《放射免疫分析质控》课件

放射免疫分析的

质控与临床应用河北医科大学第三医院黄建敏1精选ppt放射免疫分析的

质控与临床应用河北医科大学第三医院1精选pp1960年美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析,并因此在1977年获得了诺贝尔医学奖!2精选ppt1960年美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析相关管理规则自70年代起,放免技术广泛应用为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和销售,我国在1989年4月颁布了<<放射性药品管理办法>>,1995年12卫生部药政局颁布了<<放射免疫分析药盒通则>>3精选ppt相关管理规则自70年代起,放免技术广泛应用3精选ppt同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、操作行为更加规范，各地也出台了相应的质控手册等4精选ppt同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、操作行为更加规5精选ppt5精选ppt浙江省核医学中心：

1993年2月浙江省核医学中心成立，负责全省核医学技术指导、培训核医学从业人员（核医学上岗培训及在岗培训）及全省核医学质量控制、管理等工作。

6精选ppt浙江省核医学中心：6精选ppt主要内容误差的种类产生误差的主要原因和控制方法内部质量评价外部质量评价放射免疫分析的临床应用7精选ppt主要内容误差的种类放射免疫分析

误差系统误差随机误差可以避免不可避免可以控制8精选ppt误差系统误差随机误差

用于评价系统误差的指标称为偏倚（bias），而在体外放射分析中更多的使用准确度（accuracy），是指：测定值与真值的一致程度

评价随机误差的指标称为精密度(precision),指在一定条件下，由一种实验方法对某一样品多次重复检测时所得结果的一致性9精选ppt9精选ppt10精选ppt10精选ppt产生误差的主要原因误差ADGEB玻璃容器加样器具仪器和设备解释及评价生物样品的制备

操作

CF试剂

数据处理11精选ppt产生误差的主要原因误差ADGEB玻璃容器仪器和设备解释及评价1.仪器和设备对误差的影响

放射性探测仪离心机混匀器12精选ppt1.仪器和设备对误差的影响

放射性探测仪离心关于放射性探测仪应注意一下几点仪器是否在最佳公作条件下工作，例：用测131I的条件测125I就不妥测量的误差：样品的放射性活度过低，则使误差增大；本底同样对测量结果产生影响生物样品也是引进误差的常见原因：例：对于能量较低的125I来说，管壁的自吸收现象13精选ppt关于放射性探测仪应注意一下几点仪器是否在最佳公作条件下工作，离心机的使用一般的离心机只通过转速来表示工作状态，而忽略了半径对离心力的影响，因此建议将每分钟转速转换为相对离心力，其公式为：RCF=0.00001118×R×N2温度同样会对离心产生影响一般控制在40C为宜14精选ppt离心机的使用一般的离心机只通过转速来表示工作状态，而混匀器使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混匀，应加注意的是防止将溶液溅出管外造成损失，引起误差15精选ppt混匀器使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品的现象并不少见，这样会使样品测定值发生变化而难以觉察其它试剂：例如体外分析常用双蒸馏水或去离子水及缓冲液，其质量是否合格？16精选ppt质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品的现2.玻璃容器及加样器具对误差的影响由于体外放射分析是微量操作技术，所以所使用的移液枪除应校准其容量外，还应观察其气密程度；而操作中更应注意其正确的排液方式及是否存在气泡的影响17精选ppt2.玻璃容器及加样器具对误差的影响由于体外放射分析是微量13.试剂对误差的影响标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案不同，应认真区分并尽量取样准确，例，类固醇激素只能用选定的稀释液来稀释标记物：随时间延长，应考虑到放射元素的脱标和物理衰变的影响，而放射性浓度较高则可能因“衰变损伤”导致配体分子免疫活性下降18精选ppt3.试剂对误差的影响标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此“不能反复冻融；一旦稀释，一次性使用”分离剂：足量以供在一定时期内连续使用，如需更换，必须鉴定，因即使是同一厂家同一批次其性能也可有所差别19精选ppt结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此“不能反复4.生物样品的采集与制备生物样品的采集应注意以下几点：

体位：例：对血浆肾素活性测定的影响饮食：例：对基础胰岛素水平的影响

时间：例：昼夜对对皮质醇和ACTH的影响机体状态：例：应激对皮质醇和ACTH的影响

性别.年龄.月经周期：例：对性激素水平的影响药物：例：氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响20精选ppt4.生物样品的采集与制备生物样品的采集应注意以下几点：20精生物样品的制备:

目的:适于检测方法的需要而同时保存分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可以影响检测结果的任何变化例如：是否需要抗凝？用何种抗凝剂？不能马上检测是否需要离心？保存的温度如何？避免溶血！等等！！21精选ppt生物样品的制备:！21精选ppt5.操作操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，其中加样环节尤其重要!加样速度是否均一，移液枪的使用是否规范？所用容器等是否清洁或受到污染？离心的时间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、吸取上清液的技巧等等

22精选ppt5.操作操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，6.数据处理关于标准曲线拟合方式的选择:虽然其目的是最佳反映出剂量和效应的关系，但目前没有任何一种拟合方式能最佳的满足所有的检测系统，因此，需要去选择！23精选ppt6.数据处理关于标准曲线拟合方式的选择:23精选ppLogitY=a+b·logX优点：常用、计算简单、使用方便缺点：有一定的偏离，特别是线性两端3/2次方曲线回归或logitY=a+b·logX+c（logX）2+d（logX）3优点：真实性强缺点：计算复杂，不易发现并舍弃坏点WHO推荐四参数logistic法其适应性强，但计算复杂24精选pptLogitY=a+b·logX24精选ppt但目前的放射免疫分析系统自带的软件能够对拟合方式作出最佳的选择！25精选ppt但目前的放射免疫分析系统自带的软件25精选ppt7.解释和评价

单位的统一：最好使用国际制单位并统一起来正常值及正常范围:各实验室应该建立自己的正常值及正常范围，借用文献或以往的数据不可取，因为抽样群体的差别和检测技术的不同，都可能会影响到正常值及正常范围。建立自己的正常值和正常范围时也应注意两点：1受检人群是否健康2受检人群样本含量大小26精选ppt7.解释和评价单位的统一：最好使用国际制单位并统一起来26内部质量控制主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的控制，它包括从采集生物样品到发出检测报告的全过程，及时发现误差，找出引起误差的原因和改正的办法，保证检测的质量，而对试剂盒的评价是十分重要的内容27精选ppt内部质量控制主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的控评价试剂盒质量的基本准则：

精密度:指同一样品在多次重复测定中所得结果的一致程度，反映随机误差。反应精密度的指标有变异系数/反应误差关系/精密度图准确度:指测定值与真值或标示值在数量上的符合程度，反映系统误差。常用回收率来表示特异性:指不受干扰物质影响测定结果的程度，反映对分析物测定的专一性。通过交叉反应率测定来表示28精选ppt评价试剂盒质量的基本准则：28精选ppt灵敏度：指刚能与不含有标准配体的零标准管的测定结果在在统计学上区别开来的配体的最低浓度。一般采用最低可探测浓度来表示有效性：又称健全性，指试剂盒能够达到实验的某一具体目标的有效程度，因此应有其正常值和正常范围，正常与异常之间有良好的界限。健全性实验对于评价检测结果不可或缺29精选ppt灵敏度：指刚能与不含有标准配体的零标准管的测定结果在在统计稳定性：指试剂盒在合理的保存条件下，在规定的时间内能保持其全部原有性能不变的能力，常用的质量指标有零标准试管结合率（B0%）/非特异结合率（NSB%）/经直线化后的标准曲线的截距/斜率/及相关系数或者有效剂量浓度（ED75/ED50/ED25）/质控样品的质控图表等30精选ppt稳定性：指试剂盒在合理的保存条件下，在规定的时间

但在日常的常规工作中，每测一批样品要进行如此众多的质量指标的计算，实际上是难以做到的！为此，需要拟订能够在日常工作中完成的/又能反应检测质量的方案，这种方案分为两种类型：实验室批内监测和实验室批间监测31精选ppt但在日常的常规工作中，每测一批样品要进行如此众多的质实验室批内监测方案推荐以下十项指标：⑴零标准管结合率（B0%）⑵非特异性结合率（NSB%）⑶反应误差关系（RER）32精选ppt实验室批内监测方案推荐以下十项指标：32精选ppt⑷当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得方程Y=a+bX时，选用截距（a），斜率（b），相关系数（r）及有效剂量浓度值50（ED50）等四个指标，以反应标准曲线的质量⑸应用质量控制样品测得值求出标准差及偏差值；精密度图在允许的变异系数限度下（如10%），所包括的标准剂量浓度点数33精选ppt⑷当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得方程Y=a+bX时实验室批间监测方案批间监测的基础是每批检测的质量，着重是观察检测的稳定性，并从相关指标的分析中，及时发现发生误差的原因，并提供消除的方法，以保证检测的质量。进行批间监测的主要形式是制备各种质量控制图或表，以了解其稳定性及变化趋势34精选ppt实验室批间监测方案批间监测的基础是每批检测的质量，着

