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文档简介

2023学年高考生物模拟试卷注意事项1.考生要认真填写考场号和座位序号。2.试题所有答案必须填涂或书写在答题卡上,在试卷上作答无效。第一部分必须用2B铅笔作答;第二部分必须用黑色字迹的签字笔作答。3.考试结束后,考生须将试卷和答题卡放在桌面上,待监考员收回。一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1.下列各项中,属于人体对抗病原体第一道防线的是()A.中性粒细胞对病原体的吞噬B.血浆蛋白对病原体的破坏C.皮肤黏膜对细菌的阻挡作用D.人体对外来器官的排异反应2.下列与“中心法则”有关的叙述,错误的是()A.核酸苷序列不同的基因可表达出相同的蛋白质B.基因转录形成的RNA产物中,可能存在氢键C.RNA聚合酶具有催化DNA双螺旋结构形成的功能D.HIV的遗传物质可直接整合到宿主细胞的遗传物质中3.下列关于育种的说法正确的是()A.多倍体育种和单倍体育种的最终目的分别是得到多倍体和单倍体B.自然状态下基因突变是不定向的,而诱变育种时基因突变是定向的C.三倍体无子西瓜培育时使用的秋水仙素作用于细胞减数分裂的过程D.单倍体育种相对杂交育种的优势是更易获得显性纯合子4.下列关于生物膜结构和功能的叙述错误的是()A.线粒体内膜上分布着ATP合成酶 B.神经元的细胞膜上分布着Na+通道C.水绵的类囊体薄膜上含有叶绿素 D.核膜通过囊泡运送RNA到细胞质5.无胸腺裸鼠(简称裸鼠)是由于基因突变导致的先天性胸腺缺陷突变小鼠,已成为生物医学研究的重要实验动物。下列叙述正确的是()A.T细胞的形成与成熟均需要抗原的刺激B.裸鼠通常死于病原体感染或恶性肿瘤C.裸鼠丧失了细胞免疫但保留了体液免疫D.正常情况下裸鼠对器官移植的排斥作用会增强6.某同学将豌豆幼苗横放数小时后,将一段弯曲部位制成临时装片,观察到细胞大小如下图所示。检测到Ⅰ侧生长素的浓度低于Ⅱ侧(图中·表示生长素的分布状况)。下列有关叙述错误的是()A.该部位是靠近尖端的分生区B.该区段不可能取自根尖C.Ⅱ侧可能是茎的近地侧D.生长素在该区段未体现两重性二、综合题:本大题共4小题7.(9分)戴口罩、勤洗手是预防新型冠状病毒(COVID--19)的有效措施。某公司在防疫期间推出一款新型免洗洗手凝胶。为衡量该凝胶的清洗效果,研究人员检测了凝胶洗手前后,手部细菌的含量。凝胶洗手前的检测流程见下图。回答下列问题:(1)在进行实验前需要配置培养基,培养基指的是________________________。各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、碳源、氮源、____________。如果培养乳酸杆菌,还需要在培养基中添加________。(2)为统计洗手前手部细菌的数量,应选择的接种方法是____________(填“稀释涂布平板法”或“平板划线法”)。利用该方法统计活菌数量的原理是________________________。(3)根据上图所示的步骤得出的实验结果可信度较低,为了提高实验结果的可信度,请给出两点建议:____________________。(4)培养一段时间后可根据__________(至少填两项)等菌落特征初步判断培养基上菌种的类型。为了计算洗手前手部单位面积的细菌数量,除上图所给的信息外,还需要知道____________________。8.(10分)应激是指各种紧张性刺激物(应激原)引起的个体非特异性反应。应激时人体代谢明显加快,如大面积烧伤病人每日能量需求是正常人的1.5倍。图表示人体在应激时部分物质代谢变化调节过程,图中“↑”表示过程加强,“↓”表示过程减弱。请回答:(1)图示应激反应的调节方式是__。应激过程中,激素A的含量将会____。激素B与糖皮质激素在血糖调节中的关系是____。(1)交感神经细胞与肾上腺髓质细胞之间交流的信号分子是___,这种分子必须与肾上腺髓质细胞膜表面的___结合,才能发挥调节作用。(3)人体全身应激反应一般分为警觉期、抵抗期和衰竭期三个阶段。警觉期是人体防御机制的快速动员期,这一时期以途径④—⑤(交感一肾上腺髓质系统)为主,主要原因是_________。警觉期使机体处于“应战状态”,但持续时间____。(4)大面积烧伤时,应激反应可持续数周,临床上会发现病人出现创伤性糖尿病。试根据图示过程分析,创伤性糖尿病产生的主要机理:___。9.