2023学年四川省成都市高考生物四模试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷注意事项1．考生要认真填写考场号和座位序号。2．试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上，在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答；第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3．考试结束后，考生须将试卷和答题卡放在桌面上，待监考员收回。一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．关于RNA的叙述，错误的是()A．少数RNA具有生物催化作用B．真核细胞内mRNA和tRNA都是在细胞质中合成的C．mRNA上决定1个氨基酸的3个相邻碱基称为密码子D．细胞中有多种tRNA，一种tRNA只能转运一种氨基酸2．2019年诺贝尔生理学或医学奖授予发现细胞感知和适应氧气变化机制的科学家。研究发现，合成促红细胞生成素（EPO）的细胞持续表达低氧诱导因子（HIF-lα）。在氧气供应不足时，细胞内积累的HIF-lα可以促进EPO的合成，使红细胞增多以适应低氧环境。此外，该研究可为癌症的治疗提供新思路。下列相关叙述不正确的是（）A．生活在高原的人细胞内HIF-1α的水平可能要比一般人高B．干扰HIF-lα的降解可能为治疗贫血提供创新性疗法C．若氧气供应不足，HIF-lα会使EPO基因的表达水平降低D．抑制癌细胞中HIF-lα基因的表达可为癌症的治疗提供新思路3．果酒的工业化酿造可在图示的发酵罐中进行。下列叙述错误的是（）A．夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理B．乙醇为挥发性物质，故发酵过程中空气流速不宜太大C．发酵过程中需定时关注压力变化以保证安全生产D．可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵4．下列有关人体细胞内ATP的叙述，错误的是A．一个ATP分子中含有两个高能磷酸键B．人体细胞合成ATP时都需要氧气的参与C．内质网上的核糖体合成免疫球蛋白时需要消耗ATPD．正常细胞中ATP与ADP的比值在一定范围内变化5．在面包制作时，先将一定量的酵母加入和好的面团中，后经蒸烤得到松软可口的面包。在此过程中不会发生的变化是A．酵母菌进行了乙醇发酵B．酵母菌的细胞溶胶中有CO2产生C．丙酮酸产生酒精时伴随ATP的生成D．酵母菌线粒体中，特殊分子所携带的氢和电子传递给氧形成水6．根据细胞DNA含量不同，将某种连续增殖的细胞株细胞分为三组，每组的细胞数如图。下列叙述错误的是（）A．对该细胞株进行营养限制性培养，甲组细胞比例增大B．在培养液中加入DNA合成抑制剂，丙组细胞数目减少C．抑制该细胞株细胞的核糖体形成，乙组细胞数目不变D．抑制该细胞株细胞的纺锤体形成，丙组细胞比例增大7．离子泵是一种具有ATP水解酶活性的载体蛋白,能利用水解ATP释放的能量跨膜运输离子。有关下列叙述正确的是（）A．神经元处于静息状态时，钾离子通过离子泵外流B．缺氧会影响神经元兴奋是因为钠离子通过离子泵内流C．动物一氧化碳中毒不会影响离子泵跨膜运输离子的速率D．葡萄糖进入红细胞的方式与离子泵跨膜运输离子的的方式不同8．（10分）以下关于生物实验的说法正确的是（）A．在利用红细胞制作纯净细胞膜的实验中用到差速离心法B．在生长素类似物促进扦插枝条生根的实验中，浸泡法处理枝条时最好在遮阴和空气湿度高的地方完成C．在观察植物根尖有丝分裂的实验中，解离后需要用50%酒精漂洗10分钟D．在研究酵母菌种群数量变化的实验中，需要设置空白对照以确保实验结果的准确性二、非选择题9．（10分）2019年1月24日，《国家科学评论》发表了上海科学家团队的一项重要成果，即先通过基因编辑技术切除猕猴受精卵中的生物节律核心基因BMAL1，再利用体细胞克隆技术，获得了五只BMAL1基因敲除的克隆猴，这是国际上首次成功构建出了一批遗传背景一致的生物节律紊乱的猕猴模型，同时也是世界上首个体细胞克隆猴“中中”“华华”诞生后，体细胞克隆猴技术的首次应用。基因编辑技术是上述研究中的核心技术，该技术中的基因编辑工具是经改造的CRISPR/Cas9系统。该系统由向导RNA和Cas9蛋白组成，由向导RNA引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割来完成基因的编辑过程，其工作原理如下图所示。（1）CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌体内，推测该系统在细菌体内的作用是___________。（2）由于Cas9蛋白没有特异性，用CRISPR/Cas9系统切割BMAL1基因，向导RNA的识别序列应具有的特点是___________。（3）为了获得更多的受精卵，可对母猕猴注射___________激素，使其超数排卵，判断卵细胞受精成功的重要标志是___________。