MICA基因与胃肠道癌课件

MICA基因与结直肠癌遗传相关性免

疫治疗初探导师黄颖烽学生肖灿军广州医学院附属市一院2013年1月15日研究的目的及意义立题依据研究的内容及指标技术路线主要技术关键及解决途径研究进度及预期达到的指标课题研究的支撑条件导师意见研究目的及意义

MICA基因与上皮性恶性肿瘤存在免疫遗传相关,其基因多态性及基因频率在不同地区人群间的分布存在明显差异；从免疫遗传角度分析广东汉族人群中不同MICA基因分型与胃肠上皮性恶性肿瘤遗传相关性，探索建立具遗传背景的高危人群长期监控机制

MICA基因体内表达水平与上皮性恶性肿瘤病程转归密切相关；分析胃肠道肿瘤的发生发展及转归的过程中MICA基因表达水平的动态变化，探索制定肿瘤极早期诊断的sMICA临界值，以期达到胃肠道恶性肿瘤早期诊断的目的

MICA基因表达影响体内多种免疫效应细胞功能表现，有利于表达NKG2D的免疫杀伤细胞发挥抗肿瘤作用。初步尝试建立带有MICAcDNA的载体质粒表达分泌型MICA的细胞模型，模拟体内MICA-NKG2D反应机制，并尝试了解不同免疫药物对膜型/sMICA表达水平调控的影响，探索胃肠癌分子免疫治疗新思路。国内外研究现状2MICA的表达与肿瘤免疫治疗肿瘤免疫学认为机体免疫系统和肿瘤细胞之间存在相互编辑作用，免疫系统重塑肿瘤细胞的免疫原性，肿瘤细胞改变免疫效应细胞的抗肿瘤效应（主要有NK、T细胞）

MICA-NKG2D系统的肿瘤免疫治疗NK细胞NKG2D受体与MICA的表达NK细胞是机体内重要的淋巴细胞亚群，其表面存在识别肿瘤细胞表面的活化和抑制性受体。NKG2D是介导NK细胞杀伤活性的主要活化性受体T细胞表面受体与MICA的表达CD8+TCRαβ和TCRγδ均表达NKG2GD受体与靶细胞表面表达MICA配体结合充分活化γδT细胞，直接发挥杀伤功能，

MICA-NKG2D系统的肿瘤免疫治疗正常情况下MICA蛋白仅微量表达于肠道上皮正常情况下当细胞受到感染、应激或恶性转化时可明显上调其表达量。现有对同属上皮源性肿瘤的其他肿瘤：如卵巢恶性肿瘤、肝肿瘤研究表明，MICA表达和肿瘤发展水平及浸润程度有一定的关联：早期肿瘤MICA表达量低，弥漫性肿瘤的表达量增高。WatsonNF等人认为：MICA高表达患者的肿瘤预后及生存率均高于MICA低表达或无表达患者MICA蛋白在体内存在膜型（mMICA）和可溶性（sMICA）两种形式,两者对机体免疫系统呈相反作用。sMICA

是由于肿瘤细胞的死亡，MICA分泌和金属蛋白酶水解，脱落到外周血的MICA，释放sMICA是肿瘤细胞削弱MICA-NKG2D系统监视的重要途径在MIC-NKG2D抗肿瘤机制中，GrohV,Li等人发现sMICA降低了肿瘤细胞MICA分子表达强度，而且能诱导T细胞表面和NK细胞表面受体NKG2D发生内化降解,导致CD8+T细胞和NK细胞NKG2D下调，抑制NK细胞杀伤活性，导致肿瘤逃逸。研究的内容与指标研究胃肠上皮性恶性肿瘤和MIC基因分型的免疫遗传相关因素，广东汉族人群中不同MICA基因分型胃肠癌发病率的统计。包括：病人病情诊断；相应标本提取；病理活检确诊分期；病人及相应对照组MICA基因分型的确定.分析MICA基因及sMICA表达水平与各不同分期胃肠道恶性肿瘤病程转归之间的关系。.定性及定量分析sMICA并在病情发展过程中进行sMICA表达水平动态监测。针对性建立遗传背景的高危人群长期监控机制。建立长期回访机制，定期检测高危人群，达到极早期发现的、及早治疗的目的。确立胃肠癌分型分期的分子遗传学标准。结合sMICA动态检测结果及临床癌症转归，制定肿瘤早期确诊的sMIC临界值。（增加已有的消化道肿瘤癌标如CEA、CA199等进行对比分析其作为癌标的价值及意义）初步探讨通过不同药物调控MICA-NKG2D机制进行肿瘤免疫治疗（文献报道干扰素可以上调肿瘤mMICA的表达、寻找另一种细胞因子对肿瘤mMICA表达的作用）MICA-NKG2D机制尚未明确、肿瘤的逃避机制尚未明确，机制的研究更具前瞻性（红色表示我暂有的想法，需导师指点）胃肠癌疑似病例抽取外周血内窥镜提取黏膜上皮组织PCR-SSPMICA多态性基因分型ELISA测定检测sMICAXMAP定量检测sMIICA表达水平病理切片确定分期家族史询问相关遗传背景人群抽取外周血PCR-SSPMICA多态性基因分型长期回访检测机制技术路线课题研究的进度及预期达到的指标2013.03-2013.07收集胃肠癌病人及相应对照组样本，进行MICA基因分型和sMICA定性定量分析,收集实验数据。预期进展估计收集分析样本50-100例，所得数据包临床病理免疫组化报告，相应标本MICA基因亚型及sMICA体内表达量实验室数据及其他消化道肿瘤相关癌标如CEACA199等。2013.07-2013.08收集实验所得数据，运用统计学软件进行所得数据统计回归分析整理写好文章。预