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文档简介

1单克隆抗体1单克隆抗体生物导弹生物导弹3教学内容单克隆抗体的发现单克隆抗体的概念单克隆抗体的制备单克隆抗体的应用3教学内容4多克隆抗体的概念4多克隆抗体的概念5

传统抗血清的交叉反应专一性反应沒有反應交叉反应+-+123AgA

xyzAgB1’20AgA’1231231235传统抗血清的交叉反应专一性反应沒有反應交叉反应+-+16单克隆抗体技术发现以及原理1975年Kohler和Milstein首先报道,用细胞杂交技术,使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠的脾细胞,与小鼠的骨髓瘤细胞融合,并由此创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株,获得了抗SRBC的单克隆抗体。这是免疫学,乃至医学史上的一个里程碑。概述2002年发明单克隆抗体技术NobelPrizein19846单克隆抗体技术发现以及原理1975年Kohler和Mils发明单克隆抗体技术NobelPrizein19842002年发明单克隆抗体技术2002年8单克隆抗体的相关概念杂交细胞:在诱导物的作用下同一细胞或不同细胞间的融合,融合的细胞具有双亲本细胞的染色体和全部或部分特性。杂交瘤细胞:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后产生的杂交细胞。8单克隆抗体的相关概念杂交细胞:在诱导物的作用下同一细胞或不单克隆抗体单克隆抗体是将产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合,通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而生产的。由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体,又是单一的B淋巴细胞克隆产生的,因此称为单克隆抗体。它是结构和特异性完全相同的高纯度抗体。单克隆抗体单克隆抗体是将产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合,通过

抗体-a-b-c-d-a-b-c-d抗原決定基BALB/cabbcd传统抗体(抗血清)是所有抗体的混和

脾脏产生各种

B細胞免疫前要先把抗原作成乳剂免疫

抗原采血后可得传统抗血清已建立之小鼠骨髓癌细胞株由脾脏收集B細胞抗原通常有多个抗原決定基免疫后的脾脏约在两月內注射五到八次AgX单克隆抗体的制备过程TK-HGPRT-抗体-a-b-c-d-a-b--d细胞融合-a-b-c-dAgXAgX’ELISAHAT筛选PEGCellfusionHybridomacells融合瘤细胞(Subcloning)

(确定只有一种细胞)d’dabcdabcd’+++++++-X-d-c-b-a+--dNS-1骨髓癌细胞Bcell脾细胞分株培养筛选筛选单抗传统抗体(抗血清)试验专一性对抗原的反应无法分辨完全不同d旧有抗原d’新的抗原单克隆抗体的制备过程-d细胞融合-a-b-c-dAgAgELISAHAT筛选PE单克隆抗体(经典试讲)课件单克隆抗体制备过程一、抗原与动物免疫二、细胞融合三、杂交瘤细胞的筛选四、特异抗体的筛选五、单克隆抗体的大量制备先免后合,两筛两得单克隆抗体制备过程一、抗原与动物免疫先免后合,两筛两得14优点——和常规抗血清相比

1.特异性强:单克隆抗体是针对抗原分子表面抗原决定簇的,有人称为“单特异性”。它是研究生物大分子和细胞表面细微结构以及诊断治疗疾病的有力工具。2.可大量生产,容易标准化:一旦获得1株杂交瘤细胞株,就可以无限制地反复制备出相同特异性的单克隆抗体。由于来自同一株细胞,很容易标准化。3.用不纯的抗原,可以制备出纯的单克隆抗体。用这种抗体又可以提纯抗原。

因为具有上述特点,单克隆抗体应用范围很广,几乎渗透到生物医学的每一个领域,在生物医学研究,临床医学,军事医学和工业生产上都有重要的实用意义。14优点——和常规抗血清相比1.特异性强:单克隆抗体抗体是对其抗原有极强专一性的魔弹或巡弋飞弹研究 以免疫转印法检测

特定抗原,蛋白质的提纯检验 以ELISA侦测特定

病原体治疗

以毒素连结抗体攻击

病变細胞,肿瘤的导向治疗,放射免疫显像技术抗体是对其抗原有极强专一性的研究 以免疫转印法检测特FDA批准了46种单克隆抗体药物上市

2002年

29亿美元

2011年500亿美元

2015年680亿美元FDA批准了46种单克隆抗体药物上市思考题1.单克隆抗体是来自谁?如果直接给人注射,会有什么反应?2.查找出至少3种单克隆抗体药物及其适应症?思考题1.单克隆抗体是来自谁?如果直接给人注射,会有什么反参考资料/article/438970/王廷华2005.抗体理论与技术.科学出版社龚非力2002.医学免疫学.北京:科学出版社18参考资料/artic19谢谢~~敬请各位专家批评指正19谢谢~~单克隆抗体(经典试讲)课件21单克隆抗体1单克隆抗体生物导弹生物导弹23教学内容单克隆抗体的发现单克隆抗体的概念单克隆抗体的制备单克隆抗体的应用3教学内容24多克隆抗体的概念4多克隆抗体的概念25

