临床实验室生物安全导则SARS检测实验室生物安全操作指南

临床实验室生物

安全导则卫生部临床检验中心申子瑜病原微生物实验室安全管理条例

（征求意见稿）第一章总则

为了加强病原微生物实验室(以下称实验室)安全管理，保护实验室工作人员和公众的健康，制定本条例。本条例所称病原微生物：是指能够使人或者动物致病的微生物。

条例目标及适用范围保护实验室工作人员、社会公众和环境适应于从事病原微生物研究、教学、生产、诊断检测等所有实验室

国家对病原微生物按照其对人类和动物以及环境的危害程度实行分类管理，对实验室根据其对病原微生物的防护水平实行分级管理。国家实行统一的实验室生物安全标准。病原微生物的分类和管理l、国家将病原微生物分为四类2、第三类、第四类称为高致病性病原微生物3、卫生部负责制定并调整四类病原微生物的种类

第一类病原微生物，是指在通常情况下不会引起人或者动物疾病的微生物。第二类病原微生物，是指能够引起人或者动物疾病，发生实验室暴露可能引起感染，但不会引起严重危害，且能够有效实施预防和治疗的微生物。

第三类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，但不易在人或者动物间传播，且能够有效实施预防和治疗的微生物。第四类病原微生物，是指能够引起人或者动物的严重疾病，容易在人或者动物间传播，或者没有有效的预防和治疗措施的微生物。第三类、第四类病原微生物统称为高致病性病原微生物。国家根据实验室防护水平，将实验室分为一级、二级、三级、四级。

临床诊断、检测检验工作可以在二级实验室中进行。但是，发现高致病性病原微生物的其病原学的分离鉴定工作应当转移到三级以上的实验室中进行。中华人民共和国国家标准

GB19489-2004

实验室生物安全通用要求

一、实验室生物安全防护分级一级生物安全防护实验室，简称BSL1或P1二级生物安全防护实验室，简称BSL2或P2三级生物安全防护实验室，简称BSL3或P3四级生物安全防护实验室，简称BSL4或P4一级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物，如用于教学的普通微生物实验室等。

二级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。

三级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有预防传染的疫苗。艾滋病毒的研究（血清学实验室除外）应在三级生物安全防护实验室中进行。

四级生物安全防护实验室

实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。

二、二级生物安全防护实验室

安全设备和个体防护

可能产生致病微生物气溶胶或出现溅出的操作均应在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。处理高浓度或大容量感染性材料均必须在生物安全柜(Ⅱ级生物安全柜为宜)或其他物理抑制设备中进行，并使用个体防护设备。

上述材料的离心操作如果使用密封的离心机转子或安全离心杯，且它们只在生物安全柜中开闭和装载感染性材料，则可在实验室中进行。当微生物的操作不可能在生物安全柜内进行而必须采取外部操作时，为防止感染性材料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置(护目镜、面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出保护设备)。

4.

在实验室中应穿着工作服或罩衫等防护服。离开实验室时，防护服必须脱下并留在实验室内。不得穿着外出，更不能携带回家。用过的工作服应先在实验室中消毒，然后统一洗涤或丢弃。5.当手可能接触感染材料、污染的表面或设备时应戴手套。如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。不得戴着手套离开实验室。工作完全结束后方可除去手套。一次性手套不得清洗和再次使用。

三、实验室设计和建造的特殊要求每个实验室应设洗手池，宜设置在靠近出口处。实验室围护结构内表面应易于清洁。地面应防滑、无缝隙。实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。实验室应有可开启的窗户，应设置纱窗。在实验室所在的建筑内应高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。应设置洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。实验室门宜带锁、可自动关闭，门有可视窗。实验室出口应有在黑暗中可明确辨识的标识。应通风，如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。

