2023学年湖北省随州市随县高三二诊模拟考试生物试卷（含答案解析）

2023学年高考生物模拟试卷注意事项1．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回．2．答题前，请务必将自己的姓名、准考证号用0．5毫米黑色墨水的签字笔填写在试卷及答题卡的规定位置．3．请认真核对监考员在答题卡上所粘贴的条形码上的姓名、准考证号与本人是否相符．4．作答选择题，必须用2B铅笔将答题卡上对应选项的方框涂满、涂黑；如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其他答案．作答非选择题，必须用05毫米黑色墨水的签字笔在答题卡上的指定位置作答，在其他位置作答一律无效．5．如需作图，须用2B铅笔绘、写清楚，线条、符号等须加黑、加粗．一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1．如图①～⑤依次表示动物离体神经纤维受到刺激后检测的电位变化过程，图中指针偏转方向与电流方向一致。下列分析正确的是（）A．图①→图②过程中，甲处兴奋，乙处未兴奋B．图③→图④过程中，电表指针偏转值可代表甲电极处静息电位的大小C．神经纤维上接受刺激的部位比较靠近图中的乙处D．图①、③、⑤中甲、乙电极处的膜没有钠、钾离子的跨膜运输2．1864年德国科学家萨克斯将绿色叶片放在暗处12小时，再将此叶片一半曝光，一半用锡箔遮光。光照一段时间后，用碘蒸汽处理叶片，结果发现叶片上曝光部分显深紫蓝色，遮光部分则没有显深紫蓝色。这个实验证明①光合作用需要水②光合作用需要叶绿素③光合作用需要光④光合作用放出氧⑤光合作用产生淀粉A．①⑤ B．②④C．③⑤ D．①④3．野生甘蓝发生了一次变异，导致其某mRNA上一个编码氨基酸的密码子转变成终止密码子，再经过培育得到了花椰菜这个甘蓝亚种。不考虑其它变异，下列相关叙述正确的是（）A．花椰菜相应基因合成的mRNA比野生甘蓝的短B．花椰菜细胞内相关基因的翻译过程，所需tRNA和氨基酸的种类数目不一定相同C．野生甘蓝和花椰菜的染色体数目不同D．甘蓝细胞内，转录可发生在细胞核及内质网等少量细胞器中4．人染色体上的基因E突变为e,导致编码的蛋白质中段一个氨基酸改变，下列叙述正确的是A．E基因突变为e基因发生了碱基对的增添或替换B．E基因突变为e基因，e基因中嘌呤与嘧啶的比值不会改变C．e基因转录时所需的tRNA数量发生改变D．E、e基因的分离发生在减数第二次分裂过程中5．下列关于“肺炎双球菌离体转化实验”和“噬菌体侵染细菌实验”的叙述中，正确的是（）A．实验的对照方法均只采用相互对照B．实验均能证明蛋白质不是遗传物质C．“肺炎双球菌离体转化实验”中用到了液体和固体培养基对细菌进行培养D．“噬菌体侵染细菌实验”中，若32P标记组的上清液出现少量32P的原因是搅拌不充分引起6．医学研究发现，神经退行性疾病与神经元中形成的R-1oop结构有关。R-loop结构是一种三链RNA-DNA杂合片段，由新产生的mRNA与DNA模板链形成了稳定的杂合链，导致该片段中DNA模板链的互补链只能以单链状态存在。下列叙述中错误的是（）A．从理论上讲R-loop结构中含有5种碱基B．R-loop结构中mRNA和DNA模板链的互补链碱基序列相同C．R-loop结构中的DNA单链不稳定，易发生遗传信息改变D．R-loop结构抑制基因的表达7．在进行“观察植物细胞的质壁分离及复原”的实验时，下列相关叙述不正确的是（）A．实验材料应选择有活性的且有大液泡的植物细胞B．在显微镜下看到正常细胞后再滴加高浓度蔗糖溶液C．只有具紫色液泡的洋葱表皮细胞才能发生质壁分离D．本实验不能证实溶质分子进出细胞的方式8．（10分）研究发现，癌细胞表面的PD-L1蛋白可与T细胞表面的PD-1蛋白结合，导致T细胞不能全面启动对癌细胞的免疫攻击，使用抗PD-1抗体可使癌症患者的肿瘤快速萎缩。叙述正确的是（）A．癌细胞的清除体现了免疫系统的监控和清除功能B．PD-L1蛋白和PD-1蛋白结合，这体现了细胞膜的选择透过功能C．PD-L1蛋白和PD-1蛋白均可与抗PD-1抗体结合D．癌症患者体内的PD-1蛋白表达不足会降低机体细胞免疫的能力二、非选择题9．（10分）酶是细胞合成的生物催化剂。随着科技的发展，酶已走近人们的生产和生活。请回答下列有关问题：（1）在工业生产果汁时，常常利用果胶酶破除果肉细胞壁以提高出汁率。果胶酶是分解果胶的一类酶的总称，包括______________________________(至少写出两个)等。