(10分)科技人员发现了某种兔的两个野生种群,一个种群不论雌、雄后肢都较长,另一种群不论雌、雄后肢都较短,为确定控制后肢长、短这一相对性状的基因显隐性关系及基因是位于常染色体还是位于性染色体的Ⅰ、Ⅱ1、Ⅱ2区段(如图),兴趣小组同学进行了分析和实验(Ⅰ区段为X染色体与Y染色体的同源区段,在此区段中有等位基因;Ⅱ1区段为Y染色体上特有区段,Ⅱ2区段为X染色体上特有区段)。请回答下列问题:(1)在兔的种群中Ⅱ2区段是否有等位基因:__________(填“是”或“否”),兔在繁殖过程中性染色体上能发生基因重组的区段是____________________________。(2)首先同学们认为可以确定控制后肢长、短的基因不位于Ⅱ1区段,理由是________________________。(3)同学们分别从两种群中选多对亲本进行了以下两组实验:甲组:♂后肢长×♀后肢短→F1后肢短;乙组:♀后肢长×♂后肢短→F1后肢短。从两组实验中可得到以下结论:后肢长度的显隐性关系为___________________,在此基础上可以确定基因不位于__________,理由____________________________________。(4)为进一步确定基因的位置,同学们准备分别用乙组的F1与亲代个体进行两组回交实验:丙组:F1雌×亲代雄;丁组:F1雄×亲代雌,以确定基因位于Ⅰ区段还是位于________________。10.(10分)回答下列(一)、(二)小题。(一)镇江香醋素以“酸而不涩、香而微甜、色浓味鲜”而蜚声中外。下图是镇江香醋的生产工艺简化流程:(1)蒸煮的目的:使原料在高温下灭菌,同时_________,淀粉被释放出来,淀粉由颗粒状变为溶胶状态。(2)由于酵母菌缺少淀粉水解酶系,糯米需经蒸煮后在a-淀粉酶的作用下液化,后加入糖化酶糖化,目的是_________。30min后,装入发酵罐再接入酵母进行_________。在操作过程中,发酵罐先通气,后密闭。通气能提高_________的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。(3)醋酸发酵时酒精应先_________,否则会因浓度过高抑制醋杆菌的增殖。发酵过程需敞口操作,麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料,其目的是_________。发酵过程中可通过高效液相色谱技术对多种有机酸组成及动态变化进行研究。将_________在相同的色谱条件下进行检测,绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。(4)黑曲霉可产生a-淀粉酶用于液化,还可以产生果胶酶将果胶彻底分解为_________。(二)请回答下列与基因工程和植物克隆有关的问题。(1)质粒的抗性基因是常用的_________标记,如果质粒的抗性基因内有若干单一的限制性酶切位点就更好。当外源基因插入这样的酶切位点时,会使该抗性基因失活,这时宿主菌变为对该抗生素_________的菌株,容易检测出来。(2)双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端,但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把_________连接起来,从而保证目的基因只以一个方向连接入载体。影响DNA连接反应的因素有_________(写出两点)。(3)花药培养是单倍体克隆的主要方法。花药再生植株的产生有两条途径:一是烟草等植物通过形成花粉胚的_________途径,二是水稻等植物通过产生芽和根的_________途径,最后发育成单倍体植物。水稻花药培养除了得到单倍体植物,还可以得到来源于花药体细胞的_________植株,因此需要对后代进行进一步的筛选。11.(15分)(某科学工作者做“噬菌体侵染细菌的实验”时,分别用同位素32P、35S、18O和14C对噬菌体以及大肠杆菌成分做了如下标记。请回答下列有关问题:第一组第二组第三组噬菌体成分用35S标记未标记用14C标记大肠杆菌成分用32P标记用18O标记未标记(1)“噬菌体侵染细菌的实验”与艾弗里等人的肺炎双球菌转化实验在设计思路上的共同点是:__________________。(2)第二组实验中,子代噬菌体蛋白质外壳中存在的氧元素有_____。一般地说,第三组实验中,子代噬菌体的DNA中___________(填“一定含有”或“一定不含有”或“不一定含有”)14C。(3)假如在第一组实验中,噬菌体DNA在细菌体内复制了三次,那么从细菌体内释放出的子代噬菌体中含有32P的噬菌体和含35S的噬菌体分别占子代噬菌体总数的_______。(4)第二组与第三组实验经过一段时间培养后离心,检测到放射性的主要部位分别是___________、_______________。

