧化碳⑸A解析:(1)酵母菌的异化作用类型是兼性厌氧型。(2)葡萄酒的酿制原理是:先通气使酵母菌进行有氧呼吸,以增加酵母菌的数量,然后密封使酵母菌无氧呼吸或发酵获得葡萄酒;可以用酸性重铭酸钾来检验酒精,颜色由橙色变为灰绿色。 (3)为防止发酵液被污染,对使用的发酵瓶要清洗干净,并用体积分数为 70%的酒精消毒。(4)甲装置中进行搅拌的目的是使酵母菌与发酵液充分接触并增加溶氧;乙中进行的是酒精发酵,产物有酒精和大量的二氧化碳,因此排出的气体是二氧化碳。 (5)采用小苏打发酵的原理是小苏打在高温下分解产生二氧化碳,使馒头松软,并不会改变面粉中的营养物质和能量;利用酵母菌发酵后,淀粉分解成小分子有机物,释放少量能量,所以营养物质丰富而能量减少。(1)巴氏系列稀释(或梯度稀释)(2)B酒精灯火焰(3)一个未接种的培养基1028500形状、大小、隆起形状、颜色、光泽度、边缘形状(答出两点即可)解析:(1)图中步骤①利用80C、15min对牛奶进行巴氏消毒,步骤②是对牛奶进行系列稀释。(2)步骤③为稀释涂布平板法,要用涂布器接种,为了避免杂菌污染,此步骤应在酒精灯火焰附近进行。(3)将接种后的培养基和作为对照的一个未接种的培养基要同日t放入37c恒温培养箱中,培养36小时。在每一个梯度浓度内,至少要涂布3个平板。确定对照组无菌后,选择菌落数在 30〜300的平板进行记数,求其平均值,取出后统计各平板的菌落数,因此根据表格数据,应该选择其中稀释倍数为 10-2的平板进行计数。经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是(87+83+85)TX102=8500个/mL。不同种微生物的菌落在形状、大小、隆起形状、颜色、光泽度、边缘形状等方面表现出的特点,可作为其分类依据。(1)维生素A石油醍石油醍是有机溶剂,胡萝卜素是脂类物质,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醍等有机溶剂 (2)萃取剂的性质和使用量 (3)有机溶剂都是易燃物防止加热时有机溶剂挥发 过滤浓缩(4)纸层析BC(5)干燥去水橘皮精油与水分离解析:(1)湖萝卜素可用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病,如夜盲症,干皮症等。在提取(3胡萝卜素时,用的有机溶剂是石油醍,原因是石油醍是有机溶剂,胡萝卜素是脂类物质,不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醍等有机溶剂。 (2)萃取的效率主要取决于萃取剂的性质和使用量。(3)因为有机溶剂都是易燃物,所以应避免明火加热,而采用水浴加热的方法,是为了防止有机溶剂的挥发。通过加热处理,(3胡萝卜素溶解在萃取剂中,得到萃取液,经过过滤后,可浓缩得到纯净的 (3胡萝卜素。(4)该色素分离的方法为纸层析法。鉴定的原理是不同的色素在层析液中的溶解度不同,从而在滤纸条上扩散的速度也不同,点加提取样品要点加在基线中间,标准样品点加在基线两侧,标准样品没有杂质,而萃取样品含有杂质,所以其中 A、D是标准样点,B、C是提取样点。(5)橘皮精油是食品、化妆品和香水配料的优质原料,一般采用压榨法从橘皮中提取。为了提高出油率,需要将新鲜的柑橘皮干燥去水,并用石灰水浸泡。压榨橘皮时,一般加入相当于橘皮质量0.25%的小苏打和5%的Na2SO4,并调节pH至7—8,其目的是促进橘皮精油与水分离。(1)Ci酶、Cx酶和葡萄糖甘酶 (2)接种环灼烧(3)红纤维二糖葡萄糖倒平板第一种(4)透明圈发酵产纤维素酶葡萄糖(5)不能该培养基是液体培养基 不能该培养基中没有纤维素解析:(1)纤维素酶是一种复合酶,包括Ci酶、Cx酶和葡萄糖甘酶。(2)若获得纯净的菌株,常采用平板划线的方法进行接种,常用的接种工具是接种环,操作前采用灼烧的方法灭菌。(3)刚果红可以与纤维素等多糖形成红色复合物,但并不与水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。常用的刚果红染色法有两种:第一种是先培养微生物,再加入刚果红进行颜色反应,这种方法会使菌落之间发生混杂;第二种是在倒平板时就加入刚果红。(4)刚果红与纤维素反应呈红色,纤维素分解菌产生的纤维素酶会将纤维素分解而不能与刚果红染液呈红色,在菌落周围会出现透明圈。为了确定是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。 (5)分析表格可知,培养基甲为液体培养基,不能用于分离和鉴别纤维素分解菌,纤维素分解菌鉴别培养基属于固体培养基

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