在个体水平鉴定BMAL1基因敲除成功的方法是___________。（4）该团队利用一只BMAL1缺失的成年猕猴体细胞克隆出5只后代的实验中，体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是___________。（5）在人类生物节律紊乱机理硏究方面，猕猴模型比小鼠、果蝇等传统模型动物更加理想，理由是___________。基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只BMAL1缺失猕猴（A组），与仅通过基因编辑受精卵得到的数只BMAL1缺失猕猴（B组）比较，___________（填“A组”或“B组”）更适合做疾病研究模型动物，理由是___________。10．（14分）从一个自然界果蝇种群中选出一部分未交配过的果蝇，该种果蝇具有刚毛（A）和截毛（a）一对相对性状，且刚毛果蝇和截毛果蝇的数量相等，每种性状的果蝇雌雄各一半。所有果蝇均能正常生活。从种群中随机选出1只刚毛雄果蝇和1只截毛雌果蝇交配，产生的87只子代中，42只雌蝇全部表现为刚毛，45只雄蝇全部表现为截毛。（1）上述结果显示，果蝇刚毛和截毛在遗传上和性别相关联，这种现象称为____，其遗传遵循____定律。（2）我们认为，根据上述结果不能确定A和a是位于X染色体上，还是位于X、Y染色体的同源区段上。请简要说明理由。（提示：如果位于X、Y染色体的同源区段上，则显性纯合雄果蝇的基因型可写成XAYA）________________（3）为了确定A和a是位于X染色体上，还是位于X、Y染色体的同源区段上，请用上述果蝇种群为实验材料，进行一代杂交实验，应该怎样设计实验？（简要写出杂交组合，预期结果并得出结论）_________11．（14分）在荧光素酶中加入正确的荧光素底物就可以放出荧光。荧光素酶及其合成基因在生物研究中有着广泛的应用。请回答下列问题：（1）荧光素酶基因可以从基因文库中获取，也可以通过________方法得到，再利用PCR技术扩增即可，扩增荧光素酶基因利用的原理是__________________。（2）在基因工程操作过程中，需要用________酶和________酶构建基因表达载体，基因表达载体要有________，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。（3）荧光素酶基因也可以作为目的基因转入某些动植物细胞中表达产生荧光素酶。将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是农杆菌的Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的________上，然后再转移至受体细胞中。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是_______。12．回答下列（一）、（二）小题：（一）开发山楂果醋恰好让山楂中的有机酸丰富了果醋的酸味，同时也弥补生食山楂酸味大的缺陷，具体酿制山楂果醋分为以下三个阶段，请将具体过程补充完整。（1）制备山楂果原汁：选成熟的山楂果，在清水冲洗山楂果_______（填“之前”或“之后”）去梗。将山楂果切片并去籽，再添加_______，酶解适宜时间后压榨取果汁。（2）乙醇发酵：由于山楂果原汁_______，故发酵液中添加适量蔗糖，以获得酒精含量较高的果酒。果汁中加入活化的________后，在适宜环境下发酵一段时间，当发酵液中停止_______，发酵完毕待过滤，或发酵至_______，上清液即为果酒，用虹吸法取出。（3）醋酸发酵：将醋化醋杆菌进行扩大培养后，经检查菌体生长正常并无杂菌污染后接种于山楂酒-水中进行发酵，整个发酵过程需要通入_______。在发酵后期加入1．3~1．4%的食盐，其目的是调味和_______，以防止果醋被发酵分解。（二）下图为转基因抗虫烟草的培育流程，①②③④表示过程，其中②表示利用农杆菌转入受体细胞。回答下列相关问题：（1）在①过程构建重组质粒时，若用同一种限制性核酸内切酶处理Ti质粒和含目的基因的DNA片段，使两者形成粘性末端用于拼接，这种方法的明显缺点是目的基因和质粒________（答出2点即可）。另外，影响拼接效率的主要因素，除以上缺点和盐离子浓度、渗透压、温度等环境因素外，还有_______（答出2点即可）。（2）在②过程中，将图示重组Ti质粒导入农杆菌时可用______处理农杆菌，以提高转化效率。操作之后，需要特定的培养基对农杆菌进行筛选，其原因是_______，最终筛选到的对象在相应选择培养基上的存活情况是________。（3）在③过程常通过调节_______的适当配比，从愈伤组织诱导出芽和根的_____，并由此再生出新植株。获得转基因烟草后，再通过[④]_______过程实现多个世代组织培养。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、B【答案解析】