参考答案一、选择题:(共6小题,每小题6分,共36分。每小题只有一个选项符合题目要求)1、C【解析】

人体免疫系统有三道防线,第一道防线是皮肤、黏膜及其分泌物,第二道防线是吞噬细胞、杀菌物质以及炎症反应,第三道防线是特异性免疫,包括体液免疫和细胞免疫;第一、第二道防线属于非特异性免疫,第三道防线属于特异性免疫。【详解】中性粒细胞对病原体的吞噬属于第二道防线,A错误;体液中的杀菌物质和吞噬细胞组成人体的第二道防线,因此血浆蛋白对病原体的破坏作用属于人体的第二道防线,B错误;皮肤油脂对细菌的抑制作用属于人体对抗病原体的第一道防线,C正确;人体对外来器官的排异反应属于第三道防线,D错误。故选:C。2、D【解析】

中心法则:(1)遗传信息可以从DNA流向DNA,即DNA的复制;(2)遗传信息可以从DNA流向RNA,进而流向蛋白质,即遗传信息的转录和翻译.后来中心法则又补充了遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA两条途径。【详解】A、由于密码子具有简并性,因此核苷酸序列不同的基因可表达出相同的蛋白质,A正确;B、基因转录形成的tRNA中存在双链区,含有氢键,B正确;C、转录时RNA聚合酶具有解开DNA双螺旋结构的功能,并以DNA的一条链为模板合成RNA,C正确;D、HIV的遗传物质为RNA,故需通过逆转录形成DNA后才能整合到宿主细胞的染色体中,D错误。故选D。【点睛】本题考查中心法则及其发展,要求考生识记中心法则的主要内容及后人对其进行的补充和完善,能结合所学的知识准确判断各选项,属于考纲识记和理解层次的考查。3、D【解析】

本题考查杂交育种、诱变育种等相关知识,要求考生掌握几种不同育种方法的方法、原理、优点、缺点和实例。杂交育种原理:基因重组(通过基因分离、自由组合或连锁交换,分离出优良性状或使各种优良性状集中在一起);诱变育种原理:基因突变,方法:用物理因素(如X射线、γ射线、紫外线、激光等)或化学因素(如亚硝酸、硫酸二乙脂等)来处理生物,使其在细胞分裂间期DNA复制时发生差错,从而引起基因突变;单倍体育种原理:染色体变异,方法与优点:花药离体培养获得单倍体植株,再人工诱导染色体数目加倍,优点明显缩短育种年限,原因是纯合体自交后代不发生性状分离;多倍体育种:原理:染色体变异,方法:最常用的是利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗.秋水仙素能抑制有丝分裂时纺缍丝的形成,能得到染色体数目加倍的细胞。【详解】A、多倍体育种的最终目的是得到多倍体,单倍体育种的最终目的是得到稳定遗传的可育后代,而不是单倍体,A错误;

B、自然状态下和诱变育种时基因突变都是不定向的,B错误;

C、三倍体无子西瓜培育时使用的秋水仙素作用于细胞有丝分裂的前期,抑制纺锤体的形成,C错误;