工作中还应注意以下几点:

对于检测结果应密切结合临床,必要时积极与临床科室联系,指导其正确采集及送检各种标本不任意更换试剂盒测定结果必须由有经验的主治医师或主管技师复核后签发多项指标联合测定时,如有矛盾者应及时复查后发报告对异常结果及特殊病例要及时与临床医生沟通一二三四35精选ppt工作中还应注意以下几点:一二三四35精选ppt实验室外质量控制

即室间质控:对各实验室之间测定结果按统一评价方案及方法比较分析,必须建立在严格的内部质量控制的基础上组织单位:各省临床检验中心,卫生部临床检验中心36精选ppt实验室外质量控制即室间质控:对各实验室之间测定结果按统

我国于1982年部临检中心成立时开始在全国范围内开展临床检验室间质量评价活动卫医发[2006]73号卫生部关于印发<<医疗机构临床实验室管理办法>>的通知和卫医发［２００５］１０４号卫生部关于印发<<医院管理评价指南（试行）>>的通知均要求临床实验室参加室间质量评价活动

室间质量评价是临床实验室全面质量管理的重要组成部分,也是医院管理年督导的重要内容之一37精选ppt37精选ppt

室间质量评价可用于确定某个实验室进行检测或测量的能力,以及监控实验室的持续能力识别实验室中的问题并制定相应的补救措施确定新的检测和测量方法的有效性和可比性,并对这些方法进行相应的监控增加实验用户的信心识别实验室间的差异38精选ppt38精选ppt39精选ppt39精选ppt放射免疫分析的临床应用

临床常用近200种肿瘤相关抗原的测定：AFP、CEA、CA199、CA-125、CA153、CA724、CYFRA211、PSA等激素的测定：下丘脑-垂体-甲状腺轴激素，下丘脑-垂体-性腺轴激素，下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴激素，胃肠道激素，心血管激素，甲状旁腺素与降钙素，生长激素等非激素蛋白质的测定：铁蛋白、各种尿微量蛋白、铜蓝蛋白、肌红蛋白、血栓素、III型前胶原肽、层黏蛋白等

40精选ppt放射免疫分析的临床应用临床常用近200种40精（4）酶的测定：前列腺酸性磷酸酶、SOD、NSE等（5）药物及维生素的测定：地高辛、叶酸、VitB12等（6）免疫分子的测定：各种Ig、抗DNA、IL、CD、CIC（7）病原学研究：现已基本淘汰，但细菌代谢产物的测定仍有一定的价值（8）其它：甘胆酸、透明质酸等41精选ppt（4）酶的测定：前列腺酸性磷酸酶、SOD、NSE等4ThankYou!!!42精选pptThankYou!!!42精选ppt放射免疫分析的

质控与临床应用河北医科大学第三医院黄建敏43精选ppt放射免疫分析的

质控与临床应用河北医科大学第三医院1精选pp1960年美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析,并因此在1977年获得了诺贝尔医学奖!44精选ppt1960年美国学者Yalow和Berson创立了放射免疫分析相关管理规则自70年代起,放免技术广泛应用为了规范放射免疫分析试剂盒的生产和销售,我国在1989年4月颁布了<<放射性药品管理办法>>,1995年12卫生部药政局颁布了<<放射免疫分析药盒通则>>45精选ppt相关管理规则自70年代起,放免技术广泛应用3精选ppt同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、操作行为更加规范，各地也出台了相应的质控手册等46精选ppt同时为了使放射免疫分析的结果更为准确、操作行为更加规47精选ppt5精选ppt浙江省核医学中心：

1993年2月浙江省核医学中心成立，负责全省核医学技术指导、培训核医学从业人员（核医学上岗培训及在岗培训）及全省核医学质量控制、管理等工作。

48精选ppt浙江省核医学中心：6精选ppt主要内容误差的种类产生误差的主要原因和控制方法内部质量评价外部质量评价放射免疫分析的临床应用49精选ppt主要内容误差的种类放射免疫分析