传统抗血清的交叉反应专一性反应沒有反應交叉反应+-+123AgA

xyzAgB1’20AgA’1231231235传统抗血清的交叉反应专一性反应沒有反應交叉反应+-+126单克隆抗体技术发现以及原理1975年Kohler和Milstein首先报道,用细胞杂交技术,使经绵羊红细胞(SRBC)免疫的小鼠的脾细胞,与小鼠的骨髓瘤细胞融合,并由此创建了第一个B细胞杂交瘤细胞株,获得了抗SRBC的单克隆抗体。这是免疫学,乃至医学史上的一个里程碑。概述2002年发明单克隆抗体技术NobelPrizein19846单克隆抗体技术发现以及原理1975年Kohler和Mils发明单克隆抗体技术NobelPrizein19842002年发明单克隆抗体技术2002年28单克隆抗体的相关概念杂交细胞:在诱导物的作用下同一细胞或不同细胞间的融合,融合的细胞具有双亲本细胞的染色体和全部或部分特性。杂交瘤细胞:B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后产生的杂交细胞。8单克隆抗体的相关概念杂交细胞:在诱导物的作用下同一细胞或不单克隆抗体单克隆抗体是将产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合,通过有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而生产的。由于这种抗体是针对一个抗原决定簇的抗体,又是单一的B淋巴细胞克隆产生的,因此称为单克隆抗体。它是结构和特异性完全相同的高纯度抗体。单克隆抗体单克隆抗体是将产生抗体的细胞与骨髓瘤细胞融合,通过

抗体-a-b-c-d-a-b-c-d抗原決定基BALB/cabbcd传统抗体(抗血清)是所有抗体的混和

脾脏产生各种

B細胞免疫前要先把抗原作成乳剂免疫

抗原采血后可得传统抗血清已建立之小鼠骨髓癌细胞株由脾脏收集B細胞抗原通常有多个抗原決定基免疫后的脾脏约在两月內注射五到八次AgX单克隆抗体的制备过程TK-HGPRT-抗体-a-b-c-d-a-b--d细胞融合-a-b-c-dAgXAgX’ELISAHAT筛选PEGCellfusionHybridomacells融合瘤细胞(Subcloning)

(确定只有一种细胞)d’dabcdabcd’+++++++-X-d-c-b-a+--dNS-1骨髓癌细胞Bcell脾细胞分株培养筛选筛选单抗传统抗体(抗血清)试验专一性对抗原的反应无法分辨完全不同d旧有抗原d’新的抗原单克隆抗体的制备过程-d细胞融合-a-b-c-dAgAgELISAHAT筛选PE单克隆抗体(经典试讲)课件单克隆抗体制备过程一、抗原与动物免疫二、细胞融合三、杂交瘤细胞的筛选四、特异抗体的筛选五、单克隆抗体的大量制备先免后合,两筛两得单克隆抗体制备过程一、抗原与动物免疫先免后合,两筛两得34优点——和常规抗血清相比

1.特异性强:单克隆抗体是针对抗原分子表面抗原决定簇的,有人称为“单特异性”。它是研究生物大分子和细胞表面细微结构以及诊断治疗疾病的有力工具。2.可大量生产,容易标准化:一旦获得1株杂交瘤细胞株,就可以无限制地反复制备出相同特异性的单克隆抗体。由于来自同一株细胞,很容易标准化。3.用不纯的抗原,可以制备出纯的单克隆抗体。用这种抗体又可以提纯抗原。

因为具有上述特点,单克隆抗体应用范围很广,几乎渗透到生物医学的每一个领域,在生物医学研究,临床医学,军事医学和工业生产上都有重要的实用意义。14优点——和常规抗血清相比1.特异性强:单克隆抗体抗体是对其抗原有极强专一性的魔弹或巡弋飞弹研究 以免疫转印法检测

特定抗原,蛋白质的提纯检验 以ELISA侦测特定

病原体治疗

以毒素连结抗体攻击

病变細胞,肿瘤的导向治疗,放射免疫显像技术抗体是对其抗原有极强专一性的研究 以免疫转印法检测特FDA批准了46种单克隆抗体药物上市

2002年

29亿美元

2011年500亿美元

2015年680亿美元FDA批准了

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