（2）加酶洗衣粉是指含有_______________的洗衣粉。对于衣服上的血渍或奶渍，清洗时不能使用开水，原因是_______________。（3）酶反应速度可以用单位时间内、单位体积中_______________来表示。影响酶活性的外界条件包括pH、_______________等。在探究温度或pH对酶活性的影响时，是否需要设置对照实验?如需要如何设置?_______________。（4）工业生产中，若把酶固定在不溶于水的载体上可以被反复利用。一般来讲，酶更适合采用_______________和物理吸附法固定化。10．（14分）猕猴桃酒含有丰富的维生素、氨基酸和大量的多酚，可以起到抑制脂肪在人体中堆积的作用。猕猴桃醋营养丰富、风味独特，是一种上佳的调味品。制作猕猴桃酒和醋的步骤如下：第一步：选用猕猴桃作原料，用清水冲洗去杂质，在破碎机内破碎成浆状，并向其中加入1．1～1．3%的果胶酶，在51-61℃的温度下保持1小时。第二步：在果浆中加入5%的酵母糖液（含糖2．5%），搅拌混合，进行前发酵，时间约5～6天。第三步：当发酵中果浆的残糖降至1%时，进行压榨分离，浆汁液转入后发酵。添加一定量的砂糖，经31～51天后，进行分离。第四步：在猕猴桃酒液中加入2～11%的醋酸菌菌种，发酵21天左右即醋酸发酵结束。回答下列问题。（1）从细胞结构角度分析，酵母菌与醋酸菌的主要区别是_____________；从代谢的角度分析，酵母菌与醋酸菌的主要区别是____________________。（2）向果浆中加入1．1～1．3%的果胶酶的目的是_______________________。（3）猕猴桃酒发酵的过程中装置先通氧后密封，通氧的目的是_________________________________，密封的目的是__________________________________。（4）若在猕猴桃酒液中添加适量葡萄糖，则醋酸菌将猕猴桃酒液中乙醇间接转化成乙酸的速率________（填“上升”“不变”或“下降”）。11．（14分）某哺乳动物的基因型为AABbEe，下图1～4是其体内某一个细胞增殖过程中的部分分裂图像，图5、图6为描述该动物体内细胞增殖过程中相关数量变化的柱形图,图7为该过程中细胞内染色体数目的变化曲线。请回答相关问题：（假设该动物体细胞染色体数目为2n）（1）图1～4细胞分裂的先后顺序是____________，图1细胞的名称是____________，由图1和图4所标注基因可推知，在该细胞增殖过程中发生的变异类型是____________。（2）若图5中的b代表核DNA含量，则c最可能代表____________含量。图1～4中，与图5表示数量变化相符的是____________。（3）该动物体内的细胞在增殖过程中，当发生着丝点分裂后，细胞将处于图6中的____________组。（4）图7中CD段，细胞内含有____________个染色体组。图1～4中，与图7中HI段相对应的是____________。12．萝卜的蛋白A具有广泛的抗植物病菌作用，而且对人体没有影响。我国科学家欲获得高效表达蛋白A的转基因大肠杆菌作为微生物农药，做了相关研究。（1）研究者用相同的_________酶处理蛋白A基因和pET质粒，得到重组质粒，再将重组质粒置于经_________处理的大肠杆菌细胞悬液中，获得转基因大肠杆菌。（2）检测发现，转入的蛋白A基因在大肠杆菌细胞中表达效率很低，研究者推测不同生物对密码子具有不同的偏好，因而设计了与蛋白A基因结合的两对引物（引物B和C中都替换了一个碱基），并按图2方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛋白A基因。①这是一种定点的_________技术。②图2所示的4次PCR应该分别如何选择图1中所示的引物？请填写以下表格（若选用该引物划“√”，若不选用该引物则划“×”）。_____引物A引物B引物C引物DPCR1PCR2PCR3PCR4（3）研究者进一步将含有新蛋白A基因的重组质粒和_________分别导入大肠杆菌，提取培养液中的蛋白质，用_________方法检测并比较三组受体菌蛋白A的表达产物，判断新蛋白A基因表达效率是否提高。为检测表达产物的生物活性，研究者将上述各组表达产物加入到长满了植物病菌的培养基上，培养一段时间后，比较_________的大小，以确定表达产物的生物活性大小。（4）作为微生物农药，使用时常喷洒蛋白A基因的发酵产物而不是转蛋白A基因的大肠杆菌，其优点是_________。