A、所有的RNA均是由转录形成的，有极少数RNA充当酶，A正确；

B、真核细胞内的RNA绝大多数是在细胞核内转录的，所以B选项错误，

C、mRNA上决定1个氨基酸的3个相邻碱基成为密码子，C正确；

D、细胞中有多种tRNA，一种tRNA只能转运一种氨基酸。D正确；

故选B

2、C【答案解析】

分析题文描述可知：在氧气供应不足时，在合成促红细胞生成素（EPO）的细胞内持续表达并积累的低氧诱导因子（HIF-lα）可以促进EPO的合成，进而促进红细胞的生成，使红细胞增多以适应低氧环境。氧气供应不足时，促红细胞生成素（EPO）和低氧诱导因子（HIF-lα）之间为反馈调节。【题目详解】A、高原地区空气稀薄，氧气含量低，而在氧气供应不足时，细胞内会积累HIF-lα，因此生活在高原的人体内HIF-1α的水平可能要比一般人高，A正确；B、干扰HIF-lα的降解，细胞内积累的HIF-lα可以促进EPO的合成，EPO刺激骨髓生成新的红细胞，进而改善贫血状况，B正确；C、在氧气供应不足时，细胞内积累的HIF-lα可以促进EPO的合成，可见，若氧气供应不足，HIF-lα会使EPO基因的表达水平升高，C错误；D、抑制癌细胞中HIF-lα基因的表达可以使EPO的合成减少，从而抑制红细胞增殖，为癌症治疗提供新思路，D正确。故选C。【答案点睛】本题作为信息类题目，需要考生从题干中提取促红细胞生成素（EPO）与低氧诱导因子（HIF-lα）之间关联等信息来解决问题。3、B【答案解析】

分析题图：图中排料口的作用是出料、检测；充气口的作用是在果酒制作前期通入氧气的，以便于酵母菌有氧呼吸大量繁殖；排气孔是排气，其弯弯曲曲的好处是防止杂菌和浮尘进入发酵罐内造成污染。【题目详解】A、果酒制作是利用酵母菌的无氧呼吸，而酵母菌适宜生存的温度为18～25℃，而夏天温度较高，因此夏季生产果酒时，常需对罐体进行降温处理，A正确；B、产生酒精表明此时已经进行无氧呼吸，无氧呼吸过程中不能充气，否则会抑制酵母菌的无氧呼吸，B错误；C、正常发酵过程中，酵母菌无氧呼吸不消耗气体，但是不断产生二氧化碳，因此罐内的压力不会低于大气压，需定时关注压力变化以保证安全生产，C正确；D、可以通过监测发酵过程中残余糖的浓度来决定何时终止发酵，D正确。故选B。4、B【答案解析】