误差系统误差随机误差可以避免不可避免可以控制50精选ppt误差系统误差随机误差

用于评价系统误差的指标称为偏倚（bias），而在体外放射分析中更多的使用准确度（accuracy），是指：测定值与真值的一致程度

评价随机误差的指标称为精密度(precision),指在一定条件下，由一种实验方法对某一样品多次重复检测时所得结果的一致性51精选ppt9精选ppt52精选ppt10精选ppt产生误差的主要原因误差ADGEB玻璃容器加样器具仪器和设备解释及评价生物样品的制备

操作

CF试剂

数据处理53精选ppt产生误差的主要原因误差ADGEB玻璃容器仪器和设备解释及评价1.仪器和设备对误差的影响

放射性探测仪离心机混匀器54精选ppt1.仪器和设备对误差的影响

放射性探测仪离心关于放射性探测仪应注意一下几点仪器是否在最佳公作条件下工作，例：用测131I的条件测125I就不妥测量的误差：样品的放射性活度过低，则使误差增大；本底同样对测量结果产生影响生物样品也是引进误差的常见原因：例：对于能量较低的125I来说，管壁的自吸收现象55精选ppt关于放射性探测仪应注意一下几点仪器是否在最佳公作条件下工作，离心机的使用一般的离心机只通过转速来表示工作状态，而忽略了半径对离心力的影响，因此建议将每分钟转速转换为相对离心力，其公式为：RCF=0.00001118×R×N2温度同样会对离心产生影响一般控制在40C为宜56精选ppt离心机的使用一般的离心机只通过转速来表示工作状态，而混匀器使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混匀，应加注意的是防止将溶液溅出管外造成损失，引起误差57精选ppt混匀器使用混匀器的目的是使参加反应的试剂能够充分的混质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品的现象并不少见，这样会使样品测定值发生变化而难以觉察其它试剂：例如体外分析常用双蒸馏水或去离子水及缓冲液，其质量是否合格？58精选ppt质量控制样品：实际工作中只利用标准曲线而不用质量控制样品的现2.玻璃容器及加样器具对误差的影响由于体外放射分析是微量操作技术，所以所使用的移液枪除应校准其容量外，还应观察其气密程度；而操作中更应注意其正确的排液方式及是否存在气泡的影响59精选ppt2.玻璃容器及加样器具对误差的影响由于体外放射分析是微量13.试剂对误差的影响标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案不同，应认真区分并尽量取样准确，例，类固醇激素只能用选定的稀释液来稀释标记物：随时间延长，应考虑到放射元素的脱标和物理衰变的影响，而放射性浓度较高则可能因“衰变损伤”导致配体分子免疫活性下降60精选ppt3.试剂对误差的影响标准品：不同的试剂盒对标准品的组装方案结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此“不能反复冻融；一旦稀释，一次性使用”分离剂：足量以供在一定时期内连续使用，如需更换，必须鉴定，因即使是同一厂家同一批次其性能也可有所差别61精选ppt结合剂：保存不当是使结合剂质量下降的主要原因，因此“不能反复4.生物样品的采集与制备生物样品的采集应注意以下几点：

体位：例：对血浆肾素活性测定的影响饮食：例：对基础胰岛素水平的影响

时间：例：昼夜对对皮质醇和ACTH的影响机体状态：例：应激对皮质醇和ACTH的影响

性别.年龄.月经周期：例：对性激素水平的影响药物：例：氢氯塞嗪对血清醛固酮的影响62精选ppt4.生物样品的采集与制备生物样品的采集应注意以下几点：20精生物样品的制备:

目的:适于检测方法的需要而同时保存分析物在在生物样品中的本来面目而不出现可以影响检测结果的任何变化例如：是否需要抗凝？用何种抗凝剂？不能马上检测是否需要离心？保存的温度如何？避免溶血！等等！！63精选ppt生物样品的制备:！21精选ppt5.操作操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，其中加样环节尤其重要!加样速度是否均一，移液枪的使用是否规范？所用容器等是否清洁或受到污染？离心的时间、速度、分离剂的量、离心后至分离上清液的时间、吸取上清液的技巧等等