2023学年模拟测试卷参考答案（含详细解析）一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)1、C【答案解析】

根据题意，这五个指针变化图是蛙坐骨神经受到刺激后电位变化的连续过程电位变化图，即指针由①中间而②右偏，回中间，再④向左，最后回到⑤中间。【题目详解】A、由图①至图②过程中甲电极处的膜处于极化状态，乙电极处的膜处于反极化状态，所以甲处未兴奋，乙处兴奋，A错误；B、由图③至图④过程中，电表指针偏转的最大值可代表甲电极处动作电位的大小，B错误；C、由于图②中指针向乙处偏转，说明神经纤维上接受刺激的部位比较靠近图中的乙处，C正确；D、图①、③、⑤中甲、乙电极处的膜有钠、钾离子的跨膜运输，D错误。故选C。2、C【答案解析】

光合作用指绿色植物通过叶绿体，利用光能，把二氧化碳和水转化成储存能量的有机物，并释放出氧气的过程。【题目详解】曝光部分显深紫蓝色，遮光部分则没有显深紫蓝色，说明合成淀粉需要光照。不能说明光合作用需要水、叶绿素，也不能说明光合作用可以产生氧气。综上所述，ABD不符合题意，C符合题意。故选C。【答案点睛】淀粉遇碘显蓝色，曝光部分显蓝色，说明光照下合成了淀粉。3、B【答案解析】

基因突变是基因结构的改变，包括碱基对的增添、缺失或替换。基因突变发生的时间主要是细胞分裂的间期.基因突变的特点是低频性、普遍性、少利多害性、随机性、不定向性。【题目详解】A、题意显示mRNA上一个编码氨基酸的密码子改变了，不是mRNA缩短了，A错误；B、基因突变的结果导致其某mRNA上一个编码氨基酸的密码子转变成终止密码子，故花椰菜细胞内相关基因的翻译过程，所需tRNA和氨基酸的种类数目不一定相同，B正确；C、花椰菜是野生甘蓝的相关基因发生基因突变的结果，并未引起染色体的改变，故野生甘蓝和花椰菜的染色体数目相同，C错误；D、甘蓝细胞内，转录可发生在细胞核及叶绿体和线粒体中，D错误。故选B。4、B【答案解析】