二级生物安全防护实验室操作要点实验室人口须贴上生物危险标志，注明危险因子、生物安全级别、负责人姓名和、进人实验室的特殊要求及离开实验室的程序；禁止非工作人员进人实验室。参观实验室等特殊情况须经实验室负责人批准后方可进入；禁止在工作区饮食、吸烟、处理隐形眼镜、化妆及储存食物；接触微生物或含有微生物的物品后，脱掉手套后和离开实验室前要洗手；以移液器吸取液体，禁止口吸；制定尖锐器具的安全操作规程；按照实验室安全规程操作，降低溅出和气溶胶的产生；每天至少消毒一次工作台面，活性物质溅出后要随时消毒；9.所有培养物、废弃物在运出实验室之前必须进行灭活，如高压灭活。需运出实验室灭活的物品必须放在专用密闭防漏的容器内储存、运输及消毒灭菌；10.如有条件工作人员应接受必要的免疫接种(如卡介苗等)；11.必要时收集从事危险性工作人员的基本血清留底，并根据需要定期收集血清样本，应有检测报告，如有问题及时处理；12.将生物安全程序纳入标准操作规范或生物安全手册，由实验室负责人专门保管，工作人员在进入实验室之前要阅读规范并按照规范要求操作；13.工作人员要接受有关的潜在危险知识的培训，掌握预防暴露以及暴露后的处理程序。每年要接受一次最新的培训；14.实验设备在运出修理或维护前必须进行消毒；15.人员暴露于病毒时，及时向实验室负责人汇报并记录。安全管理制度实验室内务管理制度尖锐器具安全使用制度实验室消毒防护制度标本采集运输制度废弃物处理制度工作人员防护制度差错事故处理制度尖锐器具安全使用制度除特殊情况外，禁止在实验室使用针、注射器及其他利器。尽可能使用塑料器材代替玻璃器材。尽可能应用一次性注射器，用过的针头禁止折弯、剪断、折断、重新盖帽、从注射器取下，禁止用手直接操作。用过的针头必须直接放入防穿透的容器中。非一次性利器必须放入厚壁容器中并运送到特定区域消毒，最好进行高压消毒。尽可能使用无针注射器和其他安全装置。禁止用手处理破碎的玻璃器具。装有污染针、利器及破碎玻璃的容器在丢弃之前必须消毒。四、为何需使用生物安全柜?考虑对操作人员，操作样品，操作环境的保护。美国国家卫生研究院NIH标准与美国国家疾病控制中心CDC实验室生物安全级别标准中要求：应用于临床、诊断、教学、研究、或者生产设施，开展有关内源性和外源性病源的工作，若因暴露而吸入该病源,会引发严重的、可能致死的疾病。需使用ClassII级生物安全柜实验人员受过专业训练应有管道化的排气系统，排出的空气不再循环至建筑物内的任何其他区域。建议生物安全柜每年经过测试和确证

生物安全设备分类1.超净台2.抽风橱3.CLASSI一级生物安全柜4.CLASSII二级生物安全柜5.CALSSIII三级生物安全柜（又称手套柜）1、超净台正压柜气流从顶部或底部经过过滤器后从操作区正面流向工作台面，被样品污染的气流排出柜外，没有循环气流。超净台保护样品不受污染，适用于普通实验室或1级生物安全水平中对人员和环境无保护要求的实验。

2、CLASSI一级生物安全柜负压柜气流经操作人员向内进入工作台面，被污染的气流通过HEPA过滤器外排出柜外，没有循环气流。CLASSI级BSC保护操作人员和环境不受污染，适用于生物安全水平中对实验样品无保护要求的实验。3、CLASSII二级生物安全柜层流负压柜它们可以安全的保护样品、人员和环境。II级生物安全柜分为A型（30%排在室内）和B型；B型中又分为B1（70%接管道外排）、B2（100%接管道外排）、B3（30%接管道外排）。

CLASSIIA生物安全柜（1）进入气流最低流速平均为0.38米/秒)；（2）30%气流经HEPA过滤后外排在室内；（3）被污染的管道和气流通道为正压状态生物安全柜空气流向CLASSIIB1生物安全柜（1）进入的气流最低流速平均为0.5米/秒；（2）70%气流通过专用的管道经HEPA过滤后接管道外排至室外；（3）所有受生物污染的管道和气流通道均在负压状态下或被负压的管道或气流通道包围。CLASSIIB2生物安全柜（1）进入气流最低流速平均为0.5米/秒；（2）所有向内进入的气流和向下的气流均通过HEPA过滤后排到室外而不在柜内循环，也不能排入实验室；100%接管道外排。（3）所有的被污染的管道和气流通道都在负压状态下或被直接外排的负压管道或气流管道所包围。CLASSIIB3生物安全柜（1）进入的气流最低流速为0.5米/秒；（2）外排到室外的气流（30%）经过HEPA高效过滤；（3）所有经生物污染的管道和气流通道均为负压状态；（4）与CLASSIIA型气流方向相同，但与CLASSA型不同的是，它30%外排气是接管道排到室外的。II级生物安全柜Airflow