64精选ppt5.操作操作技术不熟练是产生随机误差的主要原因，6.数据处理关于标准曲线拟合方式的选择:虽然其目的是最佳反映出剂量和效应的关系，但目前没有任何一种拟合方式能最佳的满足所有的检测系统，因此，需要去选择！65精选ppt6.数据处理关于标准曲线拟合方式的选择:23精选ppLogitY=a+b·logX优点：常用、计算简单、使用方便缺点：有一定的偏离，特别是线性两端3/2次方曲线回归或logitY=a+b·logX+c（logX）2+d（logX）3优点：真实性强缺点：计算复杂，不易发现并舍弃坏点WHO推荐四参数logistic法其适应性强，但计算复杂66精选pptLogitY=a+b·logX24精选ppt但目前的放射免疫分析系统自带的软件能够对拟合方式作出最佳的选择！67精选ppt但目前的放射免疫分析系统自带的软件25精选ppt7.解释和评价

单位的统一：最好使用国际制单位并统一起来正常值及正常范围:各实验室应该建立自己的正常值及正常范围，借用文献或以往的数据不可取，因为抽样群体的差别和检测技术的不同，都可能会影响到正常值及正常范围。建立自己的正常值和正常范围时也应注意两点：1受检人群是否健康2受检人群样本含量大小68精选ppt7.解释和评价单位的统一：最好使用国际制单位并统一起来26内部质量控制主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的控制，它包括从采集生物样品到发出检测报告的全过程，及时发现误差，找出引起误差的原因和改正的办法，保证检测的质量，而对试剂盒的评价是十分重要的内容69精选ppt内部质量控制主要是探讨体外放射分析过程中对实验质量的控评价试剂盒质量的基本准则：

精密度:指同一样品在多次重复测定中所得结果的一致程度，反映随机误差。反应精密度的指标有变异系数/反应误差关系/精密度图准确度:指测定值与真值或标示值在数量上的符合程度，反映系统误差。常用回收率来表示特异性:指不受干扰物质影响测定结果的程度，反映对分析物测定的专一性。通过交叉反应率测定来表示70精选ppt评价试剂盒质量的基本准则：28精选ppt灵敏度：指刚能与不含有标准配体的零标准管的测定结果在在统计学上区别开来的配体的最低浓度。一般采用最低可探测浓度来表示有效性：又称健全性，指试剂盒能够达到实验的某一具体目标的有效程度，因此应有其正常值和正常范围，正常与异常之间有良好的界限。健全性实验对于评价检测结果不可或缺71精选ppt灵敏度：指刚能与不含有标准配体的零标准管的测定结果在在统计稳定性：指试剂盒在合理的保存条件下，在规定的时间内能保持其全部原有性能不变的能力，常用的质量指标有零标准试管结合率（B0%）/非特异结合率（NSB%）/经直线化后的标准曲线的截距/斜率/及相关系数或者有效剂量浓度（ED75/ED50/ED25）/质控样品的质控图表等72精选ppt稳定性：指试剂盒在合理的保存条件下，在规定的时间

但在日常的常规工作中，每测一批样品要进行如此众多的质量指标的计算，实际上是难以做到的！为此，需要拟订能够在日常工作中完成的/又能反应检测质量的方案，这种方案分为两种类型：实验室批内监测和实验室批间监测73精选ppt但在日常的常规工作中，每测一批样品要进行如此众多的质实验室批内监测方案推荐以下十项指标：⑴零标准管结合率（B0%）⑵非特异性结合率（NSB%）⑶反应误差关系（RER）74精选ppt实验室批内监测方案推荐以下十项指标：32精选ppt⑷当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得方程Y=a+bX时，选用截距（a），斜率（b），相关系数（r）及有效剂量浓度值50（ED50）等四个指标，以反应标准曲线的质量⑸应用质量控制样品测得值求出标准差及偏差值；精密度图在允许的变异系数限度下（如10%），所包括的标准剂量浓度点数75精选ppt⑷当标准曲线应用双对数转换并经线性回归获得方程Y=a+bX时实验室批间监测方案批间监测的基础是每批检测的质量，着重是观察检测的稳定性，并从相关指标的分析中，及时发现发生误差的原因，并提供消除的方法，以保证检测的质量。进行批间监测的主要形式是制备各种质量控制图或表，以了解其稳定性及变化趋势76精选ppt实验室批间监测方案批间监测的基础是每批检测的质量，着

工作中还应注意以下几点:

对于检测结果应密切结合临床,必要时积极与临床科室联系,指导其正确采集及送检各种标本不任意更换试剂盒测定结果必须由有经验的主治医师或主管技师复核后签发多项指标联合测定时,