D、单倍体育种相对杂交育种的优势是更易获得能稳定遗传的显性纯合子,明显缩短育种年限,D正确。

故选D。4、D【解析】

1、生物膜的主要成分是磷脂和蛋白质,其中蛋白质是生命活动的主要承担者。2、细胞膜上离子通道的功能,除了可以调节细胞内外的渗透压,也是维持细胞膜电位的重要分子,而神经细胞要进行讯号传导,便是靠离子的进出以造成膜电位的变化。3、线粒体和叶绿体都可以产生ATP,线粒体是进行有氧呼吸的第二和第三阶段的场所,其中线粒体内膜是进行有氧呼吸的第三阶段,产生大量的ATP;叶绿体是进行光合作用的场所,在类囊体薄膜上进行光反应,能产生ATP。4、核膜是双层膜,上面有核孔,是蛋白质和RNA通过的地方。【详解】A、线粒体内膜是进行有氧呼吸第三阶段的场所,发生的反应为24[H]+6O2→12H2O+能量,释放的能量部分用于合成ATP,因此内膜上分布有ATP合成酶,A正确;B、神经元细胞膜上有Na+、K+等离子通道,在神经冲动的传导中离子通道是局部电流产生的重要结构基础,B正确;C、水绵叶绿体类囊体薄膜是光合作用中光反应的场所,类囊体薄膜上含有色素以及催化ATP合成的酶,C正确;D、细胞核内的RNA是通过核孔运输到细胞质的,D错误。故选D。【点睛】本题的知识点是细胞膜的结构特点与功能特点,生物膜的结构与功能的关系。对于生物膜系统的组成成分、结构和功能上的联系、生物膜的结构特点和功能特点的理解并结合具体细胞的结构和功能分析是解题的关键。5、B【解析】

根据题意分析可知:缺少胸腺的鼠,造血干细胞将不能正常发育成T细胞,T细胞在体液免疫中能识别和呈递抗原,但少部分的抗原可以直接刺激B淋巴细胞,因此缺少T细胞,体液免疫功能降低。在细胞免疫中,T细胞增殖分化形成效应T细胞和记忆细胞,因此缺少T细胞,细胞免疫丧失。【详解】A、T淋巴细胞起源于骨髓中的淋巴干细胞,一部分淋巴干细胞在发育过程中先进入胸腺,在此分化增殖,发育成熟,T细胞的形成与成熟不需要抗原刺激,A错误;B、裸鼠先天胸腺缺陷,不能形成T细胞,由于T细胞既参与细胞免疫又参与体液免疫,所以裸鼠的免疫能力几乎全部丧失,通常死于病原体感染或恶性肿瘤,B正确;C、由于T细胞参与细胞免疫和大部分的体液免疫,所以裸鼠无细胞免疫,体液免疫能力也降低,C错误;D、由于对器官移植的排斥作用靠的是T细胞参与的细胞免疫,而裸鼠不能形成T细胞,所以正常情况下,裸鼠对移植的器官几乎没有排斥作用,D错误。故选B。6、A【解析】

根据题意和图示分析可知:将豌豆幼苗横放几小时后,取一段弯曲部位制成的临时装片,图中Ⅱ侧生长素较多、细胞较长,Ⅰ侧生长素较少、细胞较短,说明Ⅰ侧生长较快,生长素促进作用较大,Ⅰ侧生长较慢,生长素促进作用较小,该实例没有体现生长素作用的两重性,说明该部位应该取自茎的尖端下面一段。【详解】A、图示为弯曲部位,应该是靠近茎尖下面一段的伸长区,不可能是分生区,A错误;B、根据以上分析已知,图示实例没有体现生长素的两重性,若为根尖则Ⅱ侧生长素浓度高应为抑制作用,因此该部位不可能取自根尖,B正确;C、Ⅱ侧生长素浓度高,促进作用大,可能是茎的近地侧,C正确;D、生长素在该区段都是促进作用,未体现两重性,D正确。故选A。二、综合题:本大题共4小题7、人们按照微生物对营养物质的需求不同,配制出供其生长繁殖的营养基质无机盐维生素稀释涂布平板法当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌,通过统计平板上的菌落数,就可以推测出样品中大约含有多少活菌①同一稀释度下涂布三个平板,取三个平板上菌落数的平均值②设置一组未接种的空白培养基,排除杂菌污染对实验结果造成的干扰菌落的大小、形状(隆起程度和颜色)稀释倍数和涂布平板时所取的稀释液体积【解析】