A、基因E突变为e后，导致编码的蛋白质中段一个氨基酸改变，这说明E基因突变为e基因发生了碱基对的替换，A错误；B、E基因突变为e基因后，碱基配对仍然遵循碱基互补配对原则，因此e基因中嘌呤与嘧啶的比值不会改变，还是1，B正确；C、由于突变后只会导致蛋白质中段一个氨基酸改变，即该基因突变为e基因后编码的蛋白质的氨基酸总数不变，因此转录时所需的tRNA数量不发生改变，C错误；D、若E、e基因位于同源染色体上，则E、e基因的分离发生在减数第一次分裂后期，若E、e基因位于一条染色体的两条姐妹染色单体上，则E、e基因的分离发生在有丝分裂后期或减数第二次分裂后期，D错误。故选B。5、C【答案解析】

1、肺炎双球菌转化实验包括格里菲斯体内转化实验和艾弗里体外转化实验，其中格里菲斯体内转化实验证明S型细菌中存在某种“转化因子”，能将R型细菌转化为S型细菌；艾弗里体外转化实验证明DNA是遗传物质。2、T2噬菌体侵染细菌的实验步骤：分别用35S或32P标记噬菌体→噬菌体与大肠杆菌混合培养→噬菌体侵染未被标记的细菌→在搅拌器中搅拌，然后离心，检测上清液和沉淀物中的放射性物质。该实验证明DNA是遗传物质。【题目详解】A、噬菌体侵染细菌实验用到了自身对照的方法，A错误；B、噬菌体侵染细菌实验不能证明蛋白质不是遗传物质，B错误；C、“肺炎双球菌离体转化实验”中用到了液体和固体培养基对细菌进行培养，C正确；D、“噬菌体侵染细菌实验”中，若32P标记组的上清液出现少量32P，可能的原因是培养时间太长或太短，D错误。故选C。6、B【答案解析】

本题属于信息题，注意题干信息“R-Ioop结构是一种三链RNA-DNA杂合片段，由于新产生的mRNA与DNA模板链形成了稳定的杂合链。导致该片段中DhIA模板链的互补链只能以单链状态存在”的应用。【题目详解】A、R-loop结构是一种三链RNA-DNA杂合片段，DNA中有四种脱氧核糖核苷酸，RNA中有四种核糖核苷酸，所以R-loop结构中有8种核苷酸，5种含氮碱基，A正确；B、R-loop结构中mRNA与DNA模板链碱基互补配对，和DNA模板链的互补链碱基序列相似，只是U替代了T，B错误；C、R-loop结构中的DNA单链不稳定，易发生基因突变，C正确；D、根据题干信息“R-loop结构是一种三链RNA-DNA杂合片段，由于新产生的mRNA与DNA模板链形成了稳定的杂合链。导致该片段中DNA模板链的互补链只能以单链状态存在”可推测R-loop结构既影响DNA复制又影响基因的表达，D正确。故选B。7、C【答案解析】

成熟的植物细胞构成渗透系统，可发生渗透作用。质壁分离的原因：外因：外界溶液浓度＞细胞液浓度；内因：原生质层相当于一层半透膜，细胞壁的伸缩性小于原生质。【题目详解】A、大液泡中含有大量的水，当外界溶液浓度高于细胞液浓度时，大量水外流，可出现明显的质壁分离现象；只有活细胞的原生质层才具有选择透过性，才能出现质壁分离，所以实验材料应选择有活性的且有大液泡的植物细胞，A正确；B、该实验的第一次显微观察是装片制作完成后，观察活细胞的正常形态，目的是与滴加蔗糖溶液后发生质壁分离的细胞形态进行对照，所以应在显微镜下看到正常细胞后再滴加高浓度蔗糖溶液，B正确；C、理论上具有大液泡的成熟植物活细胞在一定浓度的蔗糖溶液中都可以发生质壁分离，具紫色液泡的洋葱表皮细胞因液泡为紫色，在实验过程中更容易观察到液泡体积的变化。并非只有液泡有颜色的植物细胞才能发生质壁分离，C错误；D、溶质分子进出细胞的方式有自由扩散、主动运输等，不能通过植物细胞的质壁分离及复原实验来证实，D正确。故选C。8、A【答案解析】