A、在一个ATP分子中含有两个高能磷酸键，A正确；B、人体细胞合成ATP时不一定需要氧气的参与，如有氧呼吸第一、第二阶段均不需要氧气的参与，B错误；C、核糖体合成免疫球蛋白时需要消耗ATP，C正确；D、正常细胞中ATP与ADP的含量相对稳定，比值在一定范围内变化，D正确。故选B。5、C【答案解析】

酵母菌是兼性厌氧性微生物，在有氧的条件下进行有氧呼吸产生二氧化碳和水，在无氧条件下进行无氧呼吸产生二氧化碳和酒精。【题目详解】该过程中，酵母菌可以进行无氧呼吸产生酒精，称为乙醇发酵，A正确；酵母菌无氧呼吸发生的场所是细胞溶胶，B正确；无氧呼吸第二阶段，丙酮酸和[H]反应生成酒精和二氧化碳，该过程没有ATP的生成，C错误；在酵母菌的线粒体内膜上，特殊分子所携带的氢和电子传递给氧形成水，D正确。6、C【答案解析】

根据题意和柱形图分析可知，该细胞株能够连续增值，说明其进行的是有丝分裂；甲组细胞中的DNA含量为2C，包括G1期和末期的细胞；乙组细胞中的DNA含量为2C～4C，均为S期细胞；丙组细胞中的DNA含量为4C，包括G2期、前期、中期和后期的细胞。【题目详解】A、据图分析可知，甲组细胞的数量最多，说明其在细胞周期中所占时间最长，因此对该细胞株进行营养限制性培养，甲组细胞比例将增大，A正确；B、在培养液中加入DNA合成抑制剂，DNA复制将受到抑制，导致乙组的细胞不能进入丙组，因此丙组细胞数目将减少，B正确；C、核糖体是蛋白质合成的场所，而蛋白质主要在G1期和G2期合成，即将影响甲组和丙组细胞中蛋白质的合成，因此将会导致乙组细胞数目减少，C错误；D、细胞周期中纺锤体形成于前期，若抑制该细胞株细胞的纺锤体形成，丙组细胞比例将增大，D正确。故选C。7、D【答案解析】

1、离子通过细胞膜进出细胞有两种方式，一种是通过离子通道，另一种是借助离子泵的搬运。前者是协助扩散，后者是主动运输。

2、静息电位和动作电位：（1）静息电位（外正内负）主要是钾离子外流造成的，这个过程钾离子是通过钾离子通道出去的，不耗能，所以是协助扩散。

（2）动作电位主要是钠离子内流，是通过钠离子通道（相当于载体）进入膜内，不耗能，所以这个过程也是协助扩散。

3、自由扩散、协助扩散和主动运输的比较：物质出

入细胞

的方式被动运输主动运输自由扩散协助扩散运输方向高浓度→低浓度高浓度→低浓度低浓度→高浓度是否需要载体不需要需要需要是否消耗能量不消耗不消耗消耗【题目详解】A、神经细胞处于静息状态下，钾离子通过离子通道外流，形成外正内负的静息电位，A错误；B、神经元兴奋时Na+通道打开，Na+通过离子通道内流，不消耗能量，所以缺氧不会影响神经元兴奋时Na+通过通道内流，B错误；

C、动物细胞一氧化碳中毒可导致有氧呼吸受到抑制，从而会降低离子泵的运输速率，C错误；D、葡萄糖进入红细胞的方式为协助扩散，需要载体协助，所以与离子泵运输离子的方式不相同，D正确。【答案点睛】本题考查物质的跨膜运输方式，要求考生识记离子通道和离子泵的结构和功能；识记物质跨膜运输的方式及其特点，能结合所学的知识准确判断各选项。8、B【答案解析】

观察植物细胞有丝分裂装片的制作流程为：解离-漂洗-染色-制片。

（1）解离：上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，立即放入盛入有盐酸和酒精混合液（1：1）的玻璃皿中，在温室下解离。目的：用药液使组织中的细胞相互分离开来。