4.CLASSIII生物安全柜

（手套柜）全封闭的、气密结构的通风柜；通过橡胶手套进行操作；柜内保持至少120Pa的负压；供气通过HEPA抽入内；外排的气流经过双层HEPA过滤或经

HEPA后再经燃烧处理。

CLASSIII型BSC适用于BSL3、BSL4的生物实验。

高效空气过滤工作人员安全无涡流单向流空气实验对象不受污染手套箱式操作口抽风橱无是是否否I级有是否否否II级有是是是否III级有是是是是生物安全装置异同Ⅰ级、Ⅱ级和Ⅲ级生物安全柜的区别BSC表面风速（m/s）%气流在循环排除排风系统Ⅰ级0.360100硬管道Ⅱ级A1型0.38-0.517030派到室内或套管式的连接向室外排风的Ⅱ级A2型0.517030派到室外或套管式的连接Ⅱ级B1型0.513070硬管道Ⅱ级B2型0.510100硬管道Ⅲ级型NA0100硬管道根据保护类型的需要选择适宜的生物安全柜保护类型BSC的选择针对危险组1-3微生物的人员保护Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级针对危险组4微生物的人员保护，手套箱实验室Ⅲ级针对危险组1-3微生物的人员保护,防护服实验室Ⅰ级、Ⅱ级产品保护Ⅱ级,仅当涉及层流时用Ⅲ级针对微量的不稳定的放射性核/化学药品的保护Ⅱ级B1,向室外排风的Ⅱ级A2针对不稳定的放射性核/化学药品的保护Ⅰ级、Ⅱ级B2，Ⅲ级对各级生物安全水平实验室的要求生物安全柜生物安全级别一级二级三级四级Ⅰ级不需要随意需要不需要Ⅱ级不需要最好有需要需要，在防护服实验室中使用Ⅲ级不需要不需要最好有需要，在安全柜室使用五、废弃物处理国务院《医疗废物管理条例》卫生部令《医疗卫生机构医疗废物管理办法》卫生部文件《医疗废物分类目录》》什么是医疗废物？医疗废物医疗卫生机构在医疗、预防、保健以及其他相关活动中产生的具有直接或者间接感染性、毒性以及其他危害性的废物。医疗废物分类感染性废物病理性废物损伤性废物药物性废物化学性废物要点医疗废物集中处置包装物要防渗漏、防锐器穿透，明显标识和警示说明医疗废物储存设备定期消毒医疗废物制病原体的培养基、标本和菌种、毒种保存液等高危险废物，在交医疗废物集中处置前应就地消毒第四章实验室安全管理第二十二条实验室的生物安全级别通过生物危害评估确定。第二十三条实验室设计与建造应当与其生物安全防护级别相适应。第二十四条实验室应当建立并严格遵守安全管理制度与安全操作规程。第二十五条实验室应当加强对工作人员的安全防护培训。第二十六条实验室应当配备必要的安全设备（如生物安全柜）和个人防护用品。第二十七条实验室的医疗废物应当按照《医疗废物管理条例》和《医疗卫生机构医疗废物管理办法》等有关规定管理。THEEND

THANKS生物入侵者课件制作：南海区和顺一中中文

你了解它吗

凤眼莲俗称“水葫芦”，它可是生物入侵者！

原产南美，1901年作为花卉引入我国。水葫芦繁殖快，有净化水质的作用，上世纪五六十年代还作为猪饲料推广。但是现在猪不吃这种饲料了，水体的富营养化又促成了水葫芦的疯狂繁殖，成片聚集的“绿岛”不仅堵塞河道，影响通航，更严重的是它们已成了破坏江河生态平衡的罪魁祸首。目前我国每年因水葫芦造成的经济损失接近100亿元，光是打捞费用就高达5至10亿元。

整体感知

1、怎样理解“入侵”和“生物入侵者”？用自己的话说一说。2、从文中勾画出揭示“生物入侵者”含义的语句。3、本文除了告诉我们什么叫生物入侵者，它还讲了哪些内容?（在找出各段的中心句的基础上进行归纳）主要内容：

一、什么叫生物入侵者二、生物入侵带来的巨大危害三、造成生物入侵增多的原因和途径四、生物学和生态学界对“生物入侵者’’的不同态度五、目前世界各国对“生物入侵”采取的相应措施合作探究1、常见的说明顺序有哪些?本文采用了什么说明顺序?说说本文这样安排说明顺序的好处。

2、本文主要采用了列数字、举例子、打比方等说明方法。试从课文中找出有关语句，说说它们的表达效果。逻辑顺序，运用逻辑顺序符合人们的认知规律，且使文章结构严谨、层次分明。

列数字、举例子、打比方的表达效果：列数字，是一种用事实进行说明的方法。数字化的事实也能引发读者的想像。举例子，是为了支撑观点，使之更具说服力。打比方，是为了使说明更形象。课文小结

这是一篇关于生态问题的说明文。它向我们说明了什么是生物入侵者以及生物入侵带来的巨大危害，促使我们对这一特殊的生态现象高度警觉。我们学习这篇课文不仅能获得一定的生态知识，还能培养我们的社会责任感。另外，这篇课文结构严谨，层次分明，运用了列数字、举例子、打比方等说明方法，为我们写作说明文提供了借鉴。拓展延伸

你知道自然界还有哪些生物入侵者?你在现实生活中发现过生物入侵的现象吗?怎样才能有效扼制生物入侵的现象?（组内交流关于生物入侵的资料，然后各小组推荐代表在班上发言。)一种美丽的植物，开白色的小花，一年四季常绿，繁殖能力极强……有它在的地方，任何植物都不能生长，它就像一个“绿色杀手”，将所有的植物“杀死”，所到之处成为一片“绿色沙漠”。目前由中美洲入侵的这种可怕植物已经将四川凉山州800万亩优良草场变成自己的王国，而且它们正以每年30公里的速度悄悄向成都逼近……

这种植物叫什么？它叫什么绿色杀手——紫茎泽兰凉山州草原站站长在向记者介绍它们在凉山州的疯长

“植物杀手”薇甘菊