1、各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、无机盐、碳源、氮源;另外,培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质、氧气的要求。2、微生物常见的接种方法(稀释涂布平板法可用于微生物的计数):

①平板划线法:将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板,接种,划线,在恒温箱里培养。在线的开始部分,微生物往往连在一起生长,随着线的延伸,菌数逐渐减少,最后可能形成单个菌落。

②稀释涂布平板法:将待分离的菌液经过大量稀释后,均匀涂布在培养皿表面,经培养后可形成单个菌落。【详解】(1)培养基指人们按照微生物对营养物质的需求不同,配制出供其生长繁殖的营养基质。一般培养基中均含有碳源、氮源、水和无机盐,在培养乳酸杆菌时还需要额外添加维生素。(2)平板划线无法得知稀释倍数,因此不能用于活菌计数。稀释涂布平板法用于活菌计数的原理是当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数,就可以推测出样品中大约含有多少活菌。(3)实验设计需要遵循对照原则和平行重复原则,因此需要的改进措施有:①同一种稀释度下涂布三个平板,取三个平板上菌落数的平均值;②设置一组未接种的空白培养基,排除杂菌污染对实验结果造成的干扰。(4)菌落的特征包含菌落的大小、性状、颜色和隆起程度。洗手前手部单位面积的细菌数量=(平板上的菌落数÷涂布时取样的体积×稀释倍数×10ml)÷取样的面积,因此,除图中所给信息外,还需要知道稀释倍数和涂布平板时所取的稀释液体积。【点睛】本题的知识点是微生物的培养与计数,意在强化学生对微生物培养过程的理解与运用。8、神经调节和体液调节增加拮抗作用神经递质特异受体这一调节途径中有神经参与,对外界刺激作出反应速度快短在应激状态下,病人体内胰岛素分泌减少,胰高血糖素、肾上腺素和糖皮质激素分泌增加,导致病人出现高血糖症状,形成糖尿【解析】

据图分析可知:机体受应激源刺激后,下丘脑分泌的促肾上腺皮质激素释放激素含量会升高,最终使蛋白质分解加快,脂肪转为糖的速率加快;同时脑干的交感神经兴奋,作用于肾上腺髓质,进而引发机体的一系列反应,此过程中既有神经调节,也有体液调节。【详解】(1)据图分析可知,图示既有下丘脑和脑干参与的神经调节,也有多种激素参与的调节,故为神经调节和体液调节;据图分析可知,激素A是由胰岛A细胞分泌的胰高血糖素,根据作用结果为肝糖原分解加快,可判断胰高血糖素的含量为增加;糖皮质激素的作用是促进非糖物质转化为糖,激素B(胰岛素)的作用是促进糖转化为非糖物质,故两者血糖调节中的作用是拮抗。(1)交感神经细胞与肾上腺髓质细胞(靶细胞)通过信号分子神经递质进行交流;神经递质必须与靶细胞(肾上腺髓质)细胞膜表面的特异受体结合,才能发挥调节作用。(3)警觉期以途径④—⑤神经调节(交感一肾上腺髓质系统)为主,是因为与体液调节相比,这一调节途径中有神经参与,对外界刺激作出反应速度快,但该调节方式持续时间短。(4)据图分析可知:在应激状态下,病人体内胰岛素分泌减少,胰高血糖素、肾上腺素和糖皮质激素分泌增加,导致病人出现高血糖症状,形成糖尿,故若应激反应可持续数周,临床病人会出现创伤性糖尿病。【点睛】本题结合题图考查神经调节与体液调节的关系,要求考生能明确各种激素的作用,熟悉体液调节和神经调节的联系与区别,进而结合题图作答。9、是Ⅰ区段和Ⅱ2区段不论雌、雄后肢长度表现都一致,与性别无关后肢短对后肢长为显性Ⅱ2区段乙组实验F1没有出现交叉遗传现象常染色体【解析】