特异性免疫包括体液免疫和细胞免疫，其具体过程如下：【题目详解】A、对癌变细胞的清除体现了免疫系统的监控和清除功能，A正确；B、PD-L1蛋白和PD-1蛋白结合，抑制T细胞活性，体现了细胞膜“进行细胞间信息交流”功能，B错误；C、只有T细胞表面的PD-1蛋白可与抗PD-1抗体结合，C错误；D、癌症患者体内的PD-1蛋白表达不足，会使得癌细胞表面的PD-L1蛋白与T细胞表面的PD-1蛋白结合减少，使癌细胞对T细胞的抑制作用减弱，因此，机体细胞免疫的能力会增强，D错误。故选A。二、非选择题9、多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶脂酶酶制剂开水使血渍或奶渍中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗反应物的减少量或产物的增加量温度和酶的抑制剂需要设置，不同的温度梯度之间或不同的pH梯度之间就可以作为对照，即设置相互对照化学结合法【答案解析】

果胶酶能够分解果胶，瓦解植物的细胞壁及胞间层，使榨取果汁变得更容易，而果胶分解成可溶性的半乳糖醛酸，也使得果汁变得澄清。【题目详解】（1）果胶酶是分解果胶的类酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶脂酶等。（2）加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。对于衣服上的血渍和奶渍，清洗时不能使用开水，因为开水可使血中的蛋白质变性而沉淀，难以清洗。（3）酶反应速度可以用单位时间内、单位体积中反应物的减少量或产物的增加量来表示。影响酶活性的外界条件包括pH、温度和酶的抑制剂等。在探究温度或pH对酶活性的影响时，需要设置对照实验，不同的温度梯度之间或不同的pH梯度之间就可以作为对照，即设置相互对照。（4）工业生产中，若把酶固定在不溶于水的载体上可以被反复利用。一般来讲，酶更适合采用化学结合法和物理吸附法固定化。【答案点睛】使用加酶洗衣粉时，需要用温水洗涤，水温过高会导致酶失活，影响洗涤效果。10、酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌无以核膜为界限的细胞核酵母菌属于兼性厌氧型，醋酸菌属于需氧型分解果肉中的果胶，使发酵液澄清，提高果肉利用率促进酵母菌的有氧呼吸，增加酵母菌的数量创造无氧环境，以便于酵母菌的无氧发酵产生酒精下降【答案解析】

1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。温度是酵母菌生长和发酵的重要条件，21℃左右，罪与酵母菌繁殖酒精发酵时，一般在一般将温度控制在12~25℃，在葡萄酒自然发酵过程当中，其主要作用的是附着在葡萄皮上的野生酵母菌。2、醋酸菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。在变酸的酒的表面观察到的菌膜就是醋酸菌在液面大量繁殖而形成的。实验表明，醋酸菌对氧气的含量特别敏感，当进行深层发酵时，即使只是短时间中断通人氧气，也会引起醋酸菌死亡。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为31~35

C。【题目详解】（1）酵母菌是真核、兼性厌氧生物，醋酸菌是原核、需氧型生物，故从细胞结构角度分析，酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌无以核膜为界限的细胞核；从代谢的角度分析，酵母菌属于兼性厌氧型，醋酸菌属于需氧型。（2）果胶酶能分解果肉中的果胶，使发酵液澄清，提高果肉利用率，因此为了达到上述目的需要向果浆中加入1．1～1．3%的果胶酶。（3）在猕猴桃酒发酵的过程中需要对装置先通氧后密封，通氧的目的是促进酵母菌的有氧呼吸，让酵母菌在有氧的条件下快速繁殖，从而增加酵母菌的数量，通过密封创造无氧环境，以便于酵母菌的无氧发酵产生酒精。（4）由分析可知，当向猕猴桃酒液中添加适量葡萄糖，此时醋酸菌会直接将葡萄糖分解成醋酸，同时醋酸菌对猕猴桃酒液中乙醇的利用率会下降，即利用酒精间接转化成乙酸的速率下降。【答案点睛】熟知酵母菌和醋酸菌的生理特性是解答本题的关键，掌握酒精发酵和醋酸发酵的操作要点是解答本题的另一关键！11、图2、图3、图1、图4次级卵母细胞基因突变染色单体图3b、c4图1和图4【答案解析】