（2）漂洗：待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。目的：洗去药液，防止解离过度。

（3）染色：把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。目的：染料能使染色体着色。

（4）制片：用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把根尖能碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片．然后，用拇指轻轻的按压载玻片。目的：使细胞分散开来，有利于观察。

（5）观察：

a、低倍镜观察：找到分生区细胞，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂；

b、高倍镜观察：在低倍镜观察的基础上换高倍镜，直到看清细胞的物象为止；

c、仔细观察：先到中期，再找其余各期，注意染色体的特点。【题目详解】A、红细胞吸水涨破后，可以用离心法（而不是差速离心法）获得较纯净的细胞膜，A错误；B、浸泡法处理插条就是将插条浸泡在配置好的生长素类似物溶液中一段时间，然后取出进行扦插让其生根，最好在遮阴和空气湿度较大的环境中进行，B正确；C、在观察植物根尖有丝分裂的实验中，解离后需要用清水漂洗10分钟，C错误；D、探究酵母菌种群数量变化时，由于有前后的自身对照，因此可不设置空白对照实验，D错误。故选B。【答案点睛】本题考查有关的生物学实验，意在考查考生能独立完成“生物知识内容表”所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能的能力。二、非选择题9、切割外源DNA，保护自身能与BMAL1基因特定序列通过碱基互补配对结合促性腺在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体猕猴表现为生物节律紊乱体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难猕猴与人类亲缘关系更近，猕猴生物节律性与人类相近A组A组遗传背景一致（生物节律紊乱程度一致），提高了科学研究的可靠性和可比性（B组可能存在遗传背景（基因编辑成功率）差异，降低科学研究的可靠性和可比性）（或从遗传背景的一致性角度的其他合理表述）【答案解析】

由图可知，向导RNA会与DNA上特定部位的碱基发生互补配对，引导Cas9蛋白在特定的基因位点进行切割。【题目详解】（1）CRISPR/Cas9系统广泛存在于细菌体内，该系统可能切割外源DNA，保护自身。（2）用CRISPR/Cas9系统切割BMAL1基因，向导RNA能与BMAL1基因特定序列通过碱基互补配对结合。（3）可对母猕猴注射促性腺激素，使其超数排卵，以获得更多的受精卵。判断卵细胞受精成功的重要标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体。在个体水平上，可以观察到猕猴表现为生物节律紊乱，说明BMAL1基因敲除成功。（4）体细胞分化程度高，恢复其全能性十分困难，故体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。（5）由于猕猴与人类亲缘关系更近，猕猴生物节律性与人类相近，故在人类生物节律紊乱机理硏究方面，猕猴模型比小鼠、果蝇等传统模型动物更加理想。基因编辑后通过体细胞克隆得到的数只BMAL1缺失猕猴（A组），与仅通过基因编辑受精卵得到的数只BMAL1缺失猕猴（B组）比较，A组遗传背景一致，提高了科学研究的可靠性和可比性，故A组更适合做疾病研究模型动物。【答案点睛】卵子受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体；受精完成的标志是雌雄原核的融合。10、伴性遗传基因的分离若A、a在X染色体上，亲代刚毛雄蝇为XAY，截毛雌蝇为XaXa，则子代中刚毛雌蝇：截毛雄蝇为1：1；若A、a在X、Y染色体上的同源区段，亲代刚毛雄蝇为XAYa，截毛雌蝇为XaXa，则子代中刚毛雄蝇：截毛雄蝇为1：1用多对刚毛雄蝇和截毛雌蝇交配，若子代中雌蝇全部表现为刚毛，雄蝇全部表现为截毛，则A和a位于X染色体上；若子代中无论雌雄蝇均出现刚毛和截毛，则A和a位于X、Y染色体的同源区段上【答案解析】

