出凝血实验课件

出凝血相关实验止血机制

当血管发生破损时，首先是局部血管发生短暂地收缩，使血流变缓，破损伤口缩小，之后血管内皮细胞表达并释放出vWF粘附于暴露的胶原组织上，血小板通过膜糖蛋白GPⅠb与vWF相连接而粘附于胶原纤维，同时血小板以膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物为纤维蛋白原的受体，通过纤维蛋白原介导血小板间的聚集，在ADP、肾上腺素、胶原、凝血酶等诱导剂的参与下，聚集的血小板释放出ADP、5-羟色胺、血栓素A2、β-血小板球蛋白等，导致血小板非可逆性聚集,形成血小板血栓。同时，血管受损后暴露的胶原纤维和释放的组织因子，启动内源性和外源性凝血途径,形成牢固的止血血栓，血小板释放出血栓收缩蛋白，使血块退缩，加强止血作用，使出血停止。凝血机制出血时间测定

※基本原理

皮肤毛细血管被刺破后出血自然停止所需的时间称为出血时间。出血时间的变化主要受血小板数量和功能的影响，其次是血管壁的完整性和收缩功能。血浆凝血因子的影响较小。

※简要步骤

出血时间测定器测定法：将出血时间测定

器（双刀片或单刀片弹簧装置）在肘窝下2横指

处常规消毒后贴于皮肤表面，按动按钮，开动秒

表计时。※实验结果参考值：2～6分钟※临床意义

出血时间延长见于：

1、血小板明显减少或功能异常如原发性血小板减少性紫癜、血小板无力症等；

2、严重缺乏血浆有关因子如vWD、DIC；

3、其他异常，如：遗传性出血性毛细血管扩张症、服用抗血小板药物※基本原理

静脉血放在玻璃试管中，观察自采血开始至血凝所需的时间称为凝血时间。本试验反映自因子Ⅻ被负电荷表面激活，至纤维蛋白形成所需的时间，主要反映内源性凝血过程有无异常。

※简要步骤

抽静脉血3ml分别注入3支小试管内。置37℃水浴中，3分钟后每隔30秒钟轻轻倾斜第1支试管1次，直至血液不再流动为止，依次倾斜第2和第3支试管，记录第3管血液凝固所需时间。※实验结果参考值：玻璃试管法4～12min凝血时间测定※临床意义

凝血时间延长见于1、因子Ⅷ、Ⅸ、Ⅺ明显减少如血友病、血管性血友病等；2、凝血酶原和纤维蛋白原高度减少如严重的肝病、阻塞性黄疸、先天性纤维蛋白原减少症等；3、纤溶亢进；4、循环抗凝物质增多及使用※简要步骤

取抗凝血,分离血浆,加APTT试剂，37℃温育3分钟后加Ca2+,记录血浆凝固所需时间。※实验结果

参考值:30～45秒。与正常对照相差在5秒以内为正常，延长10秒以上为异常。凝血酶原时间测定※基本原理

在被检血浆中加入因子Ⅲ和Ca2+后，激活凝血酶原，使纤维蛋白原转化为纤维蛋白，观察血浆凝固所需时间即为凝血酶原时间。本试验是外源性凝血过程的过筛试验。因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅹ、Ⅶ质和量异常影响此试验.※临床意义

凝血酶原时间延长见于：（1）先天性凝血因子异常如因子Ⅰ、Ⅱ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ之一或两种以上的凝血因子有质量异常时。（2）后天性凝血因子异常如严重肝病、维生素K缺乏、DIC后期、使用抗凝药物、纤溶亢进等。凝血酶原时间缩短见于：血液高凝状态（DIC早期、心肌梗死、脑血栓形成、急性血栓性静脉炎）、血栓性疾病、多发性骨髓瘤、洋地黄中毒、口服避孕药等。凝血酶时间测定※基本原理

在被检血浆中加入标准凝血酶溶液后，血浆凝固所需时间，为凝血酶凝固时间。当纤维蛋白原明显减少或有结构异常或血循环中有抗凝血酶物质时，本试验时间长。※简要步骤

取待检血浆，加入标准凝血酶溶液中，记录血浆凝固时间。※实验结果

参考值：16～18S，较正常对照延长3S以上有诊断意义。※临床意义凝血酶时间延长见于：（1）患者血循环中AT-Ⅲ活性明显增高；（2）肝素样物质增多，如严重肝病、胰腺病及过敏性休克等；（3）纤溶亢进，如DIC；（4）纤维蛋白原少或有异常纤维蛋白时；（5）异常球蛋白增多，如多发性骨髓瘤。束臂试验※基本原理束臂试验也称为毛细血管抵抗力试验（

capillaryresistancetest，CRT）。毛细血管

壁的完整性有赖于毛细血管的结构以及血小板的正

常。通过对毛细血管施以压力，观察出血点的多少

，可反映血管壁、血管内皮细胞和血小板的综合止

血作用。※简要步骤在前臂屈侧肘下4cm出划一直径5cm圆圈，并用血压计袖带束于该侧上臂,使压力保持在收缩压和舒张压之间，持续8分钟，解除压力观察出血点。※实验结果Rumpel-leede法：正常人不超过10个出血点（阴性），10个以上出血点为阳性。血浆鱼精蛋白副凝试验※基本原理

硫酸鱼精蛋白能分离FDP与非交联的纤维蛋白单体（FM）聚合的可溶性复合物，使FM沉析出来，呈凝胶状态。※简要步骤

取患者静脉血，分离血浆，在受检血浆中加入硫酸鱼精蛋白，观察是否出现纤维状物。※实验结果正常