分析图1：该细胞不含同源染色体，着丝点位于赤道板上，处于减数第二次分裂中期；分析图2：该细胞中含有同源染色体，且着丝点分裂，处于有丝分裂后期；分析图3：该细胞中同源染色体正在分离，处于减数第一次分裂后期；分析图4：该细胞不含同源染色体，且着丝点分裂，处于减数第二次分裂后期；分析图5：该细胞中染色体：染色单体：DNA=1：2：2，且染色体数目与体细胞相同，处于减数第一次分裂、有丝分裂前期和中期；分析图6：a组细胞中染色体含量是体细胞的一半，是减数分裂形成的配子；b组细胞中的染色体含量与体细胞相同，处于有丝分裂前期和中期、减数第一次分裂、减数第二次分裂后期；c组细胞中染色体含量是体细胞的2倍，处于有丝分裂后期；分析图7：AF段表示有丝分裂；FI表示减数分裂。【题目详解】（1）原始生殖细胞先通过有丝分裂方式增殖，再通过减数分裂方式形成配子，因此图1～4细胞分裂的先后顺序是图2、图3、图1、图4；根据图3细胞的不均等分裂可知该生物的性别为雌性，图1细胞处于减数第二次分裂中期，再结合图1和图3中染色体颜色可知，其名称是次级卵母细胞；由图1和图4所标注基因可推知，在该细胞增殖过程中发生的变异类型是基因突变。该细胞最终形成的最重要的子细胞基因型为AbE或Abe。（2）若图5中的b代表核DNA含量，则c最可能代表染色单体含量。图5细胞中染色体：染色单体：DNA=1：2：2，且染色体数目与体细胞相同，处于减数第一次分裂、有丝分裂前期和中期，因此图1～4中，与图5表示数量变化相符的是图3。（3）该动物体内的细胞在增殖过程中，当发生着丝粒分裂后，细胞处于减数第二次分裂后期或有丝分裂后期，分别将处于图6中的b、c组。（4）图7中CD段，细胞处于有丝分裂后期，此时细胞内含有4个染色体组，8个核DNA分子。图7中HI段表示减数第二次分裂，因此图1～4中，与图7中HI段相对应的是图1和图4。【答案点睛】本题结合图解，考查细胞的有丝分裂和减数分裂，要求考生识记细胞有丝分裂和减数分裂不同时期的特点，掌握有丝分裂和减数分裂过程中染色体行为和数目变化规律，能正确分析题图，再结合所学的知识准确答题。12、限制酶和DNA连接CaCl2基因突变引物A引物B引物C引物DPCR1√√××PCR2××√√PCR3××××PCR4√××√含有蛋白A基因的重组质粒、空质粒（pET质粒）抗原-抗体杂交抑菌圈对人、畜、农作物和自然环境安全；不会造成基因污染；有效成分纯度较高【答案解析】

（一）基因工程的基本工具1、“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。2、“分子缝合针”——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶（E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。②区别：E•coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体，可用于连接粘性末端和平末端，但连接效率较低。（2）与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键．DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。3、“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。（2）最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒。（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1、目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。2、原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成．人工合成目的基因的常用方法有反转录法和化学合成法。3、PCR技术扩增目的基因（1）原理：DNA双链复制（2）过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。第二步：基因表达载体的构建1、目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。2、组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因（1）启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。（2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来．常用的标记基因是抗生素抗性基因。第三步：将目的基因导入受体细胞1、转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。2、常用的转化方法：将目的基因导入植物细胞：采用最多的方法是农杆菌转化法，其次还有基因枪法和花粉管通道法等。将目的基因导入动