由题意知，1只刚毛雄果蝇和1只截毛雌果蝇交配，雄果蝇全部为截毛，雌果蝇全部为刚毛，说明果蝇的刚毛、截毛性状与性别相关联，是伴性遗传，控制刚毛、截毛的基因位于性染色体上，在减数分裂过程中，一对性染色体会相互分离，导致等位基因发生分离，因此遵循基因的分离定律，伴性遗传是分离定律的特殊形式。【题目详解】（1）由分析可知，果蝇刚毛和截毛在遗传上和性别相关联，属于伴性遗传，伴性遗传遵循分离定律。（2）如果A、a在X染色体上，亲代刚毛雄蝇为XAY，截毛雌蝇为XaXa，则子代中刚毛雌蝇与截毛雄蝇为1∶1，若A、a在X、Y染色体上的同源区段，亲代刚毛雄蝇为XAYa，截毛雌蝇为XaXa，则子代中刚毛雌蝇与截毛雄蝇为1∶1，因此根据上述结果不能确定A和a是位于染色体上，还是位于X、Y染色体上的同源区段上。（3）为了确定A和a是位于X染色体上，还是位于X、Y染色体上的同源区段，可以用多对刚毛雄蝇和截毛雌蝇交配；如果A和a位于X染色体上，则雌雄的基因型分布为XaXa和XAY，子代中雌蝇全部表现为刚毛，雄蝇全部表现为截毛；如果A和a位于X、Y染色体上的同源区段，则雌雄基因型为XaXa和XAYa，子代中无论雌雄蝇均出现刚毛和截毛。【答案点睛】本题的知识点是果蝇的性别决定和伴性遗传，旨在考查学生理解果蝇性别决定和伴性遗传的概念，并学会应用演绎推理的方法设计遗传实验、预期结果、获取结论。11、人工合成DNA（双链）复制限制DNA连接标记基因T-DNA显微注射技术【答案解析】

1、基因工程的工具：（1）限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（2）DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。（3）运载体：常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒2、基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样，将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术．个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。【题目详解】（1）荧光素酶基因属于目的基因。目的基因可以从基因文库中获取，也可以通过人工合成方法得到，再利用PCR技术扩增即可。利用PCR技术扩增目的基因的原理是DNA双链复制。（2）构建基因表达载体时，需要用限制酶分别切割目的基因和载体，然后用DNA连接酶进行连接，基因表达载体要有标记基因，以便筛选出含有目的基因的受体细胞。（3）将目的基因导入植物细胞，目前常用的目的基因载体是农杆菌的Ti质粒，目的基因需插入到该基因载体的T-DNA上，然后再转移至受体细胞中。将目的基因导入动物细胞的技术中，应用最多的是显微注射技术。【答案点睛】本题结合基因工程的原理及技术，要求考生识记基因工程的原理、操作工具、操作步骤及相关应用，能结合所学的知识准确答题，属于考纲识记和理解层次的考查。12、之后果胶酶（和果胶甲酯酶）含糖量较低干酵母（悬液）出现气泡酵母下沉无菌空气/氧气抑制杂菌反向拼接/倒接、（自身）环化且的基因的浓度、质粒的浓度、反应时间氯化钙CaCl2不是所有的农杆菌都接纳了重组质粒在含四环素培养基上存活，在含青霉素培养基上死亡营养物质和生长调节剂/植物激素项端分生组织继代培养【答案解析】

1.酿酒和制醋是最古老的生物技术。与酒和醋的生产有关的微生物分别是酵母菌和醋杆菌，它们各有不同的菌种。菌种的不同，所产生的酒和醋的风味也不同。本实验的内容是制作果酒和果醋，所用的原料是葡萄或其他果汁。葡萄酒是酵母利用葡萄糖进行酒精发酵(乙醇发酵)的产物。酵母菌只有在无氧条件下才能进行酒精发酵，即将葡萄糖氧化成乙醇，而且当培养液中乙醇的浓度超过16%时，酵母菌就会死亡。葡萄糖氧化成乙醇的反应式如下。醋杆菌在有氧条件下才能将乙醇氧化为醋酸，醋杆菌所产生的醋酸可使培养液中醋酸的含量高达13%。2.基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成．（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等．（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样．将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法．（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