基因位置的判断方法。在常染色体上还是X染色体上的判断方法:1.已知性状的显隐关系,通常采用隐性的雌性和显性的雄性的个体进行杂交,若后代中雌雄个体表现型一致,则位于常染色体上;若后代中雌性表现为显性,雄性表现为隐性,则相关基因位于X染色体上。2.未知性状的显隐关系,通常采用正反交实验,若正反交结果相同,则位于常染色上;若正反交结果不同,则位于X染色体上。【详解】(1)在XY型性别决定的生物中,雌性体内有2条同型的性染色体,用XX表示,雄性体内有2条异型的性染色体,用XY表示。Ⅱ2为X染色体上特有区段,因此在兔的种群中Ⅱ2片段有等位基因;兔在繁殖过程中,X染色体与Y染色体的同源区段即I区段上,以及X染色体特有区段即Ⅱ2区段上都能发生基因重组。(2)Ⅱ1区段为Y染色体上特有区段,该区段上的基因控制的性状表现为限雄遗传,而题意显示,某种兔的两个野生种群,不论雌、雄后肢长度表现都一致,不表现限雄遗传,因此可以确定控制后肢长、短的基因不位于Ⅱ1区段。(3)分析两组实验结果可知:无论用后肢长的个体作父本,还是作母本,即无论正交还是反交F1都表现为后肢短,由此说明,后肢短对后肢长为显性,且控制该性状的基因不位于Ⅱ2片段上(或乙组实验F1没有出现交叉遗传现象,可以确定基因不位于Ⅱ2片段上)。(4)结合对(2)和(3)的分析,已经排除了基因位于Ⅱ1片段与Ⅱ2片段上的可能性,因此分别用乙组的F1与亲代个体进行两组回交实验的目的是:为进一步确定基因是位于I区段上还是位于常染色体上。【点睛】本题考查伴性遗传、基因的自由组合定律的相关知识。熟知所学知识的要点,把握知识间的内在联系是解答本题的关键!能从题图中提取有效信息并运用所学知识与观点,通过比较、分析与综合等方法对某些生物学问题进行解释、推理,做出合理的判断是解答本题的另一关键!。10、使植物细胞破裂将淀粉分解成糖酒精发酵酵母菌(用水)稀释增加通气性各种有机酸的标准溶液半乳糖醛酸筛选敏感相同的粘性末端温度、酶的用量、反应时间胚胎发生器官发生二倍体【解析】

基因工程技术的基本步骤:(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样.将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法;将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法;将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。(4)目的基因的检测与鉴定。【详解】(一)(1)蒸煮的目的:使原料在高温下灭菌,同时高温可以破坏细胞膜,使细胞中的淀粉被释放出来。(2)淀粉在a-淀粉酶的作用下变成糊精,糊精在β-淀粉酶的作用下变成麦芽糖,麦芽糖在糖化淀粉酶的作用下变成葡萄糖。加入糖化酶糖化,目的是糖化。30min后,装入发酵罐再接入酵母进行酒精发酵,酵母菌利用葡萄糖进行厌氧呼吸可产生酒精。酵母菌繁殖需要能量,而需氧呼吸能提供更多的能量,通气能提高酵母菌的数量,有利于密闭时获得更多的酒精产物。(3)酒精含量过高,醋杆菌容易死亡,因此醋酸发酵时酒精应先(用水)稀释。发酵过程需敞口操作,麸皮和糠等拌匀制作成松散的发酵料,都是为了增加通气性。将各种有机酸的标准溶液在相同的色谱条件下进行检测,绘制标准曲线。再根据其对发酵过程中的有机酸含量进行测算跟踪发酵进程。(4)果胶是半乳糖醛酸的高聚物,果胶酶可将果胶彻底分解为半乳糖醛酸。(二)(1)质粒常含有抗性基因用于重组质粒的筛选。当外源基因插入这样的酶切位点时,会使该抗性基因失活,抗性基因无法表达,这时宿主菌变为对该抗生素敏感的菌株,容易检测出来。(2)双酶切会使载体和目的基因的DNA都产生两种不同的粘性末端,但DNA连接酶在适宜pH条件下会选择把相同的粘性末端连接起来,避免单酶切使目的基因或质粒自连或反向连接,保证目的基因只以一个方向连接入载体。温度、酶的用量、反应时间都会影响DNA连接反应

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